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MANUAL DE PRÁTICAS LABORATORIAS
DE MICROBIOLOGIA.
Autor : Leonildo dos Anjos Viagem (Contactos: Cell:+258824048436/+258861778915; e- mail: [email protected]/[email protected]) Licenciado em Biologia Marinha na Escola Superior de Ciências Marinhas e Costeira da Universidade Eduardo Mondlane. Actualmente é docente da Universidade Pedagógica de Moçambique, afecto na Delegação de Montepuez, Departamento de Ciencias Naturais e Matemática no curso de Biologia. É director do curso de Agropecuaria
Montepuez 2013
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Visão geral
Bem-vindo ao Manual de Praticas Laboratoriais de Microbiologia
Caro estudante do curso de biologia! Pensando em si, elaborou-se este manual intitulado “ Manual de Práticas Laboratoriais de Microbiologia ”, que contém diversos protocolos de práticas laboratoriais, na qual servirá de base para a fixação dos conteúdos teóricos, preparando lhe assim para a construção do saber, do conhecer e do seu desenvolver, principalmente nos aspectos seguintes:
Controlo dos microrganismos no cultivo dos microrganismos; A importância dos microrganismos no âmbito alimentar e ecológico; Metabolismo dos fungos e bactérias; Necessidades de crescimento dos fungos e bactérias; Cultivo e observação microscópica dos fungos e bactérias.
Espera-se que este manual lhe seja util para o desenvolvimento das sua habilidades pratico-laboratoriais.
Objectivos do Manual.
O estudante que participar as aulas prá deve ser capaz de :
Objectivos
diferentes grupos de microrganismos; locais sem acesso ao equipamento de
A Quem se destina este Manual?
Este concluido o ensino secundário geral do SNE ou equivalente e que estejam a frequentar o 2º ano do curso de biologia na Universidade Pedagig nest Biologia Celular e Molecular e da Bioquímica.
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estudante que participar as aulas práticas laboratoriais que constam neste manual
Identificar macro e microscopicamente as características de diferentes grupos de microrganismos; Fazer o cultivo de microrganismos em laboratório; Desenvolver aulas práticas de microbiologia, mesmo em locais sem acesso ao equipamento de laboratório. Compreender a importância dos microrganismos e sua fácil manipulação laboratorial; Conhecer as condições de cultura dos microrganismos Discutir a importância do cultivo de microrganismos em laboratório.
se destina este Manual? Este manual foi concebido para todos os estudantes que tenham concluido o ensino secundário geral do SNE ou equivalente e que estejam a frequentar o 2º ano do curso de biologia na Universidade Pedagigica. Para facilitar a compreensão das pr neste manual, recomenda-se que o estudante tenha noções de Biologia Celular e Molecular e da Bioquímica.
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que constam neste manual
Identificar macro e microscopicamente as características de
Fazer o cultivo de microrganismos em laboratório; Desenvolver aulas práticas de microbiologia, mesmo em
Compreender a importância dos microrganismos e sua fácil
Conhecer as condições de cultura dos microrganismos Discutir a importância do cultivo de microrganismos em
manual foi concebido para todos os estudantes que tenham concluido o ensino secundário geral do SNE ou equivalente e que estejam a frequentar o 2º ano do curso de biologia na Universidade das práticas propostas o estudante tenha noções de
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Ícones de actividade
Ao longo deste manual encontram-se uma série de ícones nas margens das folhas. Estes icones servem para identificar diferentes partes do processo de aprendizagem. Podem indicar uma parcela específica de texto, uma nova actividade ou tarefa, uma mudança de actividade, etc.
Acerca dos ícones
Os ícones usados neste manual são símbolos africanos, conhecidos por adrinka. Estes símbolos têm origem do povo Ashante de Africa Ocidental, datam do seculo 17 e ainda se usam hoje em dia.
Habilidades de estudo
Ao realizar uma aula prática laboratorial é necessário ter muita atenção no que observas, sendo necessário fazer os respectivos desenhos. Para isso, tenha consigo um bloco de anotações e uma esferográfica e tenha a certeza que o que está a desenhar corresponde a aquilo que pretendes observar.
Precisa de apoio?
Caso tenha alguma dúvida durante a realização das suas experiencias, consulte ao seu professor antes que cometa erros que posteriormente serão fatais para si.
Equipamentos e Materiais Básicos Usados em Laboratório de
Microbiologia^1.
Introdução
A realização das práticas laboratoriais depende em grande parte de equipamentos e materiais existentes no laboratório. problema que impeça a realização das práticas laboratorial em microbiologia, podendo-se para isso
No final desta aula você deve ser
Objectivos
aulas laboratoriais de microbiologia equipamentos existentes no laboratorial especificamente para compreensão dos microrganismos
Material e Equipamentos
Microbiologia.
