Anexo Sistema del Complemento
1. Determinación del complemento en el Laboratorio
Dosificación sérica de C3 y C4.
Determinación de la capacidad hemolítica del C` en el suero del paciente (CH50 y
CH100).
En los casos de edema angioneurotico recurrente severo o con antecedente
familiares se debe dosificar en suero la concentración del inhibidor de C1 estearasa
(C1INH).
En los casos de hemogloburina paroxística nocturna se debe evaluar la expresión
de CD59 en GR por citometria de flujo.
Analisis cuantitativo (ELISA) y funcional de los diferentes componentes del
complemento.
Estudios genéticos-moleculares para la caracterización de mutaciones en las
diferentes deficiencias.
Las técnicas para evaluar el complemento pueden dividirse en 2 grupos generales: las
pruebas funcionales y las pruebas inmunoquimicas. La cuantificación de los componentes
mayoritarios del sistema (C3, C4 y C1q) puede realizarse mediantes técnicas como la
inmunodifusion radial o la inmunofelometria. Una limitación de estas técnicas es que
detectan componentes funcionales normales como afuncionales. Algunos antisueros
utilizados en placas de inmunodifusion radial pueden detectar fragmentos de
degradación de los componentes nativos, que puede llevar a valores falsos.
En cuanto a las técnicas funcionales, determinan la dilución de suero requerida para lisar
una proporción dada de celulas indicadoras en condiciones estandarizadas, variando
buffers, condiciones, volúmenes de reacción, celulas indicadoras y maneras de cuantificar
la hemolisis. El sistema indicador más utilizado se compone de eritrocitos de carnero
sensibilizados con Ac anti-eritrocitos de carnero producidos por conejo y conocidos como
hemolisinas. El C´ es activado por Ac unido a las celulas y se fija a las mismas
desencadenando su lisis.
1.1 Determinación de un déficit aislado del complemento
Se trata de una microtécnica hemolítica basada en el CH50. Consiste en añadir
componentes purificados del complemento a un suero con una actividad hemolítica nula
y comprobar si alguno de ellos logra restablecerla, poniendo así de manifiesto el déficit de
dicho factor.
2. Valoración de la vía clásica
La valoración del C´ (VIA CLASICA) puede realizarse por medio de métodos que
determinan la hemoglobina liberada. Tras el efecto citotóxico sobre eritrocitos
sensibilizado.
