Tipos de microscopios: una introducción a la microscopía, Resúmenes de Histología

¡Descarga Tipos de microscopios: una introducción a la microscopía y más Resúmenes en PDF de Histología solo en Docsity!

UNIVERSIDAD

LATINOAMERI

CANA

“ULAT”

CARRERA DE

INGENIERÍA

CIVIL

UNIVERSIDAD

LATINOAMERI

CANA

“ULAT”

CARRERA DE

INGENIERÍA

CIVIL

UNIVERSIDAD LATINOAMERICANA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE ODONTOLOGÍA

El microscopio es una de las herramientas básicas en el estudio de la biología. Mediante un conjunto de lentes, el microscopio aumenta el tamaño de los objetos bajo estudio, que son demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista. Dos principios están involucrados en el uso del microscopio: MAGNIFICACIÓN (la capacidad de aumentar el tamaño de una imagen) y RESOLUCION (la capacidad de producir una imagen nítida, o bien la capacidad del instrumento para dar imágenes bien definidas de puntos situados muy cerca uno del otro en el objeto). Existen distintos tipos de microscopios, cada uno con un propósito particular. El instrumento que fue empleado por los primeros biólogos para estudiar la célula y los tejidos, es el microscopio. El nombre deriva etimológicamente de dos raíces griegas: mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que significa observar. Es decir el microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o estructuras pequeñas. TIPOS DE MICROSCOPIO Y FUNCIONES. A continuación, ofrecemos a modo de esquema una posible clasificación de los diferentes tipos de microscopio atendiendo a los últimos avances en el campo de la microscopia, y tomando como referencia los criterios clásicos de clasificación. MICROSCOPIA ÓPTICA: M. Simple:  Lupas: monoculares binoculares M. Compuesto:  Estereomicroscopios  De luz ultravioleta  De fluorescencia  De contraste de fases  De campo oscuro  De polarización  Microscopia por luz reflejada MICROSCOPIA ELECTRÓNICA:  De Barrido (MEB)  De Transmisión (TEM)  Microscopio confocal de barrido láser

1. MICROSCOPIO ÓPTICO (o de campo luminoso). En estos tipos de microscopios, el área observada está ampliamente iluminada y los objetos que se estudian aparecen más oscuros que el fondo. Normalmente alcanzan hasta unos 1000 aumentos, aunque con oculares poderosos esta cifra puede llegar a incrementarse en dos veces. El límite útil de

este aumento es de 2000 y la razón de este límite de amplificación, se debe al poder de resolución, entendido como la capacidad de distinguir dos puntos adyacentes como distintos y separados. Este poder de resolución se da en función de la longitud de onda de la luz utilizada y de la apertura numérica que posea el sistema de lentes empleado. Así, puede afirmarse que no siempre las amplificaciones mayores son las de más utilidad, ya que pueden no ser tan claras como otras menores. Dentro de la microscopía óptica podemos distinguir, según el número y posición de las lentes, el microscopio simple y el compuesto. Microscopio simple. Está provisto de una lente o sistema de lentes convergentes dispuestas de manera que proporcionan una imagen virtual, derecha y mayor que el objeto, que a su vez está situado entre la lente y el foco. La ampliación del microscopio simple es bastante limitada y suele utilizarse para la disección de pequeños animales o para la disociación de piezas histológicas. Este tipo de microscopio se denomina también lupa. Las lupas pueden ser monoculares o binoculares. Microscopio compuesto. A diferencia del simple, en este tipo de microscopios se combinan dos lentes o sistemas de lentes convergentes de amplificación de imagen, colocados en los extremos del tubo: el denominado objetivo, situado más cerca del objeto a observar; y el ocular, más cercano al ojo del observador. Antes de pasar a hablar de los diferentes tipos de microscopios compuestos consideramos importante hacer referencia a los cabezales monoculares, binoculares y trioculares, en orden de menor a mayor especialización en este tipo de técnica. El cabezal MONOCULAR consta de un solo ocular, llevando consigo el inconveniente de producir la fatiga visual en observaciones prolongadas. Este problema se solventó con la aparición del cabezal BINOCULAR, el cual permite la visión con los dos ojos, siendo importante alcanzar una adecuada fusión de la imagen. El cabezal TRIOCULAR además de poseer las ventajas del anterior, posibilita el fotografiar el objeto de estudio.  ESTEREOMICROSCOPIOS. Son microscopios dobles, erróneamente denominados "lupas binoculares", con dos objetivos y dos oculares que poseen un doble prisma, el cual permite enderezar las imágenes y conservar el relieve. La iluminación del objeto en estos microscopios se hace por transparencia o por incidencia, siendo esta última más frecuente. Están dotados de accesorios de investigación tales como: equipo microfotográfico, doble dispositivo de observación para poder trabajar dos observadores simultáneamente, cámaras claras y microdisectores. A continuación señalaremos otros tipos de microscopios que sirven para efectuar observaciones especiales atendiendo a diferentes métodos instrumentales.

