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ANTÍGENO-ANTICORPO
Prof. MSc. Adriano Moraes da Silva
Imunologia Clínica
Faculdade de Ciências Médicas
UNIP - Dutra
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Aula II de Imunologia - Profº Adriano
Tipologia: Notas de aula
Antes de 2010
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INTERAÇÃO
ANTÍGENO-ANTICORPO
Prof. MSc. Adriano Moraes da Silva
Imunologia Clínica
Faculdade de Ciências Médicas
UNIP - Dutra
Ligações não covalentes:
- Pontes de Hidrogênio
- Ligações iônicas
- Interações hidrofóbicas
Interação reversível
Complementariedade
Especificidade
Prof. MSc. Adriano Moraes
Pesquisa
Diagnóstico
Soroepidemiológia
Métodos:
Precipitação
Aglutinação
Imunoensaios
Aplicações
Prof. MSc. Adriano Moraes
Metodologias que utilizam:
1) Reagentes não marcados
Reação de precipitação
Reação de aglutinação
Reação de Floculação
2) Reagentes marcados
RIA
ELISA
Imunofluorescência
Western Blot
Prof. MSc. Adriano Moraes
Reações de Aglutinação
Ac + Ag particulado
aglutininas
Agregação visível de partículas
Efeito pró-zona
Eritrócitos
Bactérias
Fungos
látex
Prof. MSc. Adriano Moraes
Aglutinação Direta
Tipagem ABO
Testes confirmatórios para sífilis
Células ou partículas insolúveis + Ac = Aglutinação
- Detecção Acs específicos
- Quantificação
Aglutinação bacteriana
Presença de infecção
Diferenciação de espécies
Prof. MSc. Adriano Moraes
Aglutinação passiva
Ag solúveis associados a outras superfícies
(Partículas de látex ou superfície de hemácias)
Prof. MSc. Adriano Moraes
Inibição da Aglutinação
Prof. MSc. Adriano Moraes
1- Reação de precipitação em soluções
Reação quantitativa:
Concentração cte Ac
Concentralçao cresc. Ag
Concentração precipitada
Prof. MSc. Adriano Moraes
2 - Reação de Precipitação em
gel
Utiliza uma matriz de ágar
Ag + Ac = linha de precipitação visível
a) Imunodifusão radial
(Método de Mancini)
Ag ou Ac fixos
Dosagem de proteínas séricas
b) Imunodifusão dupla
Identidade de Ags = Ac de
reatividade conhecida
Prof. MSc. Adriano Moraes
Mancine
É possível realizar exames diretos (Ag?) e
indiretos (AC?).
O gel utilizado deverá conter o elemento
que se ligará àquilo a ser pesquisado no
soro do paciente.
Prof. MSc. Adriano Moraes
Técnica de Mancine
(ex. Toxoplasmose)
- Pesquisa de AC (técnica indireta)
- O gel de agarose deverá conter o Ag
Toxoplasma gondii.
- Fazer um orifício central neste gel, e
adicionar o soro do paciente (AC?)
- Aguardar ocorrer a difusão deste soro pelo
gel, e quando AC (?) estiver em equilíbrio de
concentração com o Ag presente no soro,
haverá a formação do complexo Ag-AC que
se torna pesado e se precipita no meio.
Prof. MSc. Adriano Moraes
Técnica de DDGA (ex: Toxoplasmose)
- No gel colocado numa placa de Petri
(estéril), fazer um orifício central e demais
orifícios na periferia da placa.
- Ao orifício central adicionar solução
contendo Ag Toxoplasma gondii.
- Aos orifícios periféricos, adicionar soro
dos pacientes
Prof. MSc. Adriano Moraes
- Aguardar ocorrer a difusão da solução
contendo Ag e dos soros dos pacientes.
- Quando esses, alcançarem equilíbrio de
concentrações, formarão complexos Ag-
AC que se precipitam no gel
Prof. MSc. Adriano Moraes