¡Descarga Practica sobre microscopía y más Apuntes en PDF de Biología general solo en Docsity!
PRÁCTICA N° 01
MICROSCOPÍA: Partes del Microscopio compuesto Dr. Blgo. David Milton Lara Ascorbe I. INTRODUCCIÓN: El descubrimiento de lentes de aumento ha favorecido para que la Biología tenga un avance a través del tiempo. Antonio Van Leeuwenhoek ( 1632 – 1723) fue el impulsor de la microscopía. Diferentes tipos de microscopios se han construido, cada vez con mayor poder resolutivo, que permite estudiar y cponocer mejor las estructuras celulares. Es importante para los estudiantes aprender primero la manera de usar correctamente el microscopio antes de observar la célula y algunas estructuras celulares, así como las técnicas de laboratorio. II. MATERIAL Y MÉTODOS: POR LA CÁTEDRA:
- Microscopio compuesto. 2.1. PARTES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO: 2.1.1. SISTEMA MECÁNICO: Es la parte más sólida del microscopio y generalmente es de material metálico en el se encuentra instalado la parte óptica y el sistema de iluminación, comprende: a) Base o pie.- Parte que soporta al microscopio. b) Brazo. - Une la base con el tubo óptico y sirve para trasladar el microscopio c) Mandos de enfoque. - Está constituido por los tornillos macrométrico y micrométrico , la primera sirve para enfocar la imagen y la segunda da nitidez a la observación. Tornillo macrométrico Tornillo micrométrico Fig. 1 Mandos de enfoque coaxial
d) Tubo óptico. - Puede ser monocular, binocular o trinocular (ver Fig. 2 ). Contiene, en la parte superior, al ocular y en la parte inferior se relaciona con el revólver. Monocular Binocular Trinocular Fig. 2. Tipos de cabezales en el microscopio compuesto Se debe tener en cuenta:
- El ajuste interpupilar (ver Fig. 3), que puede ser: Seidentopf Deslizante Fig. 3. Ajuste interpupilar Se usa para ajustar la distancia de los oculares de acuerdo a la distancia entre las pupilas del usuario
- El Ajuste de Dioptrías (Fig.4) Es un ajuste usado para compensar la diferencia de enfoque que existe entre los ojos del usuario. Fig. 4. Ajuste de Dioptrías
Tipos de objetivos: Objetivos en seco .- Son aquellos en cuya distancia focal existe aire. Se utilizan para observar preparados en fresco, generalmente. Se sub – clasifican en: a. Objetivo de menor aumento o Panorámico, cuyo aumento de la imagen es mayor de 0 y menor de 10x. b. Objetivo de mediano aumento, cuyo aumento de la imagen es igual o mayor de 10x y menor de 40x. c. Objetivo de mayor aumento, cuyo aumento de la imagen es igual o mayor de 40x y menor de 100x. Objetivo de inmersión. - Aquellos en cuya distancia focal está cubierta por una sustancia semilíquida, que generalmente es el aceite de cedro, cuyo índice de refracción es de 1,5 igual que el vidrio lo que impide la refracción de la luz al pasar de una medio a otro. Se utilizan para observar preparados en seco. Para identificarlo, fácilmente, tiene una franja de color negro, principalmente, en la parte inferior. La capacidad amplificadora de un microscopio es el producto del aumento del ocular por el aumento del objetivo que está en uso. Las Características principales de un objetivo que se debe tener en cuenta son:
- Aumento
- Corrección de color
- Curvatura del campo visual
- Estándares de construcción
- Paracentrismo y parafocalidad
- Apertura numérica
- Distancia de trabajo 2.1.3. SISTEMA DE ILUMINACIÓN: En toda observación microscópica es indispensable una buena iluminación. Este sistema consta de: a) Fuente luminosa incorporada .- Se ubica en la parte inferior que utiliza focos halógenos de tungteno, últimamente se está utilizando el sistema LED. Iluminación Köhler es un proceso usado para ajustar el microscopio para lograr la mejor combinación de contraste y resolución de la imagen. b) Condensador .- Constituido por lentes plano – convexo, que sirve para concentrar los rayos luminosos provenientes del espejo o la fuente de luz incorporada. Los microscopios que se utiliza tiene condensador abatible y centrable con diafragma de abertura. En la parte inferior del condensador se encuentra el diafragma , que sirve para regular el paso de la luz.
