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Una práctica de laboratorio sobre la actividad enzimática, donde se estudia la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales, así como la influencia de la temperatura sobre la actividad enzimática y la hidrólisis del almidón por acción de la amilasa. Se realizan diversos experimentos para observar y comprender los efectos de estos factores sobre la actividad enzimática. El documento incluye una introducción, competencias de aprendizaje, materiales y procedimientos, así como la interpretación de los resultados obtenidos. Además, se discute la importancia de las enzimas en los procesos biológicos y se plantean preguntas relevantes sobre la producción y función de las enzimas en el organismo.
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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UNIVERSIDAD NORBERT WIENER FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA Biología Celular y Molecular Práctica N° 0 7 ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Integrantes: ● .. ● …. Ciclo: ● …. Sección: Docente: … Fecha de realización de la práctica: ● 20/10/ Fecha de entrega del informe: ● 27/10/ LIMA-PERÚ 2023 1.1 INTRODUCCIÓN. ➢ La actividad enzimática es un concepto esencial que desempeña un papel crucial en la comprensión de cómo operan los sistemas
biológicos. Estas son proteínas, tienen una función clave al acelerar las reacciones químicas en los organismos vivos, las moléculas biológicas actúan como catalizadores en una amplia gama de procesos biológicos, y podrían considerarse como trabajadores especializados dentro de las células. Puedes imaginar las reacciones químicas como si fueran rompecabezas que necesitan ensamblarse o desarmarse para cumplir una tarea específica, las enzimas son vitales para procesos esenciales, como la digestión de alimentos en el sistema digestivo y la replicación del ADN. Además, las células tienen la capacidad de regular la actividad de las enzimas según sea necesario para mantener un equilibrio en los procesos biológicos. La temperatura, el pH y la concentración de sustrato son factores que pueden ejercer influencia sobre la actividad enzimática.^1 1.2 COMPETENCIA DE APRENDIZAJE. ➢ Al finalizar la sesión de práctica, el alumno demuestra la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales, comprueba la acción de la temperatura sobre la actividad enzimática y comprueba la hidrólisis del almidón por acción de la amilasa. 1.3 MATERIAL Y MÉTODO. ➢ Gradillas. ➢ Tubos de ensayo. ➢ Mechero. ➢ Pipetas Pasteur. ➢ Pinzas de madera. ➢ Baño María. ➢ Vasos Beaker. ➢ Trocitos de papa. ➢ Trocitos de hígado de pollo ➢ Trocitos de papa ➢ Arena fina. ➢ Agua oxigenada. ➢ Solución de almidón al 1%. ➢ Reactivo de Lugol 1.4 PROCEDIMIENTO. ➢ Reconocimiento de la catalasa. La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno (H2O2) o también llamado agua oxigenada. Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema. La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente: ● Rotular tres tubos de ensayo con las letras A, B y C.
amilasa, presente en la saliva. Esta enzima actúa sobre el almidón, hidrolizando el enlace O-glucosídico y obteniéndose azúcares reductores como producto de la acción de la enzima. ● Realice un enjuague de la cavidad oral con agua. ● Manteniendo la boca cerrada esperará 5 a 7 minutos, evitando hablar y pasar saliva. ● La colección de saliva se realizará en un Beaker dejando caer por gravedad la saliva, evitando así la formación de espuma. ● La organización del ensayo se encuentra en el siguiente cuadro: Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Adicionar 3 ml de Almidón Adicionar 3 ml de Saliva Adicionar 3 ml de Almidón Adicionar 3 ml de Almidón Adicionar 3 ml de Almidón Adicionar 3 ml de Almidón Adicionar 3 gotas de Lugol Adicionar 3 gotas de Lugol Adicionar 3 ml de Saliva Adicionar 3 ml de Saliva Adicionar 3 ml de Saliva Adicionar 3 ml de Saliva calentada Incubar en B.M. a 37º Cx15 min. Incubar en B.M. a 37º Cx30 min. Incubar en B.M. a 37º Cx45 min. Incubar en B.M. a 37º Cx45 min. Adicionar 3 gotas de Lugol Adicionar 3 gotas de Lugol Adicionar 3 gotas de Lugol Adicionar 3 gotas de Lugol 1.5 RESULTADOS. ➢ Esquematice los resultados e interprete estos según los cambios ocurridos en cada una de las reacciones.
1. Reconocimiento de la catalasa. Interpretación: En este experimento tomamos 3 muestras, las cuales eran papa, hígado y arena, y se le agregó agua peróxido de hidrógeno. Hubo una reacción de espuma o burbujeo en el caso de la papa e hígado, y esto es debido a que presentan la catalasa, que es una enzima que cataliza el peróxido de hidrógeno (H 202 ) haciendo que el oxígeno se desprenda de su estructura manifestándose como burbujeo o espuma.^2 Y en el caso de la arena no hubo reacción porque la arena no tiene la
catalasa, haciendo imposible que suceda una reacción con el peróxido de hidrógeno.^3
2. Desnaturalización de la catalasa. Interpretación: En este experimento tomamos dos muestras, una de higado y otra de papa, pero esta vez se llevó a calentar por 5 minutos en un mechero, luego se puso en tubos de ensayo y se les agregó peróxido de hidrógeno. No hubo ninguna reacción, esto debido a que la enzima catalasa presente en cada una de estas muestras perdió su estructura terciaria, por lo tanto se desnaturaliza su sitio activo haciendo que ya no cumpla su función con el peróxido de hidrógeno. Por eso ya no se observa un burbujeo o espuma al añadir el agua oxigenada. 3 Arena Trozos de papa Espuma Peróxido de hidrógeno. Trozos de hígado Espuma Peróxido de hidrógeno. Peróxido de hidrógeno. Peróxido de hidrógeno Hígad o Peróxido de hidrógeno Papa
Después de una sesión en el laboratorio aprendimos:
2. ¿Cuál es la importancia de las enzimas en el cuerpo humano? En la digestión de los alimentos ayuda a descomponerlos o catalizar para que el cuerpo pueda usarlo. Mediante la acción de las enzimas, da como resultados nutrientes elementales (aminoácidos, glucosa, ácidos grasos, etc.) que asimilamos en el intestino y son aprovechados por el organismo, transforma los nutrientes que les llegan a través de la sangre en otras sustancias, como el ácido oxalacetato o el pirúvico, que forman parte del metabolismo celular.^8 3. ¿Qué estructuras de nuestro organismo producen enzimas y cuál es su función de ellas? A base de la investigación se obtiene la ptialina que actúa sobre los almidones que se produce en la boca (las glándulas salivares) cumple la función de digerir glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, la amilasa que actúa sobre almidones y azúcares que es producido en el estómago y páncreas que cumple la función en digerir los carbohidratos. La pepsina actúa sobre proteínas que se produce en el estómago su función es descomponer las proteínas en péptidos más simples, lipasa en las grasas que es producido en el páncreas e intestino ayuda al cuerpo a digerir grasas y la lactasa actúa sobre la lactosa de la leche que es producido en el intestino y su producción disminuye con el crecimiento su función es ayudar a descomponer la lactosa en glucosa y galactosa.^9 1.8 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA.