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seminario 3 biocel, Apuntes de Biología Celular

Asignatura: Biología Celular, Profesor: Mª Celina Rodicio Rodicio, Carrera: Biología, Universidad: USC

Tipo: Apuntes

2016/2017

Subido el 28/11/2017

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Seminario 3 – Retículo endoplásmico, aparato de Golgi y lisosomas
1.- ¿Dónde esperaría observar microsomas en una electromicrografía de una célula
hepática?
Cuándo las células se rompen, el retículo endoplásmico se fragmenta por ultracentrifugación en
pequeñas vesículas denominadas microsomas. Debido a que los ribosomas contienen una gran
cantidad de ARN, los microsomas rugosos son más densos que los microsomas lisos y se
pueden aislar mediante centrifugación de equilibrio en gradiente de densidad. Dado que los
microsomas rugosos contienen ribosomas, pueden tener más de veinte proteínas que no se
encuentran en los lisos.
De todas maneras, estos microsomas no se encontrarían puesto que la célula no está rota.
2.- Dado que las proteínas que median la inserción de las proteínas de la membrana del
retículo endoplásmico son a su vez proteínas de la membrana del retículo endoplásmico
¿cómo han llegado allí?
Si una célula madre no tiene retículo no puede crearla, lo tiene que heredar.
Con las proteínas necesarias para la importación procedente de la célula madre.
3.- Está estudiando la translocación postraduccional de una proteína en microsomas
purificados, pero encuentra que la importación es muy poco eficiente. ¿Cuál de los
factores siguientes es de esperar que aumente la eficiencia de la importación si se añade a
la mezcla de proteínas y microsomas? Razone la respuesta.
A. BiP
B. Hsp70 citosólica
C. Ribosomas libres
D. Complejo Sec61
E. SRP
A_Bip_Interviene en el plegamiento de la proteína en el lumen del retículo endoplasmático y
aumenta la eficacia de la importación.
B_Hsp70 citosólica_ Mantiene la proteína desplegada, para poder introducirla con el traslocón,
por lo que sí reconoce la señal de la secuencia proteica postraduccional.
0 0 1 FC_Ribosomas libres _Subunidades separadas no son eficientes.
D_Complejo Sec61_No son eficientes
E_No reconoce la señal proteica postraduccional
Al tratarse de una translocación postraduccional, el plegamiento de la proteína en el lumen del
retículo endoplásmico es esencial y a su vez, debe de ser correcto. El factor que aumentaría la
eficiencia de esta importación sería el BiP, y en algunos casos también el Complejo Sec61.
4.- Examine la proteína transmembrana de paso múltiple de la Figura siguiente. ¿Qué
puede predecir sobre cuál será el efecto de transformar el primer segmento hidrofóbico
transmembrana en un segmento hidrofílico? Esboce la distribución en la membrana del
ER de la proteína modificada.
El grupo amino quedaría orientado cara el citoplasma y el grupo ácido cara el lumen del retículo
endoplásmico con el añadido de aminoácidos hidrofílicos y no se ponen azúcares.
5. Si eliminara la señal de recuperación al ER de la proteína disulfuro isomerasa (PDI) que
habitualmente es una proteína soluble residente en el ER ¿Dónde esperaría encontrar a la
proteína PDI modificada?
En el exterior celular porque las proteínas que no tienen una señal de destino y entran en el
retículo terminan siempre en el exterior celular puesto que siguen la vía constitutiva.
6.- La mayoría de las proteínas usadas para fines terapéuticos son proteínas secretoras
estabilizadas por puentes disulfuro. ¿Por qué no pueden usarse células bacterianas para la
producción masiva de estas proteínas previa inserción de su gen en el genoma bacteriano,
aunque tengan todas las secuencias señal?
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Seminario 3 – Retículo endoplásmico, aparato de Golgi y lisosomas

1.- ¿Dónde esperaría observar microsomas en una electromicrografía de una célula hepática? Cuándo las células se rompen, el retículo endoplásmico se fragmenta por ultracentrifugación en pequeñas vesículas denominadas microsomas. Debido a que los ribosomas contienen una gran cantidad de ARN, los microsomas rugosos son más densos que los microsomas lisos y se pueden aislar mediante centrifugación de equilibrio en gradiente de densidad. Dado que los microsomas rugosos contienen ribosomas, pueden tener más de veinte proteínas que no se encuentran en los lisos. De todas maneras, estos microsomas no se encontrarían puesto que la célula no está rota.

2.- Dado que las proteínas que median la inserción de las proteínas de la membrana del retículo endoplásmico son a su vez proteínas de la membrana del retículo endoplásmico ¿cómo han llegado allí? Si una célula madre no tiene retículo no puede crearla, lo tiene que heredar. Con las proteínas necesarias para la importación procedente de la célula madre.

3.- Está estudiando la translocación postraduccional de una proteína en microsomas purificados, pero encuentra que la importación es muy poco eficiente. ¿Cuál de los factores siguientes es de esperar que aumente la eficiencia de la importación si se añade a la mezcla de proteínas y microsomas? Razone la respuesta. A. BiP B. Hsp70 citosólica C. Ribosomas libres D. Complejo Sec E. SRP A_Bip_Interviene en el plegamiento de la proteína en el lumen del retículo endoplasmático y aumenta la eficacia de la importación. B_Hsp70 citosólica_ Mantiene la proteína desplegada, para poder introducirla con el traslocón, por lo que sí reconoce la señal de la secuencia proteica postraduccional. C_Ribosomas libres 0 0 1 F_Subunidades separadas no son eficientes. D_Complejo Sec61_No son eficientes E_No reconoce la señal proteica postraduccional Al tratarse de una translocación postraduccional, el plegamiento de la proteína en el lumen del retículo endoplásmico es esencial y a su vez, debe de ser correcto. El factor que aumentaría la eficiencia de esta importación sería el BiP, y en algunos casos también el Complejo Sec61.

