PRÁCTICA 1
TITULACIÓN DE ANTICUERPOS
Inmunología (Prácticas)
Prof. Dra. Marta Marín Vázquez
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practica inmunologia, Ejercicios de Veterinaria
Asignatura: Inmunología, Profesor: , Carrera: Veterinaria, Universidad: UCH-CEU
Tipo: Ejercicios
2017/2018
1 / 13
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PRÁCTICA 1
TITULACIÓN DE ANTICUERPOS
Inmunología (Prácticas) Prof. Dra. Marta Marín Vázquez
ANTICUERPOS POLICLONALES Y MONOCLONALES
suero monoclonal
Inmunoprecipitación:
CONDICIONES
- Concentración alta de antígeno y anticuerpo
- Concentraciones equimolares de ambos
- Anticuerpo policlonal
- Antígeno polivalente (epítopos múltiples)
Inmunodifusion pasiva
• Reacciones entre antígeno y anticuerpo
en gel de agar.
• Migran uno hacia el otro y se encuentran
en un punto en el que forman
precipitación.
• “Pasivo” porque no hay ninguna fuerza
que les ayuda (como por ejemplo carga
eléctrica).
Inmunodifusión doble de
Ouchterlony
- Hoyos hechos en agar.
- Ac o Ag conocido se ponen en el centro.
- Muestra conocida se pone en los hoyos exteriores.
- Esperar a que se formen las bandas entre dos hoyos.
- La técnica es solo cualitativa : solo presencia NO CONCENTRACION.
1/ 1/ 1/ 2 1/ 3 1/ 4 1/ 5 1/10^6 1/10^7 SUERO DE PACIENTE (anti-BSA) Antigeno (BSA)
INMUNOPRECIPITACIÓN EN FASE SOLIDA: agar
Es una técnica semicuantitativa que mide la cantidad de anticuerpos presentes en una muestra. Título de anticuerpos: la inversa de la dilución más alta de plasma o suero que tiene una reacción positiva
Titulación de anticuerpos
D C B A Abs 62.5 125 250 500 ng/ml de IgG de conejo