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Práctica 4: Biología celular, Apuntes de Biología Celular

Práctica 4: Mitosis en células vegetales. Biología celular.

Tipo: Apuntes

2018/2019

Subido el 01/06/2019

judith8
judith8 🇪🇸

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Observación de la mitosis en
células vegetales. Análisis del
efecto de la colchicina
1 Introducción
La mitosis es el fenómeno por el cual una célula somática origina dos células
hijas, cada una de las cuales recibe idéntica información genética y
citoplasmática. Para la mayor parte de los constituyentes celulares, no hace
falta que la duplicación y el posterior reparto sea exacto. Pero en el caso del
material genético, la duplicación sí que ha de serlo y, además, el reparto de los
cromosomas entre las dos células hijas tiene que ser muy preciso. Esto
requiere una maquinaria especial que asegure que la replicación del DNA se
ha producido adecuadamente sólo una vez antes de la división y que los
cromosomas se reparten de manera idéntica entre las dos células hijas.
Aunque la mitosis es un proceso continuo, se ha dividido en cuatro fases que
ocurren en una secuencia estrictamente ordenada. Cada una se caracteriza por
una serie de acontecimientos:
Profase. Se caracteriza por la desaparición de la envuelta nuclear y del
nucleolo, y la condensación de la cromatina, por lo que los cromosomas se
hacen visibles (Figura 1).
Metafase. Los cromosomas se sitúan en el ecuador del huso mitótico, a medio
camino entre los dos polos del huso (Figura 2).
Anafase. Las cromátidas hermanas de cada cromosoma se separan y se
mueven hacia polos opuestos del huso mitótico (Figura 3).
Telofase. Los cromosomas se descondensan y se forma la envuelta nuclear
(Figura 4).
Citocinesis o división del citoplasma. Es diferente en las células vegetales y en
las animales. Empieza durante la anafase y continúa hasta el final de la
mitosis. En las células vegetales se produce por la formación de una pared
celular entre las células hijas (Figura 4), mientras que en las células animales
tiene lugar por la formación de un anillo contráctil de actina y miosina,
generalmente en el plano ecuatorial de la célula madre, que acaba
estrangulando la célula y produciendo dos células hijas.
Para observar las diferentes fases de la mitosis hay que utilizar un tejido en
crecimiento donde habrán muchas células en división y, probablemente,
podremos ver algunas en cada una de las fases de la mitosis. Por la facilidad de
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Observación de la mitosis en

células vegetales. Análisis del

efecto de la colchicina

1 Introducción

La mitosis es el fenómeno por el cual una célula somática origina dos células hijas, cada una de las cuales recibe idéntica información genética y citoplasmática. Para la mayor parte de los constituyentes celulares, no hace falta que la duplicación y el posterior reparto sea exacto. Pero en el caso del material genético, la duplicación sí que ha de serlo y, además, el reparto de los cromosomas entre las dos células hijas tiene que ser muy preciso. Esto requiere una maquinaria especial que asegure que la replicación del DNA se ha producido adecuadamente sólo una vez antes de la división y que los cromosomas se reparten de manera idéntica entre las dos células hijas.

Aunque la mitosis es un proceso continuo, se ha dividido en cuatro fases que ocurren en una secuencia estrictamente ordenada. Cada una se caracteriza por una serie de acontecimientos:

Profase. Se caracteriza por la desaparición de la envuelta nuclear y del nucleolo, y la condensación de la cromatina, por lo que los cromosomas se hacen visibles (Figura 1). Metafase. Los cromosomas se sitúan en el ecuador del huso mitótico, a medio camino entre los dos polos del huso (Figura 2). Anafase. Las cromátidas hermanas de cada cromosoma se separan y se mueven hacia polos opuestos del huso mitótico (Figura 3). Telofase. Los cromosomas se descondensan y se forma la envuelta nuclear (Figura 4). Citocinesis o división del citoplasma. Es diferente en las células vegetales y en las animales. Empieza durante la anafase y continúa hasta el final de la mitosis. En las células vegetales se produce por la formación de una pared celular entre las células hijas (Figura 4), mientras que en las células animales tiene lugar por la formación de un anillo contráctil de actina y miosina, generalmente en el plano ecuatorial de la célula madre, que acaba estrangulando la célula y produciendo dos células hijas.

Para observar las diferentes fases de la mitosis hay que utilizar un tejido en crecimiento donde habrán muchas células en división y, probablemente, podremos ver algunas en cada una de las fases de la mitosis. Por la facilidad de

2 Observación de la mitosis

manipulación y de observación, son especialmente indicados los meristemos terminales de las raíces en crecimiento, como las raíces del bulbo de la cebolla ( Allium cepa ).

La colchicina es un alcaloide que se extrae de Colchicum hispanicum que despolimeriza la tubulina. Si se aplica a células en mitosis impide la formación del huso mitótico por lo que los cromosomas no se colocan en la placa metafásica. Esto tiene la ventaja de que facilita el recuento de cromosomas y su estudio. La colchicina penetra rápidamente en las células, por lo que si colocamos las raíces del bulbo de la cebolla en agua, se alterarán las fases de la mitosis a partir del momento de la adición.

2 Objetivos

  • Diferenciar los cambios entre el núcleo en la interfase y el núcleo durante la división.
  • Distinguir las diferentes etapas de la mitosis en células vegetales.
  • Describir los acontecimientos que se producen en cada fase.
  • Realizar una preparación sencilla para estudiar la mitosis.
  • Cálculo del índice mitótico (nº de células en división/nº total de células.
  • Cálculo de los índices de fase (relación entre el nº de células en cada fase y el nº de células en división).

Figura 1. Figura^ 1.

Figura 3 Figura 4

4 Observación de la mitosis

  • Observa la preparación y recorre diversos campos para descubrir células en diversas fases de la mitosis.

Para estudiar los efectos de la colchicina sobre la división celular, seguimos el siguiente procedimiento:

  • Preparar colchicina al 0,1%
  • Sumergir las raíces en la solución durante: a. 60 min b. 120 min
  • Fijar las raíces en una solución de etanol:acético.
  • Seguir el procedimiento de tinción que hemos explicado anteriormente.
  • Determinar los índices de fase de tu grupo y compáralo con el resto de los grupos de la clase.

5 Resultados

  1. ¿Qué diferencias morfológicas hay entre las células meristemáticas y el resto?
  2. ¿Qué diferencias observas entre el núcleo interfásico y el núcleo en división?
  3. ¿A qué corresponden las zonas claras que aparecen en el interior del núcleo interfásico?
  4. Dibuja las células en cada una de las fases de la mitosis
  5. Cálculo del índice mitótico: a. Realiza el recuento de células en tres campos diferentes y distingue las que están en interfase y las que están en división.

Campo 1 Campo 2 Campo 3 Total Interfase Profase Metafase Anafase Telofase TOTAL

Observación de las fases de la mitosis 5

a. Índice mitótico (IM) = nº de células en división/nº total. b. Compara el índice mitótico de tu grupo con los restantes de la clase. c. Anota cúantas células se encuentran en cada una de las fases de la mitosis. Calcula los índices de fase de cada una de las fases (IF= nº de células en una fase determinada/nº de células en mitosis). Compara el resultado con el resto de los grupos de la clase.

  1. Relaciona los índices de fase en la muestra control con la duración de cada fase de la mitosis.
  2. A la luz de los resultados, explica el efecto de la colchicina.

6 Bibliografía

- ALBERTS B., D. BRAY, J. LEWIS., M. RAFF, K. ROBERTS & J.D.

WATSON. Biología Molecular de la Célula. 5ª Ed. 2010.