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Sustrato e inhibicion, Apuntes de Bioquímica

Las sustancias que reducen la actividad de una enzima de esta forma se conocen como inhibidores. Los inhibidores actúan a través de varios mecanismos. Inhibición competitiva Una sustancia que compite directamente con su sustrato normal por el sitio de unión a la enzima se conoce como inhibidor competitivo, este tipo se asemeja al sustrato, de forma tal que se una específicamente al sitio activo, pero difiere del sustrato en tanto que no reacciona de la misma forma que este.

Tipo: Apuntes

2019/2020

Subido el 13/06/2020

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
Escuela Nacional de Ciencia Biológicas
Bioquímica general
Práctica sustrato e inhibición. Integrantes: Hernández
Nolasco Olga Lilia y Jiménez García Montserrat
Sección 3. Grupo 3FM1
Las sustancias que reducen la
actividad de una enzima de esta
forma se conocen como
inhibidores.
Los inhibidores actúan a través
de varios mecanismos. Los
inhibidores enzimáticos
irreversibles, o inactivadores, se
unen a la enzima tan
fuertemente que bloquean su
actividad en forma permanente.
Los inhibidores enzimáticos
reversibles disminuyen la
actividad de una enzima al
interactuar de manera reversible
con ella. Algunos inhibidores
enzimáticos son sustancias que
se asemejan en cuanto a la
estructura a los sustratos de la
enzima, pero no reaccionan o lo
hacen con mucha lentitud.
Inhibición competitiva
Una sustancia que compite
directamente con su sustrato
normal por el sitio de unión a la
enzima se conoce como inhibidor
competitivo, este tipo se
asemeja al sustrato, de forma tal
que se una específicamente al
sitio activo, pero difiere del
sustrato en tanto que no
reacciona de la misma forma que
este.
Inhibición no competitiva
En este tipo de inhibición, el
inhibidor se una directamente al
complejo enzima-sustrato, pero
no a la enzima libre,
supuestamente distorsiona el
sitio activo, por lo que hace a la
enzima inactiva para la catálisis.
La inhibición no competitiva
requiere que el inhibidor afecte
la función catalítica de la enzima,
pero no la unión de su sustrato.
Realmente es significativa solo
para enzimas con varios
sustratos.
Inhibición mixta
Un inhibidor mixto se une a sitios
de la enzima que participan
tanto en la unión del sustrato
como en la catálisis.
Tipo de
inhibición
Efecto del
inhibidor
Competitiva Aumenta KM
No competitiva Disminuye KM y
Vmáx
Mixta Disminuye Vmáx
y puede
aumentar KM
Objetivo
Determinar el tipo de inhibición
producido por la anilina sobre la
invertasa.
Resultados
Efecto de la concentración de
sustrato
Tabla 1.
1 2 3 4 5 6
Abs 0.32
3
0.5
43
0.5
81
0.7
97
0.8
87
1.0
88
AR (µl/
2 mL)
3.75 5.9 6.1
5
8.2
5
10.
20
11.
89
Vo 0.37 0.5 0.6 0.8 1.0 1.1
pf3

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL Escuela Nacional de Ciencia Biológicas Bioquímica general Práctica sustrato e inhibición. Integrantes: Hernández Nolasco Olga Lilia y Jiménez García Montserrat Sección 3. Grupo 3FM Las sustancias que reducen la actividad de una enzima de esta forma se conocen como inhibidores. Los inhibidores actúan a través de varios mecanismos. Los inhibidores enzimáticos irreversibles, o inactivadores, se unen a la enzima tan fuertemente que bloquean su actividad en forma permanente. Los inhibidores enzimáticos reversibles disminuyen la actividad de una enzima al interactuar de manera reversible con ella. Algunos inhibidores enzimáticos son sustancias que se asemejan en cuanto a la estructura a los sustratos de la enzima, pero no reaccionan o lo hacen con mucha lentitud. Inhibición competitiva Una sustancia que compite directamente con su sustrato normal por el sitio de unión a la enzima se conoce como inhibidor competitivo, este tipo se asemeja al sustrato, de forma tal que se una específicamente al sitio activo, pero difiere del sustrato en tanto que no reacciona de la misma forma que este. Inhibición no competitiva En este tipo de inhibición, el inhibidor se una directamente al complejo enzima-sustrato, pero no a la enzima libre, supuestamente distorsiona el sitio activo, por lo que hace a la enzima inactiva para la catálisis. La inhibición no competitiva requiere que el inhibidor afecte la función catalítica de la enzima, pero no la unión de su sustrato. Realmente es significativa solo para enzimas con varios sustratos. Inhibición mixta Un inhibidor mixto se une a sitios de la enzima que participan tanto en la unión del sustrato como en la catálisis. Tipo de inhibición Efecto del inhibidor Competitiva Aumenta KM No competitiva Disminuye KM y Vmáx Mixta Disminuye Vmáx y puede aumentar KM Objetivo Determinar el tipo de inhibición producido por la anilina sobre la invertasa. Resultados Efecto de la concentración de sustrato Tabla 1. 1 2 3 4 5 6 Abs 0. 3

43

81

97

87

88 AR (μl/ 2 mL) 3.75 5.9 6. 5

5

20

89 Vo 0.37 0.5 0.6 0.8 1.0 1.

(uni. de invera sa) 5 9 15 25 2 [S] (moles /L=M)

8

16

24

32

4 Gráfica 1. 0.01 0.01 0.02 0.02 0.03 0.03 0.04 0.04 0.05 0.05 0. 0

1

Gráfica M-M concentración de sustrato [S] (moles L=M ) Vo (U.I) Tabla 2. Lineweaver-Burk para efecto concentración de sustrato. 1/[S] 1/Vo 125 2. 7 62.5 1. 4

7

31.25 1. 2 25 0. 7

3

3 Gráfica 2. 0 20 40 60 80 100 120 140 0

1

2

3 f(x) = 0.02 x + 0.

Gráfica Lineweaver-Burk

1/[S] 1/Vo Vmáx= 1. KM= ˗^

Km

KM=0.0165 x Vmáx = 0. Tabla 3. Inhibición enzimática 1 2 3 4 5 6

2

32

26

77

07

93 AR (μl/ 2 mL) 2.2 2. 5 3.9 4. 5 3.2 4. 5 (uni. invera 0.22 0. 75

9

45

2

55 (moles /L=M)

8

16

24

2

4

48 Gráfica 3.