DIAGNOSTICO DIRECTO
CUADROS CLÍNICOS
La brucelosis humana presenta manifestaciones clínicas muy polimorfas, siendo
muchas de ellas asintomáticas. La brucelosis aguda típica se manifiesta como una:
enfermedad febril de inicio agudo
sudoración profusa, desproporcionada a la fiebre existente y de predominio
nocturno
algias de localización articular (sin artritis), musculares o neurológicas
Busca la presencia de anticuerpos específicos anti-brucella en el suero
del animal enfermo o infectado.
Como en ocasiones no es posible esperar el tiempo que se requiere para
obtener un aislamiento de brúcelas y esté no siempre se logra, con gran
frecuencia se ocurre a las pruebas indirectas para establecer el
diagnóstico.
Durante la fase bacterémica de la brucelosis el animal afectado genera
niveles importantes de anticuerpos contra la bacteria.
Aglutinación
En sus diferentes modalidades, es la prueba más utilizada debido a su
rapidez y sensibilidad. El aumento significativo del título de anticuerpos
es la base diagnóstica de la enfermedad.
CULTIVO
El aislamiento de Brucella spp. constituye el método diagnóstico
definitivo. Suele obtenerse por hemocultivo o cultivo de médula
ósea y, más raramente, por cultivo de líquido cefalorraquídeo, líquido
articular, exudado purulento, etc
El medio clásico de Ruiz Castañeda, utiliza: una fase sólida y otra líquida,
es el más apropiado para el diagnóstico.
En la mayoría de los procesos agudos,
tras incubar el medio 2-4 días, es posible
observar en la fase sólida pequeñas
colonias que se deslizan por el agar en
forma que recuerdan las lágrimas de cera
resbalando por la vela.
AUTOR
ALUMNO: Sullon Robles Brain Jonatan
CODIGO: 110644K
CICLO: V
CURSO: Microbiología Veterinaria
TEMA: Brucelosis
AÑO: 2021
Brucelosis
DIAGNOSTICO INDIRECTO
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
Dada la extrema sensibilidad que muestra la detección de DNA
bacteriano mediante PCR en las distintas muestras estudiadas, es muy
probable que en los próximos años se aplique la PCR a muestras de
enfermos con sospecha de brucelosis, permitiendo el diagnóstico de la
enfermedad con criterios de certeza en aquéllos casos en los que hoy no
podemos dar una respuesta precisa.
ETIOLOGÍA
El género Brucella está formado por bacilos
gramnegativos pequeños, inmóviles y aerobios,
de crecimiento lento. Genéticamente, el género
Brucella parece monoespecífico.
Se reconocen tres especies clásicas responsables
de la brucelosis humana, con especificidad de
especie animal:
Brucella melitensis afecta fundamentalmente a cabras y ovejas, pero puede
afectar a bóvidos y cerdos
Brucella abortus es el microorganismo implicado con mayor frecuencia en la
brucelosis bovina.
Brucella suis afecta primariamente al ganado porcino y no se ha descrito
ningún caso en nuestro país.
El término brucelosis se refiere al conjunto de enfermedades ocasionadas, tanto
en el hombre como en los animales (zoonosis) por microorganismos del género
Brucella.
Que infectan principalmente al ganado vacuno, porcino, caprino y ovino y a los
perros. Los humanos generalmente contraen la enfermedad por contacto directo
con animales infectados, por comer o beber productos animales contaminados o
por inhalar agentes transmitidos por el aire.
Rosa de Bengala
Utiliza como antígeno en una suspensión bacteriana a la que se ha
añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir
del enfermo. Proporciona una aproximación diagnóstica en pocos
minutos con una sensibilidad y especificidad muy altas. Presenta elevado
grado de correlación con la seroaglutinación y, por su simplicidad, es
muy útil como prueba de despistaje inicial o screening.