Esta técnica se utiliza para estudiar aquellas preparaciones de densidad homogénica y transparentes, como son las de bacterias, células, etc., en las que la baja capacidad de absorción hace que la imagen obtenida no presente diferencia de luminosidad entre sus elementos, permaneciendo prácticamente invisibles los detalles. Para aumentar el contraste de la imagen la preparación con un colorante adecuado, aunque esto no siempre es útil ya que dificulta la observación "in vivo" del elemento estudiado. Básicamente, el microscopio de contraste de fases consiste en un dispositivo de iluminación por el cual, una parte del haz luminoso es tratada de modo diferente al resto. Estas variantes en el tratamiento se combinan posteriormente y producen por interferencia grandes aumentos en contraste de células y de estructuras intracelulares, cuyo índice de refracción es diferente al de su entorno. Gracias al contraste de fases se pueden observar diferencias en las células y en sus estructuras que con otras técnicas no serían discernibles. Se utilizan especialmente en examen de preparaciones húmedas y de gota pendiente.  DE CAMPO OSCURO. Este tipo de microscopios producen un efecto consistente en un fondo oscuro sobre el que se ven los objetos intensamente iluminados. El poder ver un objeto depende del contraste existente entre él y el medio que le rodea. El condensador común es sustituido por uno de campo oscuro, a través del cual pasa solamente un cilindro hueco de luz. Hay objetos y estructuras de células que resultan invisibles, pero que se hacen visibles cuando se recurre a esta técnica de iluminación. El objeto aparece como una mancha brillante sobre un fondo oscuro. Se utilizan especialmente para observar microorganismos sin teñir suspendidos en líquido (preparaciones húmedas y de gota pendiente).  DE POLARIZACIÓN. Son microscopios de luz polarizada, que se construyen a partir de un microscopio ordinario, colocando un polarizador entre la fuente de luz y el condensador, y un analizador entre el objetivo y el ocular. Se utilizan muchas veces para la observación de sustancias birrefringentes. Al hacer rotar el objeto birrefringente con relación a los filtros cruzados, éste se verá brillante sobre un campo oscuro. Se utilizan estos microscopios normalmente, en Petrografía y Mineralogía. Concretamente, esta técnica es usada para minerales transparentes, los cuales reciben la luz polarizada desde el lado diametralmente opuesto al de observación y suelen colocarse entre un portaobjetos y un cubreobjetos.

 DE LUZ REFLEJADA.

Este tipo de microscopía es utilizada en el estudio de los minerales metálicos u opacos. Por este motivo los microscopios especiales que requiere esta técnica reciben el nombre de METALOGRÁFICOS. La diferencia entre éstos y los de polarización (por transparencia) radica en un diferente sistema de iluminación. Para el estudio de los minerales opacos se necesita un foco de luz polarizada que incida de manera perpendicular sobre la superficie finamente pulida, con intenso brillo y sin interposición de cubreobjetos. Además de esto, requerirán un iluminador de opacos acoplado adecuadamente al microscopio, para que a través de un polarizador, los rayos de luz se dirijan perpendicularmente sobre la superficie del mineral, siendo reflejados entonces en sentido opuesto al ocular.

2. MICROSCOPIO ELECTRÓNICO. El microscopio electrónico ha revolucionado el conocimiento de ciencias como la biología o la medicina. Tiene la ventaja de alcanzar una extraordinaria amplificación. Puede dar un poder de resolución hasta mil veces mayor que el óptico, debido a que emplea un haz de electrones en lugar de un haz de fotones.  DE BARRIDO (MEB). En el microscopio electrónico de barrido (MEB) o microscopia de exploración electrónica (SEM), los electrones inciden desde arriba sobre la preparación, por ello la muestra puede ser de cualquier grosor o tamaño. Emplea dos técnicas preparatorias: a) Secado por congelación. b) Secado por punto crítico. Después se cubre la muestra con una capa de metal (oro o platino). El microscopio electrónico de barrido no tiene la resolución que se alcanza con el microscopio electrónico de transmisión, pero su ventaja es una excelente impresión tridimensional. Este microscopio se basa en el principio de la amplificación electrónica de señales que se generan al irradiar la superficie de las muestras con un haz muy estrecho de electrones.  DE TRANSMISIÓN. En este tipo de microscopía electrónica, el haz de electrones atraviesa al material que se desea observar.