Os materiais assim como os equi que podem ser usados manual.
Estufa bacteriológica (Fig. 1 e 2 incubação na temperatura adequada. A estufa apresentada na fig.2 foi produzida localmente, esta que pode atingir uma temperatura máxima de cerca de 450C. Esta foi produzida como forma de suprir as necessidade
(^1) Uma visão da
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Equipamentos e Materiais Básicos Usados em Laboratório de
A realização das práticas laboratoriais depende em grande parte de equipamentos e materiais existentes no laboratório. Mas isso não pode constituir um grande problema que impeça a realização das práticas laboratorial em microbiologia, se para isso produzir materiais alternativos que visem implementa
No final desta aula você deve ser capaz de:
Identificar os diferentes materiais que podem usados nas aulas laboratoriais de microbiologia Manusear com precisão o microscópio óptico e equipamentos existentes no laboratorial especificamente para compreensão dos microrganismos
Material e Equipamentos Básicos usados nas aulas Laboratoriais de
Os materiais assim como os equipamentos a seguir referenciados usados para a concretização das práticas que constam neste
Estufa bacteriológica (Fig. 1 e 2 ): permite o crescimento de microrganismos pela incubação na temperatura adequada. A estufa apresentada na fig.2 foi produzida localmente, esta que pode atingir uma temperatura máxima de cerca de 450C. Esta foi produzida como forma de suprir as necessidades existentes no laboratório da
Uma visão da UP-Montepuez
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Equipamentos e Materiais Básicos Usados em Laboratório de
A realização das práticas laboratoriais depende em grande parte de equipamentos Mas isso não pode constituir um grande problema que impeça a realização das práticas laboratorial em microbiologia, produzir materiais alternativos que visem implementa-las.
Identificar os diferentes materiais que podem usados nas
Manusear com precisão o microscópio óptico e outros equipamentos existentes no laboratorial especificamente para
as aulas Laboratoriais de
pamentos a seguir referenciados são os básicos para a concretização das práticas que constam neste
): permite o crescimento de microrganismos pela incubação na temperatura adequada. A estufa apresentada na fig.2 foi produzida localmente, esta que pode atingir uma temperatura máxima de cerca de 450C. Esta s existentes no laboratório da
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Figura 4. Tubo de ensaio
Estante para tubo de ensaio (fig.5): é usada para suporte de tubos de ensaio.
Pinça de madeira (fig.6): usada para prender o tubo de ensaio durante o aquecimento
Figura 5 : Estante de tubos de ensaio. Figura 6 : Pinça de madeira
Placa de Petri (fig.7): facilita o isolamento de microrganismos devido à grande superfície de crescimento que apresenta, possibilitando o aparecimento de colônias separadas.
Figura 7. Placa de Petri
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Pipeta: serve para diluir preparações diversas e inocular culturas líquidas. Estas podem ser plásticas ou de vidro.
Pipeta Pasteur (fig.8) é um tubo de vidro espichado em capilar, utilizada para transportar pequenos volumes de líquido.
Inóculo (ou semente): concentração de células suficientes para cultivar uma de meio com bom rendimento
Figura 8. Pipetada Pasteur plástica
Lâmina (fig.9): serve para examinar microrganismos ao microscópio. Estas podem ser rasas ou escavadas.
Lâmina Escavada : possui uma ou duas depressões possibilitando observar a mobilidade de microrganismos suspensos numa gota de líquido (Ensaio em gota pendente)
Lamela (fig.10) : utilizada para recobrir preparações microscópicas “in vivo”
Figura 9. Lâminas rasas Figura 10. Lamelas ou lamínulas
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Figura 13. Microscópio optico
Como se comportar num Laboratório de microbiologia?
As aulas práticas Laboratoriais têm como objetivo ensinar ao estudante os princípios gerais e métodos utilizados no laboratório de microbiologia. Nas aulas práticas laboratoriais de microbiologia são usados uma variedade de microrganismos, sendo alguns patogénicos para o homem, razão pela qual é essencial que as normas sejam seguidas, a fim de se evitar contaminações acidentais. As normas que a seguir são mencionadas não devem ser consideradas as únicas:
- Evitar qualquer tipo de brincadeira, pois o trabalho de laboratório é de extrema seriedade;
- Nunca trabalhe sozinho no laboratório;
- Seguir os roteiros de práticas e instruções do professor ou do técnico de laboratório;
- Qualquer acidente dever ser imediatamente comunicado ao professor ou ao técnico;
- Em caso de qualquer dúvida na execução da prática, por mais simples que possa parecer, pergunte ao professor;
- O uso de bata branca (de preferência de algodão) e guarda-pó é obrigatório.
- Cabelos longos devem ser amarrados de forma a não interferir com reagentes e equipamentos.
