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PASOS CRONOLÓGICOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA
TEJIDOS BÁSICOS Citología: ciencia que estudia las células desde el punto de vista estructural y funcional. Población celular: conjunto de células morfológica, funcional y químicamente similares.
- (^) Renovables o labiles (epidermis, intestino)
- (^) Estáticas o permanentes (neuronas, células musculares cardiacas) Embriología: ciencia que estudia la formación y el desarrollo del ser humano, desde su concepción hasta el nacimiento.
- (^) muscular
- (^) nervioso TIPOS DE POBLACIÓN (según capacidad de división) - (^1) OBTENCIÓN DEL MATERIAL Para procesar la muestra es necesario fraccionarla en trozos más pequeños. Algunas maneras de obtener una muestra son
- (^) Estables (células del higado)
TÉCNICA HISTOLÓGICA
- (^) Epitelial
- (^) conectivo Histología: ciencia que estudia a los tejidos desde el punto de vista estructural y funcional.
Conjunto de procedimientos secuenciales aplicados a un material biológico para poder
estudiarlo.
ᴛᴇ́ᴄɴɪᴄᴀs ʜɪsᴛᴏʟᴏ́ɢɪᴄᴀs ʏ ᴍɪᴄʀᴏsᴄᴏᴘɪᴀ
Citología, histología y embriología UNLP @camilabarraza
2 FIJACIÓN Es el paso más importante de la técnica ya que cualquier defecto en la fijación no puede
ser subsanado en los pasos siguientes. El fijador más utilizado es el formol (fija 1h/mm)
- (^) Fijadores simples: Por ejemplo el formol al 10% (formalina), el ácido acetico, ácido pícrico, alcohol etilico, ácido ósmico, etc.
4 ACLARAMIENTO Con este paso se busca que la muestra se transparente y para sustituir el
deshidratante por una sustancia soluble con el medio de inclusión. El aclarante de elección en este paso es el xilol. Preservar los tejidos lo más parecido a cuando estaban vivos
3 DESHIDRATACIÓN Busca eliminar por completo el agua del tejido para después incluirlo en
medios no hidrosolubles (porque la parafina es hidrofóbica). Se sumerge en concentraciones CRECIENTES de alcohol para eliminar el agua de forma lenta y evitar la retracción del tejido. Biopsia (incisional, punción, raspado, etc)
5 y 6 IMPREGNACIÓN E INCLUSIÓN EN PARAFINA La impregnación consiste en sumergir la
muestra en parafina líquida (entre 5660ºc) unas 2 o 3 veces para asegurar que el xileno sea eliminado y reemplazado. La inclusión consiste en preparar la muestra (taco final) colocarlo en un molde (barras de leuckart o cassets) y dejar que se solidifique para poder realizar el corte con el micrótomo.
- (^1) OBTENCIÓN DEL MATERIAL Para procesar la muestra es necesario fraccionarla en trozos más pequeños. Algunas maneras de obtener una muestra son ¿Por qué y para qué fijamos? Puede ser por perfusión o inmersión, método físico. Pieza quirúrgica Detener los procesos de autólisis post-mortem - (^) Mezclas fijadoras: Contienen más de un fijador. Por ejemplo pueden ser: bouin, líquido de zenker, líquido de kelly, etc. FIJADORES
Fijación química: Fijadores simples y compuestos (perfusión, inmersión)
Fijación físicas: Se somete la muestra a cambios de temperatura. congelación, microondas,
desecación. Necropsia
- (^) ORCEÍNA Evidencia fibras elásticas. 1nm=1000micras
OTRAS TÉCNICAS DE COLORACIÓN:
MICROSCOPIO Y SUS PARTES
1000=micras=1mm
- (^) Técnica de PAS Evidencia hidratos de carbono (rojopurpura-fucsia) La penetración del formol (lo que tarda en fijar) es de 1h/mm.
DATOS RELEVANTES
Muestra citologica: se fija con alcohol etilico 70 80%
- (^) Técnica de MASSON Tiñe las fibras colágenas de tejido muscular.
- (^) RETICULINA Impregnado con sales de plata. Evidencia fibras reticulares.
- (^) Técnica SUDAN Evidencia lípidos (triglicéridos, colesterol, fosfolípidos, esteroides) en muestras congeladas. MICRONESMICRASMICROMETRO 9 MONTAJE Se coloca la muestra en un cubreobjetos de vidrios\ para dar paso a la luz. Se pega con bálsamo de Canadá. COLORANTES MÁS UTILIZADOS Muestra ya montada, lista para observar
El microscopio óptico se encuentra constituido por una parte mecánica (o estatico) y otra parte
óptica.
MICROSCOPIO Y SUS PARTES
- (^) Brazo: Sostiene el tubo y a la patina, permite el ascenso y descenso del tubo. - (^) Revólver: Disco giratorio donde se colocan los distintos objetivos. - (^) Tubo: sostiene el sistema de lentes (ocular en su parte superior y objetivos en la parte inferior). Puede ser recto u oblicuo. - (^) Base: Pie de apoyo de todo el aparato.
PARTE MECÁNICA
- (^) Tornillo micrométrico (ajuste corto): permite realizar movimientos imperceptibles (no pasa de los 3mm), posibilitando el enfoque de detalles finos (enfoque definitivo del preparado). - (^) Platina: Pieza metalica que sirve de apoyo para permitir la observación del preparado, puede ser móvil. - (^) Tornillo macrométrico (ajuste largo): permite desplazamientos rápidos de aproximación (desplazamientos que se observan a simple vista). Un giro excesivo o descuidado puede hacer que la muestra choque con la lente del objetivo, rompiendo el portaobjetos o dañando la óptica. Tubo Revolver o partalentes Lente ocular Tiene una medida estandar de 10 veces más Varias medidas 4x; 10x;40x. 100x) Lente objetivo Pinzas Brazo Platina Ajuste largo Ajuste corto Base (diafragma=condensador) Iris funte de luz Foco Tornillos
