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Enzima que contiene el tuberculo "papa"
Tipo: Apuntes
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Nota: tenga en mente que, aunque esté utilizando jugo de papa en estos experimentos, Usted está en realidad trabajando con un extracto enzimático.
Durante esta práctica se estudiará la actividad de la enzima catecolasa contenida en algunas frutas y vegetales. Las papas peladas y las frutas machucadas se tornan cafés cuando son expuestas al aire debido a que la catecolasa facilita una reacción entre el catecol y el oxígeno. En presencia de oxígeno, el catecol es oxidado por la remoción de dos átomos de hidrógeno. El catecol es así convertido en benzoquinona, y el oxígeno es reducido por la adición de dos átomos de hidrógeno para formar agua. Las moléculas de benzoquinona se unen luego para formar cadenas largas y ramificadas. Estas cadenas son la base estructural de los pigmentos melanoides rojo y café que causan el oscurecimiento.
Las enzimas son moléculas de proteínas que facilitan y aceleran las reacciones químicas de nuestros tejidos. Las enzimas actúan como catalizadoras de las reacciones acelerando por lo tanto dicho proceso. La actividad catalítica puede verse afectada por ciertos factores tales como la temperatura, o el pH. Es necesario entender, como funcionan dichas reacciones para lograr determinar los factores que influencian la actividad catalítica y entender por qué los colores de las sustancias varían. Así mismo diferenciar y lograr observar en que momento hay un incremento de la actividad y un decremento de esta.
Por equipo.
c. ¿Cuál fue el objeto de agitar los tubos?
d. ¿A qué temperatura fue mayor la tasa de reacción?
e. Colocar papas peladas en hielo antes de cocinarlas previene su oscurecimiento. ¿Por qué? - sí, porque al estar en una temperatura muy baja la encima se mantiene inactiva.
PARTE II. Efecto del pH sobre la actividad enzimática.
La presencia de diversos iones puede interferir con los patrones de cargas positivas y negativas en una molécula de proteína, cambiando así la configuración de la misma. En una enzima, la forma del sitio activo puede ser cambiada. Nosotros debemos esperar, por lo tanto, que cambios en el pH afectarán la actividad de las enzimas. El valor de pH más favorable, el punto en el cual la enzima es más activa, se conoce como pH óptimo. Valores de pH extremadamente altos o bajos resultan usualmente en le pérdida de la actividad enzimática debido a la desnaturalización de la enzima.
Tabla 2. Efecto del pH sobre la actividad enzimática.
Intensidad de color pH 6 pH 7 pH 8 pH 9
Actividades.
a. ¿A qué pH fue mayor la cantidad de producto formado en la reacción enzimática?
b. ¿Cómo puede relacionarse la cantidad de producto formado por minuto con la tasa de reacción enzimática? - Es cualitativamente proporcional a la intensidad de color desarrollado en cada tubo.
c. ¿A qué pH fue mayor la tasa? Grafique sus resultados (pH en la abscisa y tasa de reacción en la ordenada). – pH 8
d. Añadir limón o jugo de naranja sobre frutas peladas previene su oscurecimiento. ¿Por qué ocurre esto? – sí, porque son acidos y retardan el proceso de reacción, y son compuestos antioxidantes
PARTE III. Efecto de la concentración de enzima sobre la actividad enzimática.
Cuando un sustrato de fija en el sitio activo de una enzima, se forma un complejo enzima-sustrato. La enzima lleva a cabo una reacción y un producto es entonces formado. Usualmente la tasa de reacción es directamente proporcional a la concentración de enzima. La tasa de reacción se incrementará en proporción al incremento en la concentración de la enzima sólo si el sustrato está presente en exceso de tal forma que la reacción no esté limitada por la disponibilidad del mismo.
Tubo Buffer de fosfatos pH 7
Jugo de papa Catecol (AÑADA AL ÚLTIMO) A 3 mL + 20 gotas ----- 10 gotas B 3 mL + 15 gotas 5 gotas 10 gotas C 3 mL + 10 gotas 10 gotas 10 gotas D 3 mL + 0 gotas 20 gotas 10 gotas
24 5 mL + 24 gotas 24 gotas 32 5 mL + 16 gotas 32 gotas 48 5 mL + 0 gotas 48 gotas
Tabla 4. Efecto de la concentración de sustrato sobre la actividad enzimática
Intensidad de color 1 2 4 8 16 24 32 48
Actividades.
a. ¿Que consecuencias tiene la existencia de una máxima velocidad enzimática sobre el metabolismo celular? - aceleraría o regularía mas rápido los procesos metabolicos y obtendríamos energía más rápido para el cuerpo.
b. ¿Sus resultados apoyan a idea de que una enzima tiene una máxima velocidad a la cual trabaja? Explique. - Sí, porque hay una relación entre la concentración del sustrato y la enzima en donde la enzima trabaja más rápido, no se siente saturada de sustrato, pero tampoco insaturada.
c. Grafique sus resultados (concentración de catecol en la abscisa y velocidad de reacción en la ordenada).
sustrato sea adecuada, no muy saturada, pero tampoco muy insaturada. La concentración de sustrato debe ser hasta donde la enzima pueda trabajar.
http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm http://www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/6to/Enzimas.htm https://es.scribd.com/document/324598679/Actividad-Enzimatica-de-La-Catecolasa
