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Biología celular tipos investigar
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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Recinto Universitario “Rubén Darío” Instituto Politécnico de la “Luis Felipe Moncada” Departamento de Bioanalisis Clínico Actor: ➢ Br. Cristiana Auxiliadora Fonseca Mayorga
Carrera: Bioanalisis Clínico Año: 2, tercer semester. Fecha : domingo, 15 de mayo de 2022 Mencione 2 ventajas y 2 desventajas del método de extracción de ADN por calor.
2 ventajas En el primer método, se usaron dos colonias de bacterias que crecieron durante la noche. Las colonias se colocaron en un tubo de ensayo que contenía un ml de agua destilada y se hirvieron durante 10 minutos en un baño de agua, y luego se centrifugaron durante cinco minutos a 1000 rpm. Se usaron cinco microlitros del sobrenadante para la PCR. 2 desventajas El segundo método se basó en el uso de un horno de microondas Nacional (Matsushita Electric Industrial Company, Japón) para calentar las colonias bacterianas (dos colonias disueltas en 500 μ l de agua destilada) durante 10 segundos, seguido de centrifugación durante dos minutos a 1000 rpm. Del mismo modo, se utilizaron 5 μ l del sobrenadante para la PCR. Investigar 1 protocolo que utiliza el método de extracción por calor. °C. El ADN se precipitó con 2 volúmenes de etanol absoluto y 0,1 volumen de acetato de sodio 3 M pH 5,3; durante 30 min a - 20 °C. El precipitado de ADN genómico que se obtuvo por centrifugación a 10 000 g durante 20 min se lavó con etanol 70 % y se secó a temperatura ambiente, y fue re suspendido finalmente en 50 mL de tampón TE. El ARN presente en la muestra se digirió con la adición de RNasa H ( Boehringer Mannheim, Germany ), incubándose durante 1 h a 37 °C. Seguidamente se realizó una extracción empleando un volumen de cloroformo- alcohol isoamílico (24:1) y el sobrenadante se conservó a - 20 °C.
