¡Descarga Mapes fisics y más Apuntes en PDF de Genética solo en Docsity!
TEMA 13
MAPES FÍSICS
CONTINGUTS
Mapes per delecions. L'ús dels cromosomes equilibradors en l'anàlisi genètica. Ús de les delecions per cartografiar mutacions. Mapes per hibridació cel∙lular somàtica. Mapes amb híbrids irradiats. Mapes per hibridació "in situ".
OBJECTIUS
Saber distingir entre mapes genètics i físics. Conèixer i entendre els mètodes de cartografiat basats en delecions. Entendre el funcionament i la utilitat dels cromosomes balancejadors. Conèixer el fonament dels mapes per híbrids irradiats. Conèixer el fonament de la hibridació in situ tipus FISH_._ Saber localitzar un gen en un determinat cromosoma a partir de dades de hibridació de cèl∙lules somàtiques. Conèixer el fonament del cartografiat mitjançant marcadors moleculars i les seves possibles aplicacions. 1
INTRODUCCIÓ:
MAPES GENÈTICS I MAPES FÍSICS
Mapes genètics
Vistos anteriorment. També coneguts com mapes de lligament. Elaborats gràcies al fenomen de entrecreuament. Les distàncies se estableixen en funció de la freqüència dels successos de recombinació que ocorren a la regió cromosòmica.
Mapes físics
Mostren les ubicacions físiques específiques dels gens o marcadors, a cada cromosoma. Encara són necessàries les dades fenotípiques. Diferents fonaments per a la seua elaboració.
- Mapes per delecions
- Mapes per hibridació cel·lular somàtica
- Mapes per híbrids irradiats
- Mapes per hibridació "in situ"
Ubicació relativa
Ubicació real
2
Un bon cromosoma equilibrador:
- Deuen contenir:
- Un marcador dominant visible
- Una mutació letal recessiva
- Múltiples inversions (eviten la recombinació)
Exemple de marcador dominant visible + letal recessiu Cy (curly) = ales corbades
X
Cy /+ Cy/Cy
E X
E
: mutació letal en homozigosi
E
E
E
E letal letal
Tots els individus viables amb el mateix genotip parental
- És útil que a més continga alguns gens amb mutacions recessives:
4
DELECIÓ: Tipus de mutació que consisteix en la pèrdua d’un fragment de DNA d’un cromosoma. Origina el fenomen de la pseudodominància (al·lel recessiu que es comporta como dominant).
ÚS DE LES DELECIONS PER CARTOGRAFIAR
MUTACIONS
Si un individu homozigot recessiu en el gen d'interès s’encreua amb un individu heterozigot per a una deleció, en la progènie apareixeran individus mutants només quan la mutació es troba dins de la regió delecionada ( no complementa )
5
0
La succesiva determinació de la localització interna o externa d’un mutant respecte de les diferents delecions disponibles d’una determinada regió ens permetrà situar al mutant en una de les subregions delimitades per aquestes.
7
MAPES PER HIBRIDACIÓ CEL·LULAR
SOMÀTICA
La hibridació de cèl·lules somátiques es basa en el fet de que, en cultius cel·lulars, dues cèl·lules de la mateixa o diferent espècie,poden ser induïdes a fusionar-se en una única cèl·lula híbrida
Els cromosomes humans es van perdent fins que la línia cel∙lular s’estabilitza
La cèl∙lula resultant de la fusió (heterocarion) conté 2 nuclis
Normalment s’hibriden cèl∙lules humanes amb cèl∙lules de ratolí o hàmster
8
MAPES AMB HÍBRIDS IRRADIATS
Genera mapes de major resolució de marcadors moleculars distribuïts per tot el cromosoma analitzat.
Obtenció :
- S’irradien cèl·lules humanes amb rajos X amb la intenció de fragmentar els cromosomes.
- Seguidament es fusionen les cèl·lules irradiades i les de ratolí per a formar una col·lecció d’híbrids diferents.
10
La presencia simultània de marcadors humans en un panell de varis híbrids irradiats posa de manifest l'existència de lligament.
Un dels grans avantatges d’aquesta tècnica és que es pot treballar amb un gran nombre d’híbrids irradiats. Una col·lecció estàndar de 100 a 200 híbrids pot ser suficient per generar un mapa d’alta resolució del genoma humà, amb una resolució estimada en 10 voltes major que la proporcionada per un mapa de recombinació.
Mapa per híbrids irradiats del cromosoma 21 humà. http://www-shgc.stanford.edu/resources/humanrhmap.html
11
EN RESUM…
MAPES FÍSICS
Mostren les ubicacions reals dels gens o marcadors, a cada cromosoma.
MAPES PER DELECIONS
MAPES PER HIBRIDACIÓ
CEL·LULAR SOMÀTICA
MAPES PER HÍBRIDS
IRRADIATS
MAPES PER
HIBRIDACIÓ "IN SITU"^13
BIBLIOGRAFIA
Pierce (2009). Tema 7: Ligamiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes.
RECURSOS WEB
NCBI: A new gene map of the human genome. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/genome/genemap99/
PER SABER MÉS
Dear, P. H. (2001). Genome mapping. Encyclopedia of Life Sciences: Macmillan Publishers Ltd., Nature Publishing Group‐
14
