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Métodos de Estudo em Biologia Celular: Cartesiano, Instrumental e Histoquímica, Notas de estudo de Biomedicina
Os métodos de estudo utilizados em biologia celular, incluindo o método cartesiano, análise instrumental e histoquímica. Descrevemos as etapas do processamento de tecidos para observação ao microscópio, tipos de microscopia de luz e microscópio eletrônico, limites de resolução, interpretação de cortes histológicos e técnicas de histoquímica. O documento também aborda a radioautografia, topoquímica, histoquímica de carboidratos e imunocitoquímica.
Tipologia: Notas de estudo
Antes de 2010
1 / 12
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Método Cartesiano (René Descartes):
dissecação (método analítico - do
nível geral para o particular)
Evolução:
células vivas células fixadas
fracionamento celular caracterização
molecular
Análise Instrumental das Estruturas BiológicasAnálise Instrumental das Estruturas Biológicas
I- Microscópio de Luz
- Campo claro (cromóforo)
- Campo escuro
- Contraste de fase (células não coradas - vivas)
- Diferença de interferência (idem – tridimensional)
- Polarização (cromóforo)
- Fluorescência (fluoróforo) Componentes:
- Parte mecânica
- Parte óptica (lentes) -Condensadora -Objetiva -Ocular
(a) (b) (c) (d) (e) (a) Campo claro (b) Luz polarizada (c) Fluorescência (d) Contraste de fase (e) Interferência Tipos de microscopia de luz Tipos de microscopia de luz
Ampliação da Imagem Microscópio de Luz: 500 a 2.000 X Microscópio Eletrônico: 400.000 a 600.00 X Limite de Resolução da Imagem Menor distância existente entre dois pontos para que eles sejam individualizados (a) (b) (c)
- • • • • - • Limite de Resolução
- (^) olho humano: 200 μm (micrômetro)
- (^) luz verde-amarela: 0,2 μm (micrômetro)
- (^) feixe de elétrons: 0,1 – 0,5 nm (nanômetro)
Interpretação de cortes
histológicos: como
diferentes
estruturas são
observadas
ao microscópio após
secções delgadas.
Histoquímica de Carboidratos PAS ( Á cido P eriódico – Reativo de S chiff) Alcian Blue Histoquímica de Enzimas Fosfatase ácida
Imunocitoquímica
Localização de substâncias celulares capazes de estimular a formação de anticorpos DIRETA (^) INDIRETA