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Microscopia de Campo Escuro, Esquemas de Microscopia
Microscopia de campo escuro materia biologia celular
Tipologia: Esquemas
2019
1 / 17
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Microscopia de
campo escuro
Campo claro Campo escuro Campo escuro
- filtro vermelho
Tipo de contraste no campo escuro (iluminação oblíqua)
- Negativo: amostra é mais clara do que o plano de fundo, que fica escuro.
Contraste = (I
f
- I a
) x 100
I
f
Contraste com campo escuro
- Os raios não desviados são obliterados;
- Apenas raios desviados são captados pela objetiva. amostra Distância focal condensador Lente do tubo Plano da imagem ocular objetiva Raios desviados Raios não desviados
Configuração condensador objetiva Luz não coletada pela objetiva Luz difratada pela amostra amostra Anel de campo escuro Trabalha-se nos planos da imagem conoscópica Só entra luz na objetiva se houver material com índice de refração maior que o da água.
Sem amostra Com amostra
Dados técnicos: fatores que influenciam no tamanho do anel
- Posição do anel no condensador;
- (^) AN da objetiva e do condensador;
- (^) O número de campo da ocular;
- Aumento da ocular (menor aumento requer anel mais largo);
- (^) Índice de refração do meio de montagem (maior IR requer anel mais largo).
Dados técnicos do anéis Acessórios obrigatórios: opções de anéis de campo escuro.
Técnicas e contraste Amostra Técnica Contraste Transparente Campo claro 2-5% Corada Campo claro 25% Transparente Contraste de fase 15-20% Transparente Contraste diferencial de interferência 15-20% Transparente Campo escuro 60-75% Transparente Fluorescência 60-75%
Indicações
- (^) Objetos muito pequenos, cuja visualização é difícil sobre um fundo claro;
- (^) Pode permitir a detecção de estruturas muito menores que o poder de resolução do microscópio (ex.: 0.02 mm), mas isto não significa que a técnica aumenta a resolução.
- Em combinação com técnica de fluorescência; Exemplos : - bactéria; - organelas celulares,
- polímeros, cílios, flagelos, microtúbulos,
Microscopia de contraste de fase Imagens
Raiz de dente humano Preparo por desgaste Sal (cloreto de sódio)