Prueba de coombs
Se utiliza para demostrar la presencia de anticuerpos aglutinantes y no
aglutinantes, fundamentalmente IgG. El suero de Coombs
(inmunoglobulina humana) se encargaría de facilitar la aglutinación de los
anticuerpos no aglutinantes del suero problema, fijados a la suspensión
antigénica de B. abortus. El título obtenido es, por ello, como mínimo el
de la aglutinación y generalmente es mucho más elevado, tanto más
cuanto mayor es el tiempo de evolución de la enfermedad.
Enzimoinmunoanálisis
Con estas técnicas se puede detectar la presencia de los anticuerpos
específicos que se seleccionen (IgG, IgM o IgA), con unos valores
excelentes de sensibilidad y especificidad. El antígeno absorbido sobre
placas de poliestireno es, fundamentalemente, el lipopolisacárido de
brucelas en fase lisa. Los anticuerpos IgM, por su rápida desaparición son
valorables, pero no puede olvidarse que los anticuerpos IgG pueden
persistir en sujetos curados.
SUBCULTIVO Y ASPECTO COLONIAL
El subcultivo del medio difásico o del frasco procedente del aparato
automático, en medio con agar-sangre o agar-chocolate,
muestra el crecimiento, al cabo de 48 horas, de pequeñas colonias
brillantes, de diferente tamaño y de color miel claro.
Si no se observan cuidadosamente las placas, en casos con crecimiento
de escaso número de colonias, se puede falsear erróneamente
algún diagnóstico.
Tras la tinción de Gram de estas colonias para observar su aspecto
característico, se realizará la reacción de la oxidasa (positiva) y
aglutinación con suero específico frente a Brucella, suficiente para
identificar el aislamiento.
EXAMEN MICROSCÓPICO
Una vez observado el crecimiento en el medio difásico o cuando el
aparato automático de hemocultivo detecta un posible
crecimiento, la simple tinción de Gram permite hacer el diagnóstico
presuntivo de la enfermedad.
Brucella spp presenta unas características tintoriales especiales: aunque
no es una bacteria ácido-alcohol resistente, no sufre decoloración con
ácidos débiles.
EPIDEMIOLOGÍA
La brucelosis humana es, junto con la tuberculosis y la meningitis meningocócica,
la enfermedad bacteriana específica más frecuente en España. Se calcula que el
número de casos contabilizados es de tres a cinco veces inferior a la incidencia
real, debido en parte a la falta de declaración y a la existencia de infecciones
asintomáticas.
La enfermedad se transmite por dos mecanismos claramente definidos:
por contagio directo, mediante contacto, inoculación o inhalación
por vía indirecta, a través de la ingestión de productos lácteos
contaminados.
El contacto con materiales infectados (abortos, placentas, estiércol, etc.)
es probablemente el mecanismo principal. La ingestión de leche o
productos lácteos no pasteurizados de procedencia casera.
DIAGNÓSTICO
El diagnostico de brucelosis se sospecha en pacientes con fiebre de origen
desconocido y que cuenten con factores de riesgo para adquirir la infección. Los
estudios de laboratorio y gabinete de rutina no muestran datos específicos;
habitualmente el conteo leucocitario es normal, aunque puede estar disminuido y
en ocasiones se encuentra ligera transaminasemia.
El diagnostico definitivo se basa en el aislamiento de la brucella en cultivos de
sangre, medula ósea, hígado y otros tejidos.
Permiten identificar el agente etiológico en una muestra del animal
enfermo o infectado. Se realiza a partir de muestras de líquido del
cuarto estómago del feto abortado, placenta, pulmón, bazo, leche,
sangre y otros líquidos. Se deben conservar en refrigeración y enviarse
al laboratorio lo antes posible.
Aglutinación
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
https://www.seimc.org/contenidos/ccs/revisionestematicas/serologia/diagbruce.pdf
https://www.ica.gov.co/areas/pecuaria/servicios/enfermedades-animales/brucelosis-bovina-1/pruebas-para-el-diagnostico-de-
brucelosis.aspx
