Processamento de RNA: Transcrição e Processamento de rRNA, mRNA e tRNA, Manuais, Projetos, Pesquisas de Bioquímica

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Processamento de RNA

Grupo: Rodrigo Rossi de Araújo nº USP 7144403 Edvaldo Maciel Vasconcelos nº USP 7275921

Seminário de Bioquímica II

Prof. Dr. Julio César Borges

Introdução

• Sintetizados a partir de um DNA na forma de precursores (transcritos primários);
• Devem sofrer processamento para atingir estado maduro;
• Três tipos de RNA:

(mais importantes).

Processamento de mRNA

• Ocorre antes da tradução;
• Os processos chave são:
• Adição de uma capa metilizada (“Capping”);
• Adição da cauda poli-Adenilada (“poliadenilação”);
• “SPLICING” e remoção

dos introns e exons.

Adição do ‘Cap’

• Logo após a RNA polimerase II começar a transcrição, uma capa metilizada (Methyl- Guanine Cap) é adicionada a extremidade 5’ do mRNA;
• Ao término da transcrição, o RNA polimerase libera a parte encapada do pré-mRNA.
• Em eucariotos o ‘cap’ é uma molécula de 7- metilguanosina, adicionado ao nucleosídeo 5’ por uma ponte 5’-5’ trifosfato.

• RNA polimerase transporta proteínas processadoras de mRNA;
• Capeamento é iniciado logo após a transcrição.

• A adição do “Cap” reduz a exposição do mRNA a nucleases e fosfatases, provendo maior estabilidade;
• Não é degradada nos pontos 5’ e nos primers metilados.
• Aumenta a chance desse mRNA ser “capturado” pelos sistemas tradutores, aumentando a síntese de proteína.

• Sequências específicas de nucleotídeos (AAUAAA) sinaliza final da transcrição;
• Pre-mRNA é ligado pelas enzimas CstF (Cleavage stimulation factor) e CPSF (Cleavage and polyadenilation specificity factor);
• A extremidade 3’ do mRNA é então movida na configuração correta para a clivagem;
• Poli-A polimerase liga-se ao mRNA e o cliva na extremidade 3’.

Processo de Splicing

• O splicing consiste na retirada dos íntrons de um RNA precursor;
• A excisão dos íntrons requer uma extrema precisão das enzimas envolvidas no processo;
• Um único nucleotídeo alterado em um exon pode levar a uma alteração do processo de leitura;
• Existem algumas sequências relativamente conservadas nos limites íntron-exon.

Processo de Splicing

• Na extremidade 5’ tem-se a sequência GU e em 3’ a sequência AG;
• Há uma adenina aproximadamente 18- nucleotídeos do extremo 3’ do íntron;
• Sítio A de ramificação, seguido de uma região rica em pirimidina.