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Aula pratica bioquímica, Exercícios de Bioquímica

Caracterizacao de aminoácidos e proteinas,

Tipologia: Exercícios

2019

Compartilhado em 15/02/2024

gilvan0800
gilvan0800 🇧🇷

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AMINOÁCIDOS, PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS - EXPERIMENTAL
OBJETIVOS : saber identificar um aminoácido, peptídeo ou proteína no laboratório.
Saber diferenciar entre aminoácidos livres e proteínas. Conhecer os fatores que causam
a desnaturação de uma proteína.
1) Realização do teste da Ninhidrina
Materiais:
Balão volumétrico 100 mL, Pipeta volumétrica 10 mL - Béquer 100 mL, 3 Tubos de
ensaio- Pipeta graduada 10 mL - Balança analítica - Conta-gotas
- Tampão fosfato 0,01mol/L - - Clara de ovo - Ninhidrina - Glicina 10% - Aspartato 10%
-Ninhidrina: Dissolver 100 mg de ninhidrina em 100 mL de tampão fosfato 0,01 mol/L
(pH = 7,0). Conservar em frasco escuro na geladeira.
Prepare uma solução de albumina 10% (v/v) dissolvendo 10 mL de clara de ovo em
tampão fosfato 0,01 mol/L e avolumando com o tampão para 100 mL em balão
volumétrico.
Procedimento:
Num tubo de ensaio pipetar 2,0 mL de solução de ninidrina e adicionar 5 gotas da
solução de proteína 10%. Aquecer em banho-maria fervente por 5 min. Anotar o
resultado.
Repetir o procedimento substituindo a solução de proteína por solução de aminoácido
a 10% (glicina e aspartato).
Resultados:
cor
Intensidade da cor
(++)
explicação
Glicina
Aspartico
Proteina
2)Realização do teste do Biureto
Materiais:
- 3 Tubos de ensaio - 4 Pipetas graduadas 10 mL - - Balão volumétrico 100 mL Balança
analítica - Espátulas Proveta 50 mL
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AMINOÁCIDOS, PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS - EXPERIMENTAL OBJETIVOS : saber identificar um aminoácido, peptídeo ou proteína no laboratório. Saber diferenciar entre aminoácidos livres e proteínas. Conhecer os fatores que causam a desnaturação de uma proteína.

1) Realização do teste da Ninhidrina

Materiais: Balão volumétrico 100 mL, Pipeta volumétrica 10 mL - Béquer 100 mL, 3 Tubos de ensaio- Pipeta graduada 10 mL - Balança analítica - Conta-gotas

  • Tampão fosfato 0,01mol/L - - Clara de ovo - Ninhidrina - Glicina 10% - Aspartato 10%
  • Ninhidrina: Dissolver 100 mg de ninhidrina em 100 mL de tampão fosfato 0,01 mol/L (pH = 7,0). Conservar em frasco escuro na geladeira. Prepare uma solução de albumina 10% (v/v) dissolvendo 10 mL de clara de ovo em tampão fosfato 0,01 mol/L e avolumando com o tampão para 100 mL em balão volumétrico. Procedimento: Num tubo de ensaio pipetar 2,0 mL de solução de ninidrina e adicionar 5 gotas da solução de proteína 10%. Aquecer em banho-maria fervente por 5 min. Anotar o resultado. Repetir o procedimento substituindo a solução de proteína por solução de aminoácido a 10% (glicina e aspartato). Resultados: cor Intensidade da cor (++) explicação Glicina Aspartico Proteina

2)Realização do teste do Biureto

Materiais:

  • 3 Tubos de ensaio - 4 Pipetas graduadas 10 mL - - Balão volumétrico 100 mL – Balança analítica - Espátulas Proveta 50 mL
  • Sulfato de cobre II penta-hidratado Albumina 10% - Sal de Rochelle (tartarato de sódio e potássio) Béquer 100 mL - Glicina 10% - Hidróxido de sódio 10% - Água destilada Reativo do Biureto: Em 50 mL de água destilada dissolver 0,15g de CuSO4 .5H2 O e 0,6g de sal de Rochelle (tartarato duplo de sódio e potássio KNaC4 H4 O6 .4H2 O). Adicionar 30 mL de solução de NaOH 10% com agitação constante. Avolumar para 100 mL. Procedimento Separe três tubos de ensaio. No primeiro adicione 1,0 mL de água destilada, no segundo 1,0 mL de solução de glicina 10% e no terceiro 1,0 mL de solução de proteína albumina 10%. Adicione a cada tubo 1,0 mL do reativo de Biureto. Agite os tubos e observe a cor. Complexo formado entre o cobre II e peptídeos ou proteínas. Resultados: cor Intensidade da cor (++) explicação Agua glicina Proteina - albumina

3)Realização do teste de Heller

Materiais :

  • Tubo de ensaio, 2 Pipetas graduadas 10 mL
    • Ácido Nítrico concentrado- Albumina 10% Procedimento Pipetar 2,0 mL da solução de proteína 10% em um tubo de ensaio. Derramar cuidadosamente e sem agitação 1,0 mL de ácido nítrico concentrado pelas paredes do tubo. Observar o resultado obtido.