- Limpar e desinfetar o local de trabalho (mesa) antes e depois de cada aula prática.
- Lavar e desinfetar as mãos ao iniciar a análise, ao sair do laboratório e sempre que for necessário. Se for portador de algum ferimento nas mãos, procurar não tocar no material.
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- Identificar as amostras, bem como o material a ser utilizado antes de iniciar a análise. Não use amostra ou substância que não esteja rotulado.
- Antes de usar qualquer produto deve ler com atenção o conjunto de informações impressas no rótulo dos reagentes, prestando atenção para os riscos que eles comportam.
- Devem retirar-se pequenas quantidades de reagentes de cada vez para evitar desperdícios. Os excessos não devem ser devolvidos nos frascos a fim de evitar contaminações.
- Não se deve deixar os frascos dos reagentes abertos
- Utilizar exclusivamente material estéril para a análise.
- Não comer, beber ou fumar no laboratório.
- Manter canetas, dedos e outros longe da boca.
- Não utilizar material de uso pessoal para limpar os objetos de trabalho.
- Depositar todo o material utilizado em recipiente adequado, e não sobre o local de trabalho.
NUNCA TENTE SER HERÓI!
Para além das normas acima citadas, existem outras que podem ser consideradas para a manutenção do laboratório por parte do responsável técnico, a destacar:
- O laboratório deve ter duas portas de saída, sendo que nenhuma delas deve estar bloqueada por materiais;
- Os materiais e os equipamentos devem ser armazenados em locais apropriados e catalogados;
- Os reagentes devem estar arrumados em armários ou estantes apropriados, separados dos vidros e plásticos. Sempre que possível os reagentes devem ser arrumados em locais com ventilação.
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Tabela 2:
Símbolos de prevenção usados nos rótulos das embalagens
Substância
Símbolo
Precauções
Características da Substância
Explosiva
Evitar choques, variação de pressão,fricção, calor e fogo
Comburente
Evitar qualquer contacto comsubstâncias combustíveis. Perigo deinflamação
Inflamável
Manter afastada de chamas nuas efontes de calor
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Toxico
Evitar qualquer contacto com o corpo,podendo em casos extremos terconsequências mortais
A inalação, ingestão ou absorção pela pele e mucosasde pequenas quantidades da substância provocam amorte ou danos agudos ou crónicos para a saúde;
Corrosivo
Evitar qualquer contacto com a pele,com os olhos e com a roupa. Evitarinalar os vapores
Provocam a destruição dos tecidos vivos em contactocom a substância ou seus vapores;
Mutagénica
Evitar qualquer contacto com o corpo.Evitar inalar os vapores
Pode induzir alterações genéticas (mutações)hereditárias ou aumentar a sua incidência;
Perigosa para oambiente
Evitar derrame e descartar emrecipientes próprios
Provocam ou podem provocar um perigo imediato ouretardado no meio ambiente.
Erro! Não existe nenhum texto com o estilo especificado no documento. 17 Elaboração de um relatório de aula prática laboratorial.
Ao terminar cada uma das aulas práticas laboratoriais propostas neste manual, dependendo das circunstâncias ou pela proposta do docente, deve-se elaborar um relatório.
O relatório que será elaborado servirá como um instrumento de registo das diferentes fases da aula laboratorial e, para além disso, servirá como um informe de todo o trabalho que estudante desenvolveu na aula.
Existem aspetos relevantes que se deve ter em conta durante a elaboração do relatório de uma aula prática, sendo que o tipo de linguagem utilizada é de extrema importância, visto que, reflete o modo de pensar e de trabalhar do estudante. Assim, a linguagem deve apresentar:
- Objetividade e clareza : aqui nada deve ser subentendido ou por conta de imaginação do estudante ou praticante, isto quer dizer, o texto de um relatório não pode expressar ambiguidade. O outro factor que contribui para a clareza de uma informação é as ilustrações que complementam um texto, visto que, para além de atraírem a atenção, ajudam a dar informações de uma forma mais rápida, clara e precisa.
- Simplicidade : o texto deve ser escrito com mais simplicidade possível, o que evidencia clareza de pensamento. O relatório deve ser de fácil entendimento, isto é, as palavras simples não podem parecer complexas.
Estrutura de um relatório de aula prática laboratorial
O relatório de uma aula prática laboratorial deve ser, geralmente estruturado da seguinte forma:
1. Elementos pré – textuais 1.1. Capa (ou primeira pagina): esta deve incluir: O titulo completo da experiencia, que deve ser curto e dar uma indicação clara da intenção do trabalho; Nome (s) do (s) autor (es); O nome da Escola/Faculdade/Delegação onde o trabalho foi realizado; Data em que o relatório foi concluído;
