teste de elisa, Resumos de Biomedicina

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UNIC - UNIVERSIDADE DE CUIABÁ – CAMPUS AEROPORTO

CURSO DE BIOMEDICINA

CRISTIANE ALVES PEREIRA

THIAGO JACOBI PACHECO

TESTE DE ELISA

SINOP-MT

TESTE DE ELISA

O nome do teste de ELISA e uma abreviatura que na realidade e Enzyme-Linked Immunosorbent Assay que em português e Ensaio de Imuno- absorção Ligado a Enzima. O Elisa se baseia na identificação de anticorpos e ou antígenos, por anticorpos marcados com uma enzima, de maneira que esta enzima age sobre um substrato e a reação faz com que o cromógeno que são microrganismo que produz coloração no meio onde se encontra mude de cor. O produto da reação, além de colorido, é insolúvel para não difundir do local da formação. Foi inicialmente desenvolvido por Engvall & Perlman e por van Weeman & Schuurs e, posteriormente, muito utilizado como teste diagnóstico em varias doenças.

Quando o sistema imunológico do corpo encontra um antígeno específico, os anticorpos que são específicos para o antígeno interceptam-no com uma ligação física a ele em uma "chave e fechadura", neutralizando assim o antígeno. O ELISA é uma técnica fundamental para avaliações imunológicas e bioquímicas, utilizada para detectar o antígeno ou anticorpo em uma amostra, com base em interações anticorpo-antígeno. Se um antígeno é detectado, um sinal é produzido na forma de uma mudança mensurável.

Para avaliar a presença de um antígeno específico em uma amostra, um teste de ELISA pode ser realizado da seguinte maneira: Uma solução de anticorpo, que é específico ao antígeno putativo, é imobilizado em uma superfície sólida em um poço de uma placa de microtitulação. É aplicado em seguida à amostra a ser analisada condições que permitam o antígeno ligar-se aos anticorpos imobilizados específicos. O material não ligado é lavado, e o antígeno ligado é reconhecida mais uma vez em condições de ligação com a adição de uma solução de um segundo anticorpo específico para o mesmo antígeno, que desta vez é acoplado ou ligados a uma enzima que catalisa a conversão de seu substrato a uma forma detectáveis e possivelmente possa ser quantificado.

Esses anticorpos ligados a uma enzima que estão vinculados ao complexo antígeno- anticorpo imobilizado são resistentes a ciclos de lavagem e, finalmente, o substrato é adicionado e incubado de modo que a enzima pode catalisar a conversão do substrato para o sinal de detecção do antígeno específico. Os testes ELISAs costumam empregar um substrato cromogênico ou um fluorogênico, que produz uma cor ou fluorescência, respectivamente, após a conversão pela enzima ligada ao segundo anticorpo.

Conversão do substrato é convenientemente observada ou quantificada em um leitor de placas, por medidas de densidade óptica ou intensidade de fluorescência, mudar a cor ou a fluorescência sinaliza a atividade da enzima, que sinaliza a presença do segundo anticorpo, que sinaliza a presença do antígeno procurado.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRAFICAS

Xavier, Ricardo M... et al. Laboratório na Pratica Clínica.2ºed. Porto Alegre, Artmed, 2010.

Apostila do Curso Pratico de Virologia. Ensaio imunoenzimatico. Universidade federal Fluminense.

Apostila do Instituto de Ciências Agrárias e Ambientais Mediterrânicas. Elisa não e so um nome de mulher, também e um teste de diagnostico clinico.

http://www.ufrgs.br/labvir/material/aulap10.pdf

http://www.icb.ufmg.br/mor/pad-morf/ELISA.doc.