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Transcrição
Tipologia: Transcrições
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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS DISCIPLINA: EVOLUÇÃO CELULAR
Fonte: Nature, 2001
Replicação X Transcrição um cromossomo inteiro é copiado para produzir duas moléculas de DNA filhas idênticas ao DNA parental REPLICAÇÃO apenas genes ou grupos de genes específicos são transcritos num certo tempo TRANSCRIÇÃO Semelhantes em termos de mecanismos químicos, polaridade e uso de molde
promotor Ligação (complexo fechado) Término, a polimerase libera o RNA Alongamento Início da transcrição Inicia ç ão Alongamneto Termina ç ão Fases do ciclo de transcrição: Watson et al., Biologia Molecular do Gene, 2ed. . DNA a montante DNA a jusante “desnaturação da hélice” no promotor (complexo fechado)
RNA polimerase Enzimas, geralmente formadas por muitas cadeias polipeptídicas, que catalisam toda transcrição do DNA Descoberta em 1960 (Hurwitz, Srevens e Weiss independentemente) Lodish et al., Molecular Cell Biology, 5 thed RNA polimerase de procariotos
RNA polimerase ♦ Catalisa as ligações fosfodiéster entre os nucleotídeos ♦ Usa uma das fitas de DNA como molde ♦ Sintetiza cadeias de RNA no sentido 5’ 3 ’ ♦ Não requer um primer ou iniciador Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 4 thed
Transcrição em procariotos A direção da RNA polimerase é definida pela orientação do promotor A direção do movimento da RNA polimerase determina qual das duas fitas do DNA será usada Fita molde (anti-senso) Fita codificadora (senso) uma RNA polimerase que se move da esquerda para direita usa a fita inferior como molde uma RNA polimerase que se move da direita para esquerda usa a fita Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 4 thed^ superior como molde
: ♦ reconhecem e ligam-se a seqüências específicas de DNA ♦ desnaturam o DNA, expondo a seqüência de nucleotídeos a ser copiada ♦ mantêm as fitas de DNA separadas na região de síntese ♦ mantêm estável o híbrido DNA:RNA ♦ renaturam o DNA na região imediatamente posterior à síntese ♦ sozinhas ou com o auxílio de proteínas específicas, terminam a síntese de RNA As RNA polimerases
Iniciação em procariotos: ação da RNA polimerase Ligação de fatores de alongamento Subunidade sigma σ – reconhece a região promotora Desenovelamento ( formação da bolha de transcrição) Alongamento Ocorre após o desligamento do fator sigma Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 4 thed Desligamento da subunidade δ
Terminação em procariotos Sequências específicas no DNA determinam o fim da transcrição Lodish et al., Molecular Cell Biology, 5 thed No sítio de parada, a polimerase libera o RNA completo e se dissocia do DNA Fita completa de RNA
Término procariotos Mecanismos em E. coli Parada da RNA polimerase; Destruição parcial do híbrido RNA-DNA (proporcionando instabilidade da região que permanece ligada); Dissociação do RNA nascente da enzima RNA polimerase; Restabelecimento da região dupla-fita do DNA; Liberação da RNA polimerase da fita molde do DNA.
Mecanismos em E. coli Rho ( ) – dependente – A proteína ao se ligar ao RNA nascente, provoca a desestabilização do complexo de transcrição. A proteína é depedente de ATP e tem atividade RNA-DNA helicase dependente de ATP, o que – provavelmente – rompe o híbrido.
Transcrição Procariotos x Eucariotos ♦ Complexidade ♦ Localização (vantagem da separação espacial) ♦ Processamento do transcrito primário