relatorio de aula pratica, Notas de estudo de Biomedicina

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RELATÓRIO DE PRÁTICA

Suzana Contini

Matrícula 47627191

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS

ENSINO DIGITAL

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DATA:

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Bioquímica Humana

DADOS DO(A) ALUNO(A):

NOME: Suzana Contini MATRÍCULA: CURSO: Biomedicina POLO: Shopping Estação PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Rosilma Oliveira

ORIENTAÇÕES GERAIS:

● O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e concisa; ● O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; ● Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); ● Tamanho: 12; Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; ● Espaçamento entre linhas: simples; ● Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado).

Atenção: desenvolva as respostas de maneira resumida, mas garanta que todo o conteúdo necessário foi abordado. Para essa atividade é obrigatório a indicação de referência bibliográfica.

RELATÓRIO:

ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Técnica enzimática e química. A técnica enzimática será a partir da amilase salivar, já a técnica química será pelo ácido clorídrico. Iremos separar 3 tubos de ensaio de amostras para a técnica química e 3 tubos de ensaio para a técnica enzimática. Iremos realizar banho de gelo e banho maria para verificar se as diferentes temperaturas influenciam na reação catalítica. Utilizaremos uma solução de hidrólise química de amido 1%, 30 ml dessa solução com a utilização da proveta, colocaremos a solução em um becker e com o auxílio da pera de borracha, iniciamos a sucção de 3 ml da solução de ácido clorídrico e adicionamos junto com a solução de amido, dar uma leve mexida para homogeneizar. Técnica enzimática, utilizamos 30ml da solução de amido a 1% e 3 ml da amilase salivar. Distribuição nos 3 tubos para a hidrólise química, e nos outros 3 tubos para a hidrólise enzimática. Sendo assim, iremos submeter as soluções nos fatores térmicos, gelo e calor, para verificar as alterações na adição de lugol, se terá a quebra ou não no amido da solução.

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verificar se essas alterações de temperaturas influenciam essa reação catalítica em ambos os métodos, na hidrólise química e enzimática.

c) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose. O iodo reage com a molécula de amido onde resulta uma coloração azul escura ao interagir com a cadeia amilose. Já na cadeia de amilopectina o resultado será uma coloração vermelha, pois esta cadeia possui muitas ramificações, sua interação é menor.

d) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico. A amilase catalisa a hidrólise do amido, essa enzima hidrolítica degrada os carboidratos ingeridos em mais facilmente digeridos pelo corpo, quebrando assim a ligação glicosídica do amido. A hidrólise enzimática é seguida pelo teste de lugol, no qual observou que a cor do tubo muda de tonalidade devido a ação da enzima.

REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES)

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Iniciamos com a separação dos tubos de ensaio, um para glicose 1%, outro para frutose e água. Succionamos, 1ml de cada um desses elementos e colocamos em seus tubos identificados. Em seguida adicionamos 1 ml de ácido clorídrico com ajuda de uma pera de borracha, em cada tudo, para fazer a reação das amostras. Após homogeneizar as amostras, colocar 0,5 ml do reativo de seliwanoff em cada um dos tubos, após colocar misturas, levar os tubos para o banho maria, que é em torno de 70 graus até a visualização do resultado, que acontece uma coloração vermelha. A amostra da glicose, não houve alteração de cor, então confirma que não tem produção de furfural e nem reação com resorcinol, já a frutose teve uma mudança de coloração, apresentou a cor vermelha indicando reação do resorcinol com furfural, a amostra com água que é o controle negativo, segue inalterado, sem modificação na amostra. Materiais utilizados Equipamentos: tubos de ensaio, estante para tubo de ensaio, pera de borracha, banho de gelo, banho maria. Reagente: Glicose 1%, frutose, ácido clorídrico, reativo de seliwanoff, água destilada.

2. Responda as Perguntas:

a) Qual o princípio da técnica de Seliwanoff? O teste de Seliwanoff é um teste químico que permite distinguir aldoses de cetoses. Se um açúcar contiver um grupo cetona, é uma cetose; se, por outro lado,contiver um grupo aldeído, é uma aldose. Este teste baseia-se no princípio de que,quando aquecidas, as cetoses sofrem desidratação muito mais rapidamente que as aldoses.