4.- Examine la proteína transmembrana de paso múltiple de la Figura siguiente. ¿Qué puede predecir sobre cuál será el efecto de transformar el primer segmento hidrofóbico transmembrana en un segmento hidrofílico? Esboce la distribución en la membrana del ER de la proteína modificada.

El grupo amino quedaría orientado cara el citoplasma y el grupo ácido cara el lumen del retículo endoplásmico con el añadido de aminoácidos hidrofílicos y no se ponen azúcares.

  1. Si eliminara la señal de recuperación al ER de la proteína disulfuro isomerasa (PDI) que habitualmente es una proteína soluble residente en el ER ¿Dónde esperaría encontrar a la proteína PDI modificada? En el exterior celular porque las proteínas que no tienen una señal de destino y entran en el retículo terminan siempre en el exterior celular puesto que siguen la vía constitutiva.

6.- La mayoría de las proteínas usadas para fines terapéuticos son proteínas secretoras estabilizadas por puentes disulfuro. ¿Por qué no pueden usarse células bacterianas para la producción masiva de estas proteínas previa inserción de su gen en el genoma bacteriano, aunque tengan todas las secuencias señal?

Las proteínas secretoras estabilizadas con puentes disulfuro tienen una señal que las conduce al retículo endoplásmico pero como las células bacterianas carecen de retículo no sería posible su secreción. No tienen las proteínas disulfuro-isomerasa y como es una zona oxidativa ayuda a formarlos. El citoplasma al ser productor, no las genera.

7.- ¿Por qué la respuesta a las proteínas mal plegadas en el retículo endoplásmico es beneficiosa para la célula? La respuesta a proteínas mal plegadas se lleva a cabo con la unión de sensores y señales intracelulares que inhiben a las proteínas que no se pueden plegar, aumentan la síntesis de chaperonas y acaba resultando beneficioso ya que el retículo posee un mecanismo que añade una molécula de glucosa a una proteína mal plegada para que posteriormente la calreticulina la pliegue de nuevo. Es beneficioso porque si el segundo plegamiento es correcto la proteína no se desperdicia si no que es utilizada por la célula.

8.- Imagine que ha modificado una serie de genes cada uno de los cuales codifica una proteína con un par de secuencias conflictivas que especifican el transporte hacia compartimentos distintos. Si los genes se expresan en una célula, prediga que señal mandará en cada una de las siguientes combinaciones. Explique el razonamiento. A. Señales de importación al núcleo y de importación al RE. B. Señales de importación al núcleo y de exportación desde el núcleo. A_La importación al retículo endoplásmico debido a la inserción de un péptido señal hidrofóbico próximo al extremo amino-terminal. B_Señal de importación al núcleo. Necesitan entrar primero para poder activarse.

9.- ¿Qué efecto tendría sobre su localización en la célula la adicción de la señal M6P a una proteína que normalmente es citosólica? ¿Y a una proteína que normalmente es secretada? Razone las respuestas. En primer lugar, no le afectaría puesto que precisa de un péptido señal hidrofóbico para entrar en el aparato de Golgi con lo que sin él no entraría en este y no llegaría a los lisosomas. En segundo lugar, iría a los lisosomas porque del retículo endoplásmico las vesículas con el material van al Golgi, dónde se reconoce la señal que es enviada a los lisosomas.

10.- ¿Cuál es el destino predecible de las hidrolasas ácidas lisosómicas en la enfermedad celular I en la que las células carecen de la enzima requerida para la formación de la señal M6P? Razone la respuesta. Al no tener la señal de reconocimiento M6P las hidrolasas no serían transportadas a los lisosomas y lo más probable es que fueran incluídas en vesículas de secreción por la ruta constitutiva porque es el destino más común de las proteínas. Sin estas enzimas los lisosomas no podrían degradar el material de su interior.

11.- Los lisosomas contienen poderosas enzimas hidrolíticos que son transportados desde su sitio de síntesis en el RE vía aparato de Golgi y endosomas perinucleares. ¿Por qué estas enzimas no dañan a los constituyentes de estos orgánulos? ¿Y por qué no destruyen su propia membrana? Porque sólo son activas en pH ácidos y el retículo endoplásmico y el aparato de Golgi carecen de este tipo de pH, sin embargo, los lisosomas gracias a una bomba de protones tienen un pH muy óptimo para que actúen las hidrolasas ácidas y además, se sintetizan en forma de proenzimas.

12.- Imagine que se ha formado un autofagosoma por la inclusión de una mitocondria por membrana del retículo endoplásmico. ¿Cuántas capas de membrana separan la matriz de la mitocondria del citoplasma? Identifique la fuente de cada membrana y de los espacios entre ellas. Existe una cubierta de oligosacáridos recubriendo la parte interna de la membrana, la membrana de la mitocondria, la membrana del autofagosomas y el espacio intermembranal. En total, 4 membranas.