Microscopía y tinciones.
1. El microscopio.
Es un instrumento destinado a la observación de objetos muy
pequeños que no se pueden observar a simple vista.
•Microscopio óptico (200nm).
•Microscopio laser confocal.
•Microscopio electrónico de transmisión (TEM) (0,2 nm)
•Microscopio electrónico de barrido (SEM)
Puede aportarnos información muy diversa:
•Morfología:
Microscopio óptico.
SEM.
•Estructura:
Microscopio óptico.
TEM.
•Composición:
Adición al SEM o al TEM de espectroscopia de rayos X.
2. Propiedades del microscopio.
•Los aumentos: vendrán dados por los objetivos (son lentes
convexas; más gruesas por el centro que los extremos y desvían los
rayos de luz por refracción encontrándose en un solo punto: el punto
focal).
La distancia entre el objetivo y la lente es la distancia focal. A menor
distancia focal mayor tamaño.
•Contraste: diferencias en la intensidad de luz lo que nos permite
apreciar que una zona de la imagen es diferente de otra próxima
o del fondo del campo.
La mayoría de microorganismos carecen de color, si los
observásemos a campo claro1 no los veríamos.
Para aumentar el contraste se pueden usar colorantes, teñirlos… Al
realizar una tinción los microorganismos mueren, si lo que queremos
es ver el movimiento, tendremos que utilizar distintos campos para
ello.
•Resolución: depende del objetivo, de la longitud de onda de la
luz y del índice de refracción.
3. Tinciones.
Tema 2: Microscopía y tinciones.
Tema 2: Microscopía y tinciones.
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1 Microscopía de campo claro: método más empleado en biología, se compone de dos
series de lentes (objetivo y ocular) que funcionan conjuntamente para producir la imagen.
Con este tipo de microscopio las muestras se visualizan gracias a las diferencias de contraste
entre ellas y el medio que las rodea. Estas diferencias de contraste se producen porque las
células absorben o dispersan la luz en diferentes grados. Los microorganismos
pigmentados mejoran su visualización.
