



Estude fácil! Tem muito documento disponível na Docsity
Ganhe pontos ajudando outros esrudantes ou compre um plano Premium
Prepare-se para as provas
Estude fácil! Tem muito documento disponível na Docsity
Prepare-se para as provas com trabalhos de outros alunos como você, aqui na Docsity
Encontra documentos específicos para os exames da tua universidade
Prepare-se com as videoaulas e exercícios resolvidos criados a partir da grade da sua Universidade
Responda perguntas de provas passadas e avalie sua preparação.
Ganhe pontos para baixar
Ganhe pontos ajudando outros esrudantes ou compre um plano Premium
Determinação quantitativa de triacilglicerois no soro através de metodologia colorimétrica
Tipologia: Trabalhos
1 / 6
Esta página não é visível na pré-visualização
Não perca as partes importantes!




1.1 Determinação quantitativa de triacilglicerois no soro através de metodologia colorimétrica Quimicamente os triglicérides são o produto da esterificação de ácidos graxos com o glicerol. Fazem parte da fração lipídica do plasma ao lado do colesterol, fosfolípides e outros compostos lipídicos. Pela sua origem classifica-se como endógeno (sintetizado pelo próprio organismo) ou exógeno (proveniente da alimentação), sendo a origem exógena a que representa aproximadamente 80% dos quilomicrons circulantes no sangue (partículas esféricas responsáveis pela lipemia transitória após a ingestão de gorduras). Na alimentação, eles estão disponíveis nos alimentos ricos em carboidratos simples (açúcar, farinha branca, etc.) e nos gordurosos − principalmente de origem animal, como carnes, leite integral e queijos amarelos. Variações nas dietas, na atividade física, e no uso de bebidas alcoólicas e certos medicamentos são as causas mais frequentes de grandes variações dos níveis de triglicérides. A mobilização do depósito de triglicérides é obtida pela ação das lipases dos adipócitos (células de gordura), que são enzimas sujeitas a regulação hormonal, que hidrolisa os triacilgliceróis a ácidos graxos e glicerol, sendo estes produtos oxidados por vias diferentes. O glicerol não pode ser reaproveitado pelos adipócitos, por esses não terem a glicerol quinase, e são, por isso, liberados na circulação. Já no fígado e em outros tecidos, que têm essa quinase, o glicerol é convertido a glicerol-3- fosfato e depois transformado em diidroxiacetona fosfato, um intermediário da glicólise e da neoglicogênese. Então, os triacilgliceróis vindos da dieta são hidrolisados pela lipase lipoproteica, e os produtos finais dessa hidrólise, glicerol e ácidos graxos, ficam disponíveis para as células. Após a sua absorção, os ácidos graxos livres e o glicerol são combinados formando novamente os triglicérides que são combinados com colesterol e apolipoproteínas, formando quilomícrons, que são levados para a circulação. Os triglicérides exógenos depositam-se no tecido adiposo num processo que dura até 6h após a formação do quilomicron. Os triglicérides endógenos são sintetizados pelo fígado e transportados por lipoproteínas de densidade muito baixa (VLDL). A síntese e transporte de triglicérides endógenos são relativamente independentes da dieta imposta. A mobilização do depósito de triglicérides é obtida pela ação das lipases dos adipócitos (células de gordura), que são enzimas sujeitas a regulação hormonal, que hidrolisa os triacilgliceróis a ácidos graxos e glicerol, sendo estes produtos oxidados por vias diferentes. O glicerol não pode ser reaproveitado pelos adipócitos, por não terem a glicerol quinase, e são, por isso, liberados na circulação. Já no fígado e em outros tecidos, que têm essa quinase, o glicerol é convertido a glicerol-3- fosfato e depois transformado em diidroxiacetona fosfato, um intermediário da glicólise e da neoglicogênese. Assim como o colesterol, todos nós temos triglicérides e não há problema por isso, pelo contrário, mas, em quantidades muito altas, os triglicérides estão relacionados a um maior risco cardiovascular, obesidade, esteatose hepática (gordura no fígado) e pancreatite, dentre outros. Por isso, a determinação dos triglicérides possui um vasto significado clínico, o doseamento dos triglicérides é de muita importância também para avaliação de quadros que envolvem diabetes mellitus, obstruções biliares, nefroses e vários outros distúrbios do metabolismo endócrino.
1.2 Determinação quantitativa de proteínas totais e albumina plasmática no soro através de metodologia colorimétrica A albumina é uma proteína intrínseca, produzida pelo corpo que compõe grande parte do plasma sanguíneo consistindo cerca de 70% dos elementos “sólidos” do sangue, é essencial para o funcionamento do organismo e produzida pelo fígado exercendo diversas funções que asseguram o bom funcionamento do corpo. Boa parte de sua função é atuar como uma “carregadora” de substâncias, se ligando a compostos hidrofóbicos colaborando para que eles sejam transportados pela corrente sanguínea. Além disso, a albumina carrega estas moléculas para dentro e fora dos tecidos, e sem ela essa atividade não é executada. Outra importante atividade da albumina é assegurar que o equilíbrio de água entre os tecidos e o sangue seja adequado. As proteínas totais do nosso corpo são um conjunto de compostos macromoleculares orgânicos de elevado peso molecular que são formados por aminoácidos unidos entre si por ligações peptídicas. A sequência na qual os aminoácidos estão ligados entre si e o número de cadeias de aminoácidos, determinam a estrutura primária de proteínas. As proteínas são introduzidas no organismo através dos alimentos, em que é subsequentemente dividida para formar novas proteínas e aminoácidos através de um processo conhecido como a síntese de proteínas. As proteínas totais são o resultado da adição dos vários componentes presentes na proteína do corpo, tais como alfa1, alfa2, beta e gama globulina albumina. Fundamentos da Reação - Proteínas Na dosagem das proteínas totais, as ligações peptídicas das proteínas reagem com uma solução alcalina de sulfato de cobre (Reativo do Biureto), formando um complexo de coloração violeta, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração de proteínas na amostra. Fundamentos da Reação - Albumina Na dosagem da albumina, esta reage com o Verde de Bromocresol, em meio ácido, formando um complexo corado de verde. A intensidade da cor é proporcional à concentração de albumina na amostra. 2. MATERIAIS, REAGENTES E EQUIPAMENTOS ● Espectrofotômetro ● Tubos de ensaio ● Pipetas ● Cronômetro
A lipoproteína lipase promove a hidrólise dos triglicérides liberando glicerol, que é convertido, pela ação da glicerolquinase, em glicerol-3- fosfato. Este é oxidado a dihidroxiacetona e peróxido de hidrogênio na presença da glicerolfosfato oxidase. Em seguida, ocorre uma reação de acoplamento entre peróxido de hidrogênio, 4-aminoantipirina e 4- clorofenol, catalisada pela peroxidase, produzindo uma quinoneimina que tem máximo de absorbância em 505 nm. A intensidade da cor vermelha formada é diretamente proporcional à concentração dos triglicérides na amostra. A partir da leitura, no espectrofotômetro das soluções, obteve-se as seguintes absorbâncias: Branco 0,000nm Padrão 0,435nm Amostra 0,103nm Após a análise da absorbância, os valores encontrados foram substituídos na seguinte fórmula: Ab 𝑠𝑜𝑟𝑏 𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑜 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑒â Triglicérides (mg/dL) = x 200 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏 𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑜 𝑝𝑎𝑑𝑟 𝑜 â ã Triglicérides (mg/dL) = 0,103 x 200 = 47, 0, O valor normal de triglicerídeos para um ser humano é <150mg/dl, então o valor encontrado está dentro da normalidade. 4.2 Albumina Branco 0,000nm Padrão 0,822nm Amostra 0,602nm
Após a análise da absorbância, os valores encontrados foram substituídos na seguinte fórmula: 0, Albumina (mg/dL) = x 3,8 g/dL 0, Albumina = 2,78 g/dL Baseando-se na bula do teste (LABTESTE,2011), o valor de referência encontrado para a normalidade de albumina, em crianças de 1 a 30 dias é de 2,6 a 4,3 g/dL; para crianças com 31 a 182 dias é de 2,8 a 4,6 g/dL; para crianças de 183 a 365 dias é de 2,8 a 4,8 g/dL; para crianças e adolescentes de 1 a 18 anos é de 2,9 a 4,7 g/dL. Entretanto, para adultos acima de 19 anos o valor de referência seria de 3,5 a 5,5 g/dL. Com isso, se o soro em questão for de um paciente acima de 19 anos, sugere-se um caso de hipoalbuminemia. De acordo com (LABTESTE,2011) a diminuição da albumina pode estar associada ao alcoolismo crônico como cirrose doenças hepáticas, na gravidez relacionado ao uso de contraceptivos orais, em muitas doenças crônicas incluindo neoplasias, síndrome nefrótica, enteropatias com perda proteica, doenças inflamatórias como as doenças autoimunes, imobilização prolongada, falência cardíaca e outros estados catabólicos crônicos. Ademais, os sintomas mais comuns que estão relacionados com a hipoalbuminemia são confusão, fadiga e tontura. Além do mais, o paciente pode apresentar retenção de fluidos, gerando inchaço das mãos e pés, diarreia, perda de apetite, atrofia dos nervos e problemas digestivos.
5. CONCLUSÃO Após todos os procedimentos executados, conclui-se que os triglicérides apresentam um valor dentro da faixa adequada, então o fígado está desempenhando o seu papel de produzir a maior parte dos triglicérides que circulam no sangue. Apesar de ser uma reserva de energia, se os triglicerídeos estiverem em um nível alto no sangue, isso pode aumentar o risco de uma doença cardíaca e outros problemas de saúde. Por isso, é importante monitorar o nível de triglicérideos no sangue. Na determinação de albumina observa-se que o paciente possivelmente deve sofrer de alguma doença hepática ou renal devido ao resultado com menor valor do que o esperado de acordo com os valores de referência. Como a taxa de globulina está dentro da normalidade, significa dizer que o fígado está com seu funcionamento em ordem, logo, é provável que seja uma doença renal.