2 –Parte experimental
2.1 – Reagentes
•Riboflavina
• ácido acético concentrado
2.2 – Material/Aparelhagem
• Espectrofluorímetro/Fluorímetro
• Material corrente de laboratório
• Folha de alumínio
2.3 – Preparação de Soluções
• 1 L - Solução de ácido acético 5% (v/v)
• 500 mL - Solução mãe em riboflavina (20 ppm) : Dissolve-se 10,0 mg de riboflavina
num balão volumétrico de 500 mL usando a solução de ácido acético a 5% (V/V).
• 50 mL - Solução intermédia de riboflavina (2,0 ppm) por diluição da solução anterior
em ácido acético 5% (V/V).
• Solução amostra - Esmague um comprimido cont endo vitamina B2 num almofariz até
obter um pó fino. Pese rigorosamente cerca de 50 mg do pó num copo e adicione
solução de ácido acético 5% (V/V) até se dissolver (caso exista precipitado insolúvel
proceda a uma filtração). Transfir a, então, para um balão volumétrico de 500 mL e
dilua até ao traço com a solução de ácido.
2.4 – Técnica
1. Em balões de 25 mL, prepare 5 padrões de concentração entre 0,02 e 0,2 ppm de
riboflavina em ácido acético 5% (V/V). Prepare ainda um branco.
2. Após a calibração do aparelho, selecione os comprimentos de onda de excitação e
de emissão experimental e leia as intensidades de emissão para cada uma das soluções
padrão e amostra. ( Se a absorvância da amostra sa ir do intervalo dado pelos padrões
proceda a uma nova diluição desta).
3. Tendo em conta a diluição da amostra, determine o teor de riboflavina no
comprimido e compare o resultado obtido com as indicações do rótulo.