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Quando o reagente é adicionado a uma solução contendo uma cetose, a cor da solução muda para vermelho (teste positivo).

b) Qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. A água destilada é pura, então vai evitar que as análises sofram qualquer tipo de interferência, foi usada como controle negativo.

c) Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrico (HCl) durante o teste de Seliwanoff? Por que o aumento da temperatura faz com que aconteça a desidratação dos carboidratos presente nas amostras com o ácido clorídrico.

d) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto à presença de aldose e cetoses. Cetoses reagem com ácidos fortes, com essa reação produzem um componente chamado de furfural, onde reage com o resorcinol, ele é um composto derivado da ureia, que está presente no reativo do salivanol. Aldose são grupos de carboidratos simples, utilizamos a glicose que é um monossacarídeo simples, não ocorre a produção do furfural e não é reagente com o resorcinol.

PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Iremos separar dois tubos de ensaio para realizar essa técnica de precipitação. Colocar 2 ml de ovoalbumina 10% com auxílio da pipeta graduada nos tubos, tubo 1 será para reação com o ácido tricloroacético 20%, tubo 2 para a reação com acetato de chumbo 10%. No tubo 1 acrescentamos 1 ml do ácido tricloroacético 20%, a precipitação é visualizada imediatamente, formando um líquido leitoso e alguns grumos, indicando que houve a precipitação da proteína pelo ácido. No tubo 2, adicione 5 gotinhas do acetato de chumbo 10%, vemos também imediatamente a mudança da solução, sua coloração fica mais branca do que inicialmente. Materiais utilizados: Equipamento: Balão volumétrico, pipeta graduada, tubos de ensaio, estante para tubos de ensaio, pipeta pasteur. Reagentes: Acetato de chumbo 10%, ácido tricloroacético 20%, ovoalbumina 10%

2. Responda as Perguntas:

a) Por que a ovoalbumina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados? A ovoalbumina com a presença de ácidos fortes ou metais pesados, acontece a sua desnaturação, que modifica a estrutura tridimensional, verificando a solubilidade da proteína, assim conseguimos notar a diferença que ocorreu na amostra.

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Camada de solvatação: esse fenômeno ocorre quando um composto iônico ou polar se dissolve em uma substância polar, sem formar uma nova substância. As moléculas do soluto são rodeadas pelo solvente.

b) Qual o princípio bioquímico do experimento? Com a adição de sal na solução, podemos mudar os íons encontrados nas proteínas, mudando o ambiente em que a proteína se encontra, havendo a precipitação,

c) Explique os resultados encontrados durante o experimento. No tubo de ensaio que contém a ovoalbumina, solução salina e água, não teve a visualização de mudança, não ocorreu a precipitação da proteína, no tubo de ensaio que não teve a água adicionada, ocorreu visualmente essa precipitação da proteína.

REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES)

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Iremos separar 3 tubos de ensaios, identificamos os tubos como, glicose, sacarose e água, adicionaremos em cada um dos tubos 5 ml do reativo de benedict com auxílio da pera de borracha. Agora, adicionaremos 5 ml das soluções em seus respectivos tubos, homogeneizando as soluções, para verificar a reação precisa-se levar ao banho maria, com uma temperatura elevada em torno de 70 graus por 5 minutos. Após isso verifica-se que no controle negativo e na sacarose, não houve nenhuma reação, mas já na solução de glicose a coloração mudou, para uma cor esverdeada, assim concluindo que houve uma redução dos íons. Materiais utilizados: equipamentos: 3 tubos de ensaio, pera de borracha, balão volumétrico maior, balão volumétrico menor, banho maria, estante para tubos de ensaio. Reagentes: Glicose 1%, monossacarídeo, solução de sacarose 1%, reativo de benedict, água.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento. O reativo de benedict, é um reagente de coloração azul, reage com açúcares que detecta nas amostras, após o aquecimento em banho maria, quando a reação é positiva a coloração ficará vermelho tijolo, quer dizer que foi detectado açúcares nas soluções.

