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Apresentação Cromatografia, Trabalhos de Biomedicina

Universidade Severino Sombra (USS)Biomedicina

Trabalho apresentado a disciplina de Bioquimica, para a introdução a cromatografia

Tipologia: Trabalhos

Antes de 2010

Compartilhado em 02/10/2010

leticia-cresano-12
leticia-cresano-12 🇧🇷

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Universidade Severino Sombra
Universidade Severino Sombra
Curso de Biomedicina - 2° Período
Curso de Biomedicina - 2° Período
Acadêmicas: Letícia Cresano
Marissol Lima
Patrícia Oliveira
Thaísa Reis
Cromatografia
Cromatografia
Prof. Márcia Reis
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Universidade Severino SombraUniversidade Severino Sombra Curso de Biomedicina - 2° Período Curso de Biomedicina - 2° Período Acadêmicas: Letícia Cresano Marissol Lima Patrícia Oliveira Thaísa Reis

Cromatografia Cromatografia

Prof. Márcia Reis

IntroduçãoIntrodução

  • (^) Processo de separar gases, líquidos ou sólidos, em uma mistura ou solução, por adsorção*.
  • (^) Enquanto a mistura flui sobre o meio adsorvente, cada substância vai se dispondo nesse meio em níveis ou faixas diferentes, muitas vezes coloridas, e depois recuperáveis.
  • (^) *é a adesão de moléculas de um fluido (o adsorvido) a uma superfície sólida (o adsorvente).

ClassificaçãoClassificação

1. Classificação pela forma física do sistema cromatográfico 2. Classificação pela fase móvel empregada 

  1. Classificação pela fase estacionária utilizada 
  2. Classificação pelo modo de separação

Métodos cromatográficosMétodos cromatográficos

mais utilizados mais utilizados

Método Mecanismo de Separação Gel filtração Peso molecular Troca iônica Carga Afinidade Atividade biológica

  • (^) Escala industrial: separação de sais e de impurezas de baixo peso molecular.
  • (^) Escala piloto: fracionar e purificar moléculas de proteína.
  • (^) Géis mais utilizados: Biogel P e A (Bio Rad) e a série Sephadex S,G e LH (Pharmacia). Cromatografia de Gel Cromatografia de Gel Filtração Filtração

Cromatografia de trocaCromatografia de troca

iônica iônica

  • (^) Princípio: separação de macromoléculas carregadas positiva ou negativamente.

Cromatografia de trocaCromatografia de troca

iônica iônica

  • (^) Utilização:
  • (^) purificação de antibióticos;
  • (^) purificação de proteínas, em grande escala.

VantagensVantagens xx

Desvantagens Desvantagens

 Permite a determinação de espécies iônicas orgânicas e inorgânicas;  Sensibilidade a baixas concentrações;  Tempo de análise ( minutos);  Pequenos volumes de amostra (1 mL).

  • (^) Custos ( ↑ );
  • (^) Mão de obra especializada.

Cromatografia de afinidadeCromatografia de afinidade

  • (^) A seletividade é obtida pela utilização de moléculas anexadas à resina cromatográfica, que se ligam especificamente à determinados compostos (sistema chave e fechadura).

Cromatografia de afinidadeCromatografia de afinidade

  • (^) Limitada pela não homogeneidade nas matrizes (como celulose), que causa uma desigual fluidez do solvente através da coluna: - (^) HPLC (High Performance Liquid Cromatography ) (cromatografia líquida de alta pressão) - (^) U-HPLC
  • Permite que proteínas sejam separadas mais rapidamente e a separação de moléculas com estruturas e tamanhos muito semelhantes.

Tipos de ResultadosTipos de Resultados

Tipo de Cromatografi a Eluentes Condição Final da Amostra Custo Gel filtração Qualquer solução aquosa Amostra diluída em eluente

Troca iônica Soluções salinas ou com pHs distintos da condição inicial Amostra concentrada em solução salina ** Afinidade Alta concentração de lingante ou sais Amostra concentrada contendo ou não ligante

Referências http://www.biomol.org/glossario.shtml medicina.med.up.pt/bcm/trabalhos/.../tecnicasanaliseproteinas.doc http://www.dicionarioinformal.com.br/definicao.php?palavra=elui%E7%E3o&id=