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Nutrição
Nutrição Experimental
Bruno A. H
Relatório de Análise laboratorial
Leite fermentado- Lactobacilos
Alice Jardim Espich
Andréia Freitas
Guilherme Wendt
Maiara Carvalhaes
Canoas, 05 de Abril de 2019
INTRODUÇÃO
-Microrganismo é o nome daso a todos os organismos compostos por uma única célula e que não podem ser vistos a olho nu, sendo visiveis apenas com o auxilio de um microscópio. Logo, esta é uma classificação artificial, e sob o nome de microrganismopodem estar reunidos organismos pertencentes aos mais diversos grupos, como, por exemplo, vírus, bactérias, fungos unicelulares e protistas.
-Neste documentodescrevemos uma simples análise laboratorial realizado sobre leite fermentado, a fim de verificarmos mais a fundo a sua composição.
OBJETIVOS
Identificar e efetuar a contagem de Lactobacillus usando a técnica das diluições sucessivas e inoculação em superfície em alimentos probióticos.
- Placas de Petri;
- Alça de Drigalssky;
- Bico de Bunsen;
- Estufa microbiológica;
- Lupa;
- Contador de colônias;
- Alça de inoculação microbiológica;
- Lâminas de vidro;
- Microscópio.
SOLUÇÕES
- Água peptonada (0,1%)
- Peróxido de Hidrogênio (H202-3%)
- Etanol (95%)
MÉTODO
Primeiramente retiramos 10mL de bebida láctea usando a pipeta de 10mL para um erlenmeyer. Após, colocamos no erlenmeyer 90 mL de água peptonada (0,1%), com o auxilio de uma proveta graduada. Agitamos o frasco por 3 min. Retiramos então, 1 mL desta suspenção, com o uso de pipeta graduada de 1mL, acrescentamso em tubo de ensaio contendo 9 mL de água peptonada (0,1%) e agitamos. Diluimos até completar a quinta diluição em 10-5. Retiramos 0,1 mL (da última diluição efetuada: 10-5) e inoculamos em placa de Petri com meio de cultura: agar De Man Ragosa e Sharpe (MRS, Oxoid), espalhamos com alça de Drigalsky. Preparamos assim, duas placas e colocamos em estufa microbiológica por 24hs á 35°C.
Na semana seguinte fizemos 3 procedimentos:
- OBSERVAÇÃO ME Mos: Observamos as colônias de MO desenvolvidas nas placas de Petri usando a lupa.
- CONTAGEM DE MO: Contamos os Mos usando o contador de colônias, levando em conta as diluições efetuadas.
- ENSAIO DE CATALASE: Gotejamos uma solução de peróxido de Hidrogênio (H202-3%) sobre a colônia de Mos.
- ESFREGAÇO DOS MO OBSERVADOS E OBSERVAÇÃO EM MICROSCÓPIO: Flambaamos a alça na chame do bico de Bunsen até ficar rubra. Aguardamos o resfriamento (mantendo perto do bico de Bunsen)e retiramos a tampa ao lado dele. Coletamos uma pequena amostra com o auxilio da alça de inoculação microbiológica. Colocamos a amostra no meio da lâmina de vidro e esfregamos a amostra na lâmina. Cobrimos com Etanol (95%) por 5 minutos deixando secar o ar ao lado do bico de Bunsen. Passamos rapidamente o esfregaço na chama do bico de Bunsen, para fixar a amostra. Levamos então á observação ao microscópioo e iniciamos pelo menos aumento.
RESULTADO
Caracteristica de cultura das Céluas Tamanho: médio 2 a 5 mm Forma: Irregular Elevação: Convexa Bordas: Lobados Estrutura: Lisa Brilho: Opaco Cor: Pigmentada
Contagem de colônias
REFERÊNCIAS
Artigo: Bactérias do grupo Lactobacillus casei: caracterização, viabilidade como probióticos em alimentos e sua importância para a saúde humana. Flávia Carolina Alonso Buriti y Susana Marta Isay Saad
https://educacao.uol.com.br/disciplinas/biologia/microorganismos-introducao-aos-organismos- microscopicos.htm
https://drjulianopimentel.com.br/artigos/probioticos-beneficios-probioticos/