b) Qual o conceito de “açúcares redutores”? São alguns carboidratos, que apresentam em sua estruturas as hidroxilas (OH) em um dos carbonos (C1), a hidroxila consegue reagir com diversos íons, principalmente metálico, essa reação se baseia na ligação da carbonila com o reativo de benedict, esse reativo contém íons cúpricos, que ao reagir com a carbonila, forma um composto chamado óxido cuproso, que seria uma coloração vermelho tijolo, através dessa reação é possível verificar quais são os açúcares redutores.

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c) Explique os resultados encontrados no experimento. Nas soluções de água que é o controle negativo e na sacarose, não houve nenhuma alteração nas cores indicando que não houve reação, na solução de glicose, houve uma mudança de cor, não obtivemos uma cor vermelho tijolo que seria a característica dos íons de cobre, mas a coloração ficou esverdeada indicando redução de íons na solução.

d) Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica. Testar uma amostra de urina com o reagente de Benedict é uma maneira simples de verificar a presença de glicose em pessoas suspeitas de terem esta doença. No entanto, não é um teste definitivo, pois outros açúcares redutores produzirão a mesma reação. Se a urina for positiva, outros testes terão que ser realizados para confirmar a condição. As mulheres grávidas podem ser testadas desta forma a intervalos regulares para detectar diabetes gestacional, que pode aparecer durante a gravidez em mulheres sem histórico prévio da doença.

REAÇÃO DE BIURETO

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Iremos utilizar a ovoalbumina 10%, água destilada para ser o controle negativo. Iremos colocar 1ml de água destilada com auxílio de uma pera de borracha em um tubo de ensaio, no outro tubo 1ml de ovoalbumina, após isso colocamos algumas gotas do reativo de biureto nos dois tubos, observando que no tubo que contém a água não houve modificação, já no ovoalbumina, visualiza-se uma mudança de coloração bem suave para o violeta, indicando assim a presença de proteínas nas amostras. Materiais utilizados: tubos de ensaio, estante para tubos de ensaio, pera de borracha, balão volumétrico. reagentes: ovoalbumina 10%, reativo de biureto, água destilada.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio bioquímico da reação de Biureto. O reativo de biureto, é um composto derivado da ureia, ele reage com algumas estruturas das proteínas, grupos carbonilas (CONH), formando uma cor violeta nas amostras, quando ocorre essa visualização dessa coloração violeta, indica que contém proteína na amostra.

b) Qual o tipo de ligação que ocorre entre o Biureto e as moléculas identificadas? A reação ocorre quando as proteínas interagem com o cobre do sulfato de cobre, em um ambiente alcalino, onde visualiza-se uma mudança da coloração para um violeta, assim indicando a presença de ligações peptídicas.

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amido, nos alimentos como batatinha, fécula e aveia, também observa-se uma grande quantidade de amido, pois a coloração quanto mais escura, maior é a concentração de amido.

REAÇÃO DE SAPONIFICAÇÃO

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Iniciamos com a separação dos tubos de ensaios, colocaremos com auxílio de um pera de borracha 5 ml em um tubo de ensaio a solução de hidróxido de potássio e 2 ml de triglicerídeos (óleo) de milho, levaremos por 5 minutos em banho maria, temperatura por volta de 70 graus, percebemos as duas fases aquosa e a fase do triglicerídeos, após isso verificamos que com a temperatura, essa solução fica homogênea, não há mais as fases separadas como inicialmente, caracterizado positivamente que ocorreu a hidrólise desse triglicerídeos. Em um outro tubo de ensaio, colocamos água e um pouco dessa solução de hidrólise, que se faz o sabão, ao misturar visualizamos a formação do sabão líquido e de espuma, e sua coloração mais esbranquiçada, sendo assim concluímos que a hidrólise foi positiva. Adicionamos 2 ml da solução da hidrólise com auxílio da pera de borracha em outro tubo de ensaio e adicionamos 5 gotinhas com a pipeta de 1 ml de cloreto de cálcio, homogeneizamos essa mistura, e observamos a diferença de coloração, meia amarelada, e com alguns grânulos pequenos, leve precipitação do cálcio. Quando a água tem uma consistência, com uma grande quantidade de íons , sais, cálcio, magnésio, interfere com a reação de produção de espuma e sabão, que é uma característica dos ácidos graxos. Materiais utilizados Equipamentos: dois balões volumétricos, três tubos de ensaio, estante para tubo de ensaio, pipeta de 1 ml, pera de borracha. Reagentes: óleo de milho, água destilada, solução de hidróxido de potássio, cloreto de cálcio,

