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ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y HOMEOPATIA
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria
Academia de Fisiológicas
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Prácticas de visto, sin resolver, Guías, Proyectos, Investigaciones de Histología
Prácticas de todo el semestre histología
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
2025/2026
1 / 78
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ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y HOMEOPATIA
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MANUAL DE
PRÁCTICAS
DE
HISTOLOGIA
ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y HOMEOPATIA
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria Academia de Fisiológicas
PRÁCTICA 1: MICROSCOPIO
PRÁCTICA 2: MICROMETRÍA
PRÁCTICA 3: MICROTOMO
PRÁCTICA 4: TÉCNICA HISTOLÓGICA
PRÁCTICA 5: CARIOTIPO
PRÁCTICA 6: MORFOLOGÍA CELULAR
PRÁCTICA 7: CROMATINA SEXUAL
PRÁCTICA 8: HEMATOLOGÍA
PRÁCTICA 9: FÓRMULA BLANCA
PRÁCTICA 10: RECUENTO DE ERITROCITOS Y LEUCOCITOS
PRÁCTICA 11: GRUPO SANGUÍNEO Y FACTOR Rh
PRÁCTICA 12: TEJIDO LINFÁTICO
PRÁCTICA 13 Y 14: TEJIDO CONECTIVO DENSO ESPECIAL.
PRÁCTICA 15: TEJIDO MUSCULAR
PRÁCTICA 16: APARATO DIGESTIVO
PRÁCTICA 17: HÍGADO Y PÁNCREAS
PRÁCTICA 18: APARATO RESPIRATORIO
INDICE:
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MICROSCOPIO
I. OBJETIVO.
Al término de la práctica el alumno sera capaz de:
l. Describir las partes fundamentales de un microscopio compuesto.
- Enfocar correctamente un microscopio compuesto.
- Reconocer a que corresponden las estructuras que se observan en el microscopio.
II. INTRODUCCIÓN:
Tanto en histología como en citología, el instrumento más importante es, sin duda, el microscopio compuesto.
Este instrumento fundamental ha sido modificado en diversas formas de manera que ademas del microscopio óptico corriente, actualmente existen:
El microscopio de contraste de fase, el microscopio de interferencia, el microscopio polarizante, el microscopio de fluorescencia ,el microscopio de luz ultravioleta y el microscopio electrónico,
Cada uno de ellos ofrece sus ventajas para fines determinados y, naturalmente sus limitaciones.
Es necesario distinguir cuidadosamente la resolución y el aumento, términos con los cuales se caracteriza el rendimiento de un microscopio. La resolución es, de las dos, la cualidad más importante. El poder de resolución de un sistema analítico es la medido expresada generalmente, como la distancia lineal. El aumento, que es la relacón entre el tamaño de la imagen y del objeto, nos da simplemente la escala según la cual debemos relacionar las dimensiones del objeto con las de la imagen.
PRÁCTICA 1
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria Academia de Fisiológicas El aumento es una característica útil, en cuanto permite tener la seguridad que la imagen llevada a un tamalo suficiente como para que todos los detalles resueltos sean facilmente visibles. La resolución de un microscopio se determina por las aperturas numéricas las lentes del objetivo y del condensador, la apertura numrico da el tamar~o o angula del cono de luz enviado por el condensador al plano del objeto y del cono luminoso que emerge del objeto y que es recogido por el objetivo.
La luz que llega después de atravesar los finos detalles del objeto es difractado en direcciones diferentes o lo de su propagacion primitiva y cuanto mas fino es el detalle interpuesto, tanto mayor es el angulo en que la luz es difractada, El fenómeno es andlogo a la difraccion y difusión de la luz que pasa por orificios pequeño.
La apertura numérica es pues la medida de la capacidad del microscopio para recoger la luz difractado de los detalles finos del objeto. El poder de reolucion total de un microscopio óptico bien construido de alta apertura numerica, se acerca al limite teorico y es aproximadamente de 0.25 micrómetros.
El microscopio para su estudio se divide en tres partes o sistemas que son:
a) Base o pie
b) Brazo o columna
SISTEMA MECANICO c) Platino con carro
d) Revolver
e Tornillo micrometrico
f) Tornillo macrometrico
a) Espejos planos o concavos
SISTEMA DE ILUMINACIÓN b) Anillo de filtros
c) Diafragma con condensador
d) Tubo del microscopio
a) Lente ocular
SISTEMA ÓPTICO b) Lentes objetivos
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- ¿Bajo qué principios trabaja el microscopio electrónico?
- ¿Por qué se le denomina a uno de los lentes objetivo de inmersión?
- ¿Por qué se les llama a los objetivos de 10x y de 40x, como seco debil y seco fuerte?
- ¿Cómo se obtiene el aumento real del objetivo observado?