III. RESULTADOS:
Esquematice el microscopio compuesto e indique sus partes: Fig. 7. Microscopio compuesto y sus partes
MICROSCOPIO DE LUZ
Para comprender los trabajos y limitaciones del microscopio de luz, es necesario señalar unos cuantos aspectos de la fuente de iluminación, es decir, la luz E * Longitud de onda
- Frecuencia 0 λ La radiación electromagnética viaja a través del vacío con una velocidad, aproximadamente, de 3 x 10^5 Km / s. Sin embargo, si tal radiación penetra en un material más denso, disminuye su velocidad y el grado de esta disminución se relaciona con la naturaleza de la sustancia y la frecuencia de la radiación. La relación de la velocidad de la luz en el vacío con la velocidad en una sustancia determinada constituye el índice de refracción de dicha sustancia. Cuando un rayo de luz incide oblicuamente sobre una superficie limitante entre dos medios transparentes con diferente índice de refracción, la dirección que toma el rayo a través del segundo medio se modifica, esto es, el rayo se refracta. Normal De acuerdo a la Ley de Snell: Aire R.I. Sen. < de incidencia Vel. de la luz en el 1° plano i R.I.= 1,0 Sen. < de refracción Vel. de la luz en el 2° plano Vidrio R.I.=? r En microscopia la fuente luminosa (luz) que ilumina al espécimen con un pequeño cono de luz debe tener la adecuada intensidad para permitir que se vean pequeñas partes del espécimen con la suficiente amplificación. La forma en que se ilumine el espécimen es de importancia crítica para determinar la calidad de la imagen que se obtiene y la lente objetivo que capta los rayos luminosos. Es necesario considerar 02 grupos de rayos luminosos que penetran la lente objetivo:
- Los rayos modificados por el espécimen.
- Los rayos que no han sufrido este cambio. “El ángulo de refracción para un rayo que pasa hacia un medio de mayor índice de refracción (menor velocidad), por ejemplo, del aire al cristal, siempre es menor que el ángulo de incidencia. En otras palabras, el rayo se dobla con respecto de lo normal”
El último grupo es el cono de luz que pasa, directamente, del condensador al objetivo y forma el cono luminoso del campo óptico. El primero grupo son de los que emanan de los numerosos puntos que componen el objeto. Los rayos de la luz del objeto son ubicados en foco por el objetivo, para formar la imagen, dentro del tubo óptico. La construcción del microscopio es tal, que el objeto (imagen) se localiza más allá del primer punto focal de la fuente luminosa, de esta manera la imagen formada por el objetivo es real, invertida y aumentada (Por el cruce de los rayos luminosos nos proporciona una imagen invertida ). La imagen formada por el objetivo esta hecha para caer dentro del punto focal del ocular, que utiliza esta imagen como objeto para la formación de una imagen virtual, derecha y aumentada. La lente ocular usa la imagen virtual como objeto y se produce en la retina una imagen real. Q” P” Q’’’ P Q
La falta de fidelidad en la formación de la imagen no se debe a un defecto de la lente, sino que es el resultado de la difracción de la luz, dado principalmente por el efecto de los bordes. Que se puede demostrar cuando se hace pasar un haz de luz a través de una estrecha ranura y se proyecta en una pantalla se observará zonas luminosas y zonas con sombra, si la apertura es un orificio la pantalla se iluminaría de un disco brillante rodeado de anillos concéntricos de sombra, conocido como discos de Airy. A mayor apertura de la lente, menores serán los discos de difracción, y mayor será el porcentaje de luz que se tomará proviniendo del objeto” Existen otros 02 factores que determinan el porcentaje de luz de un objeto captada por la lente objetivo y que afecta la resolución de la lente; estos son: el índice de refracción del medio entre el objeto y la lente, y la longitud de onda de la luz. Si existe aire entre el objeto y la lente, los rayos que pasan desde el cubre objetos de vidrio hacia el aire entran en un medio de menor densidad y menor índice de refracción (en comparación con el vidrio) y se desviarán hacia fuera alejándose de la lente. Si hay aceite de cedro entre el cubre objetos y la lente frontal del objetivo no se modifica, debido a que el índice de refracción del aceite es igual al del vidrio (1,5). Fig. 2. Microscopio electrónico
