Lunes18, Junio. 2018
UNIVERDIDAD AUSTRAL DE CHILE
Instituto de Bioquímica y Microbiología, Facultad de Ciencias
INSTRUMENTACION BIOQUÍMICA BIOQ-215
Efecto del solvente en la emisión de fluorescencia del triptófano
Victoria Caulli Sobarzo
Imagen 1. Gráfico de emisión de fluorescencia del triptófano. Relación entre intensidad de Fluorescencia VS
Longitud de onda (300 a 500 nm). S e hizo el análisis de triptófano en Agua (línea anaranjada); triptófano en
metanol al 50% y 50% agua (línea amarrilla) y triptófano en presencia de metanol 100% (línea verde). Datos
son el resultado de la sustracción de la espectroscopia de fluorescencia que se aplicó a los blancos relativos
(agua, mezcla de metanol con agua y de solo metanol) a la intensidad con la presencia de triptófano.
Observaciones y conclusión:
Se desarrolló un barrido de fluorescencia, de emisión entre 300 a 500 nm con
una velocidad de 120 nm/min. Ya que, el triptófano presenta excitación a 280
nm, estas dimensiones de medida antes comentadas permitieron la obtención
de una buena información de intensidad de fluorescencia para triptófano en
medio de agua, mezcla 50% agua + 50% de metanol y en medio 100%
metanol. Por lo que se puede decir que la cantidad de emisión de fotones en
relación al tiempo empleado fue adecuada, debido a que la cantidad de ruido
del grafico es casi mínimo gracias a esto se puede apreciar una clara lectura
del cambio conformacional de proteína en relación al tiempo en los 3
ambientes.
A medio de conclusión se puede decir que a medida que aumenta la
concentración de metanol para el tratamiento de triptófano, este presenta un
desplazamiento hacia la izquierda, ósea hacia el azul. Esto significa que al
cambiar el medio del solvente (metanol) a más hidrófobico se genera un
apagamiento de la proteína, lo que causa la disminución de la intensidad de
fluorescencia.