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFÍA
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MICROMETRÍA
I. OBJETIVOS
Al finalizar la práctica el alumno sera capaz de:
- Medir estructuras celulares.
- Determinar el espesor de la estructura observada.
II. INTRODUCCIÓN:
El tamaño de las células tanto vegetales como animales es muy variado, pero en general caen bajo el nombre de microscópicas, es decir son invisibles al ojo humano, por ello en esta práctica se tratará lo relativo a micrometria. Es decir al estudio de las medidas microscopicas, para lo cual se utilizan dos elementos llamados micrómetros, ocular y objetivo, que nos determina el poder de resolucion de los objetivos, es decir, nos permite calibrar el microscopio que una vez calibrado se puede usar indefinidamente para hacer mediciones de células o estructuras celulares.
- Determinación del aumento del microscopio: El aumento obtenido en los sistemas ópticos (objetivos y oculares) que se emplean en la observación microscópica se expresa en decimetros.
Los microscopios que disponemos para nuestro trabajo tienen 3 objetivos, 2 para observación en seco y uno para inmersión, teniendo aumento de l0, 40x y 100x respectivamente, y dos oculares cuyos aumentos son 5x y 12x.
OCULARES OBJETIVOS
10x 40x 100x
5x 50 200 500
12x 120 480 1200
PRÁCTICA 2
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IV. MÉTODO A SEGUIR
- Colocar el micrómetro objetivo sobre la platina del microscopio, iluminar y enfocar la reglilla del micrómetro.
- Quitar el ocular normal y colocar el micrómetro ocular observando la reglilla de este.
- Hacer coincidir las reglillas en uno de sus puntos, de preferencia en los ceros.
- Buscar la última coincidencia y contar las lineas de las reglillas.
- Multiplicar las líneas del objetivo por 10 y dividirlo entre las del ocular, de esa manera se obtiene el coeficiente micrométrico, o sea, la distancia entre los líneas del ocular.
- Quitar el micrómetro objetivo y colocar una preparacion microscopica.
- Hacer la medición de alguna estructura, con las divisiones del micrómetro ocular, anotando a cuantas divisiones corresponde.
- Medir el espesor de la muestra de la siguiente manera: a) Colocar la preparacion en la platina. b) Bajar el tubo del microscopio hasta perder el enfoque y anotar el número del tornillo micrométrico. c) Subir el tubo del microscopio hasta perder el enfoque y anotar el número del tornillo micrométrico. d) Sacar la diferencia entre los 2 y multiplicar por 2.
V. RESULTADOS.
Haga dibujos de los micrómetros y sus escalas así como de lo observado.
VI. CONCLUSIONES.
VII. CUESTIONARIO.
¿Cuánto mide el micrómetro objetivo? ¿Cuánto mide el micrómetro ocular? ¿A qué le llamamos coeficiente micrométrico? ¿Cuál es la importancia de la.calibración del microscopio? ¿Qué utilidad representa para la histología?
VIII. BIBLIOGRAFÍA.
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MICROTOMO
I. OBJETIVO.
El alumno aprenderá el manejo del microtomo para la realización de cortes histolgicos, tomando en cuenta las medidas de seguridad y la técnica de flotación.
II. INTRODUCCIÓN.
Después de la inclusión del tejido en un bloque de parafina, este se monta en un instrumento llamado microtomo, el cual corta en tiras muy delgadas el bloque. Los cortes se desprenden de las cuchillas del microtomo por su borde con una aguja de disección.
El microtomo es un instrumento construido para obtener cortes muy delgados de tejido, según el tipo de inclusión del tejido se puede emplear alguno de los siguientes microtomos:
De deslizamiento Rotatorio De congelamiento Microtomo electrónico (para cortes ultradelagados)
Estos tipos de microtomos según sus cuchillas pueden ser móviles o fijos, o según el plano de sección, ya sea vertical u horizontal.
- Dificultad en la realizacion de los cortes:
La inclusión inadecuada o incompleta tiende a producir bloques blandos, pulposos; que al ser cortados pueden quebrarse o formar plumas. Esto es más frecuente en el caso de los tejidos excesivamente mucinosos. Si el tejido ha sido insuficientemente deshidratado, el aclarador se vuelve lechoso y cuando es colocado recibe el tejido. En estas condiciones, el aclaramiento, y por tanto la impregnación con parafina no puede completarse, y el bloque
PRÁCTICA 3
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TÉCNICA HISTOLÓGICA
I. OBJETIVO.
El alumno realizara la tecnica de coloracion, explicando en que consiste la desparafinacion, hidratacion y coloracion.