2. Responda as Perguntas:

a) Explique bioquimicamente o que são ácidos graxos e triglicerídeos. Triglicerídeos, são um tipo de classificação dos lipídios, são compostos por tres ácidos graxos, ligados a uma molécula de glicerol, são uma fonte de armazenamento de gordura, nossa reserva energética, protege nossos órgãos e é isolante térmico. Quando a energia é necessária, esses triglicerídeos são quebrados em ácidos graxos e glicerol por meio da lipólise. Os ácidos graxos são moléculas compostas por uma cadeia de hidrocarbonetos e um grupo carboxila (-COOH) na extremidade, podem ser saturados (sem ligações duplas) ou insaturados (com uma ou mais ligações duplas). Os ácidos graxos são os principais componentes dos lipídios e são essenciais para a estrutura das membranas celulares, além de serem uma fonte de energia.

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b) Explique a fundamentação teórica da técnica de saponificação. A saponificação ocorre por um mecanismo de adição nucleofílica, seguida por eliminação no carbono acílico. Um parâmetro de qualidade importante para os sabões é o índice de saponificação, utilizado para mensurar quantos miligramas de base são usados para saponificar um miligrama de óleo ou gordura. A origem do processo de saponificação é incerta, porém é sabido que se iniciou pela mistura de cinzas vegetais com gordura animal.

c) Explique os resultados encontrados no experimento. Ao misturar a solução de hidrólise com a água, podemos observar a formação de espuma e o sabão, enquanto na mistura da solução de hidrólise com o cálcio notamos a precipitação do cálcio em forma de grânulos, e não há formação de espuma.

SOLUBILIDADE DOS LIPÍDIOS

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados.

Inicialmente separamos 5 tubos de ensaio identificados como: água, solução de ácido clorídrico, hidróxido de sódio, solvente éter etílico e álcool etílico, adicionar com auxílio de uma pera de borracha 3 ml de cada solução nos seus respectivos tubos. Em seguida, adicionar 1 ml de óleo em cada amostra, com auxílio da pipeta de 1 ml. Na amostra com água, ácido clorídrico e hidróxido de sódio, verifica-se que não houve homogeneização com o óleo, não se misturam, não há solubilidade dos lipídios. Já na amostra com álcool etílico, observa-se uma pequena solubilidade da solução. No tubo com o éter etílico, visualiza-se uma melhor solubilidade dos lipídeos. Materiais utilizados: Equipamentos: estante de tubo de ensaio, 5 tubos de ensaio, pipeta 1 ml, pera de borracha. Reagentes: óleo de milho, água destilada, solução ácido clorídrico, hidróxido de sódio, solvente éter etílico, álcool etílico (etanol).

2. Responda as Perguntas:

a) Explique a estrutura bioquímica dos lipídios correlacionado com sua característica de insolubilidade em soluções aquosas. Os lipídios possuem uma estrutura bioquímica que os torna insolúveis em soluções aquosas devido à presença de longas cadeias de hidrocarbonetos não polares em sua molécula. Essas cadeias consistem em carbono e hidrogênio e são hidrofóbicas, o que significa que repelem a água. Os lipídios contêm grupos funcionais, como os ésteres em triglicerídeos, que também contribuem para sua natureza hidrofóbica. Essa combinação de características faz com que os lipídios não se misturem bem com a água, resultando na sua insolubilidade.

b) Explique a fundamentação teórica da técnica de solubilidade dos lipídios.