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Organização: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa Diagramação: Regina de Siqueira Bueno
Microscopia
i. conhecendo o microscópio
A vista humana não é capaz de perceber objetos com diâmetros inferiores a um décimo
do milímetro (0,1mm ou 100μm). O microscópio óptico é utilizado para a observação
de células vivas ou mortas (preferencialmente após fixação e coloração) cujas medidas
encontram-se abaixo de 0,1mm. Entre elas temos células dos organismos eucariotos,
as bactérias, os ovos de vermes e muitas estruturas dos seres vivos.
pé ou Base
Estativa, Braço ou coluna Suporte que sustenta o tubo, a platina e os parafusos de focalização.
platina ou Mesa A lâmina com o material a ser observado é colocada sobre a platina que apresenta abertura no centro permitindo a passagem dos raios luminosos.
Tubo ou canhão
parafuso de Focalização A movimentação deste parafuso permite a focalização da lâmina.
revólver ou Tambor Nele estão inseridas as lentes objetivas que podem ser movimentadas quando o tambor é girado. Este movimento deve ocorrer sempre no sentido da objetiva de menor para a de maior aumento
Lente ocular Encaixada na extremidade superior do tubo, sua função é aumentar a imagem formada pela objetiva. O aumento fornecido pela ocular está, geralmente, gravado nela própria. Por exemplo: 5x, 8x, 10x, etc.
Lente objetiva Permite a ampliação da imagem de um objeto. Os aumentos fornecidos pelas objetivas estão gravados nas mesmas.
Fonte de luz Legenda: parte Mecânica parte Óptica
Figura 1. Microscópio óptico
Liga/Desliga a Fonte Luminosa
1
2 3
4 5
6 7
Água
Limpar bem uma lâmina e, com um conta-gotas pingar, sobre ela, uma gota de água;
Sobre o jornal colocar uma lamínula limpa; (^) Se houver bolhas de ar pressionar levemente a lamínula com uma pinça;
Levar a lâmina com a preparação ao microscópio
Observar em menor aumento (100x, sendo 10x da objetiva e 10x da ocular)
Cortar um pedaço de jornal de aproximadamente 1 cm.
Sobre a gota colocar o pedaço de jornal e esperar alguns segundos;
prEparanDo
LETras
para sErEM
oBsErvaDas ao
MicroscÓpio
1 cm
1 cm
1 gota
ii. procedimentos básicos para a correta observação microscópica
de uma preparação:
1. Ligar a fonte luminosa.
2. Colocar a lâmina com a preparação sobre a platina.
3. Olhando pelo lado externo, girar com cuidado o parafuso de focalização de forma a aproximar a
objetiva de 4x o mais perto possível da preparação. (Atenção: Não forçar o parafuso)
4. Olhando pela ocular, girar vagarosamente o parafuso de focalização no sentido inverso até obter
uma imagem nítida da preparação.
5. A seguir, girar o tambor posicionando a objetiva de 10x sobre a preparação e focalizar o material
girando MUITO lentamente o parafuso de focalização, pois o material deverá estar quase em foco.
(Atenção para não aproximar demais a objetiva da lâmina)
6. Para uma ampliação maior (objetiva de 40x), girar o canhão e posicionar a objetiva de 40x sobre
a preparação. Girar o parafuso de focalização (MUITO DEVAGAR) até que o material esteja em
foco. (Atenção para não forçar a objetiva sobre a lâmina, que pode quebrar)
iii. parâmetros importantes para operar um microscópio óptico.
1. A ampliação consiste no grau de aumento da imagem em relação ao objeto. A ampliação final do
material é obtida multiplicando a ampliação produzida pela objetiva pela ampliação obtida pela
ocular.
2. O poder de resolução corresponde à distância mínima necessária
para que dois pontos possam ser distinguidos ao microscópio.
Para o microscópio óptico essa distância é de 0,2 μm devido ao
comprimento de onda das radiações visíveis.
ii. procedimentos básicos para a correta observação microscópica
de uma preparação:
- Ligar a fonte luminosa.
- Colocar a lâmina com a preparação sobre a platina.
- Olhando pelo lado externo, girar com cuidado o parafuso de focalização de forma a aproximar a objetiva de 4x o mais perto possível da preparação. (Atenção: Não forçar o parafuso)
- Olhando pela ocular, girar vagarosamente o parafuso de focalização no sentido inverso até obter uma imagem nítida da preparação.
- A seguir, girar o tambor posicionando a objetiva de 10x sobre a preparação e focalizar o material girando MUITO lentamente o parafuso de focalização, pois o material deverá estar quase em foco. (Atenção para não aproximar demais a objetiva da lâmina)
- Para uma ampliação maior (objetiva de 40x), girar o canhão e posicionar a objetiva de 40x sobre a preparação. Girar o parafuso de focalização (MUITO DEVAGAR) até que o material esteja em foco. (Atenção para não forçar a objetiva sobre a lâmina, que pode quebrar)
iii. parâmetros importantes para operar um microscópio óptico.
- A ampliação consiste no grau de aumento da imagem em relação ao objeto. A ampliação final do material é obtida multiplicando a ampliação produzida pela objetiva pela ampliação obtida pela ocular.
- O poder de resolução corresponde à distância mínima necessária para que dois pontos possam ser distinguidos ao microscópio. Para o microscópio óptico essa distância é de 0,2 μm devido ao comprimento de onda das radiações visíveis.
prEZ aDo^ proFE
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É MUITO IMPORTANTE QUE OS ALUNOS RECEBAM
INSTRUÇÕES DE RECONHECIMENTO E MANUSEIO
DO MICROSCÓPIO ANTES DE TENTAR VISUALIZAR
QUALQUER PREPARAÇÃO CITOLÓGICA.
O IDEAL É QUE ELES TENHAM CONTATO COM A
FOTO DO MICROSCÓPIO E AS EXPLICAÇÕES DE USO
ANTES DE ENTRAREM NO LABORATÓRIO.