II. INTRODUCCIÓN.
Para llevar a cabo el estudio de los tejidos y celulas, es necesario efectuar una serie de mecanismos que nos permitan mantener a dichas estructuras con sus caracteristicas lo mas cercano posible a su condicion natural los mecanismos en su conjunto reciben el nombre de tecnica histologica. La tecnica histologica comprende los siguientes pasos: localizacion del tejido, obtencion del tejido, fijacion, deshidratacion, aclaracion, inclusion, corte, fijacion del corte tinción y montaje. En esta práctica se efectuara la tincion del tejido (previamente cortado y fijado en la sesion anterior), que nos determinara la diferenciacion de las estructuras celulares. Para llevar a cabo la tincion es necesario el uso de los colorantes, Los colorantes son sustancias quimicas organicas complejas, Pueden clasificarse en formas distintas, pero el enfoque mas sencillo es basar su clasificacion en su empleo respecto a los componentes tisulares y celulares.
Los colorantes de empleo general son acidos o bases, pero de hecho son sales neutras, que tienen radicales acidos o basicos.
Cuando las propiedades de tincion de un colorante se localiza en un radical basico de la sal neutra, se denomina al colorante basico, y los organos y estructuras que lo captan se denominan basofilos. En estos casos, las sustancias basofilas que atraen los colorantes basicos son en si acidas; ejemplo, los acidos nucleicos del nucleo y los componentes acidos del citoplasma. En forma semejante cuando la propiedad de tincion se localiza en el
PRÁCTICA 4
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria Academia de Fisiológicas radical acido y las estructuras tenidas por el; ejemplo, el citoplasma en general, se denominan acidofilas.
~1 colorante nuclear que se emplea con mas frecuencia es la hematoxilino, cuya propiedad de coloracion depende de lo presencia en su solu_cion de su producto de oxidacion, la hemateina. Cuando se tine con dicho colorante los nucleos tienen
color azul.
Los colorantes acidos que suelen emplearse para tenír el citoplasma en general incluyen eosina, que da un color rosado a todas las estructuras citoplasmaticas y sustancias intercelulares.
III MATERIAL POR EQUIPO:
l.— Cinco vasos de Copli.
Seis cajas de Petri completas.
Un puente de tincion.
Gasas.
Dos cubreobjetos por alumno
Xilol.
Carbol—Xilol,
Alcohol 70.
Alcohol 96.
Agua destilada 500 ml.
Alcohol acido.
Hematoxilina de Harris.
Agua amoniacal.
Eosina,
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria Academia de Fisiológicas Por banbo de escurrimento agrege con gotero alcohol—acido, al observar un vire de color morado a color rojo hacer un lavado con agua corriente contenida en una caja Petri,
En una caja de Petri que contenga agua amoniacal sumergir su preparacion y observara un vire de rojo a azul.
agua amoniacal
Colocar 4 cajas de Petri con agua destilada y sumergir la preparacion en cada una de ellas durante 30 segundos,
caja 1 caja 2 caja 3 caja 4
Colocar la preparacion en elpuente de tincion y agregar algunas gotas de Eosina cubriendo perfectamente el tejido durante 30 segundos,el sobrante regreselo al frasco.
h Por bono de escurrimiento agregarle alcohol 96.
i Agrege carbol—xilol (cxc) durante un minuto y repita Pata onerarinn riiirnr)tP ntrn rpiniit
Qute el exceso de sustancia con una gasa sin tocar el tejido.
Agrege una gota de xilol (no deje que el tejido seque, si es necesario agrege mas xilol),
- Colocar sobre el tejido una gota de Balsamo de Canada y cubrirlo rapidamente con un cubreobjetos, oprimalo
suavemente por el centro evitando que se formen burbujas.
V. RESULTADOS.
VI. CONCLUSIONES.
VII. CUESTIONARIO.
A que llamamos tecnica histologica.
Defina el termino de fijacion,
Porque es importante la deshidratacion despues de la fijacion,
Porque es importante la hidratacion antes de la tincion.
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria Academia de Fisiológicas Cual es la funcion del xilol en la tecnica.
Cual es el colorante basico usado en la práctica.
Cual es el colorante acido usado en la práctica.
Cuales son los colorantes mas usados en la histología, y cual es su finalidad?
Cual es la funcion del agua corriente despues de la hematoxilina?
En que consiste la desparafinacion?
VIII. BIBLIOGRAFIA.
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Departamento de Formación Básica Disciplinaria Academia de Fisiológicas III DESARROLLO
Para poder agilizar el trabajo y hacer mas facil la distribucion de los cromosomas es importante tener en cuenta la siguiente tabla que nos permitira acomodar a los cromosomas en el grupo que les corresponde:
GRUPO PARES HOMÓLOGOS TIPO DE CROMOSOMA
A 1, 2, 3 Metacéntrico
B 4, 5 Submetacéntrico
C 6 AL 12 Y X Submetacéntrico
D 13, 14, 15 Acrocéntrico
E 16, 17, 18 Submetacéntrico
F 19, 20 Metacéntrico
G 21, 22 y Y Acrocéntrico
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