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Relatório apresentado em um curso de engenharia de bioprocessos e biotecnologia, na disciplina de bioquímica, da universidade federal do paraná. Experimentos realizados para caracterizar e determinar propriedades de lipídios, incluindo a determinação do índice de acidez e a reação de saponificação. O documento inclui procedimentos para preparação de soluções químicas e observações de resultados.
Tipologia: Trabalhos
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Relatório apresentado no curso de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia, da aula prática da disciplina de Bioquímica, na Universidade Federal do Paraná, setor Palotina. Professor(a): Marise Fonseca. PALOTINA 2021
Os lipídios formam um conjunto muito abrangente de moléculas orgânicas, que são objeto de experimentos neste relatório. São essenciais para a alimentação humana e podem ser extraídos de diversas fontes, como óleo, ovos, leite e seus derivados, milho, soja, etc. Os lipídios são compostos que se caracterizam por seu alto grau de insolubilidade em água. No entanto, eles são solúveis em solventes não polares, como álcoois, éteres, benzeno, acetona e semelhantes. Eles representam um grupo muito diverso em termos de química e função. Por exemplo, existem lipídios, transportadores de enzimas, emulsificantes, hormônios e mensageiros intracelulares que têm funções estruturais. A função de cada tipo está diretamente relacionada à sua estrutura química e propriedades físicas. A composição dos lipídios é composta principalmente de hidrogênio, carbono e oxigênio; outros elementos, como o fósforo, também podem fazer parte dela. Lipídios podem ser separados em três grupos, de acordo com sua função: Lipídios de armazenamento: Como forma de armazenar energia nos organismos vivos, são utilizadas gorduras e óleos, ambos derivados de ácidos graxos. Os triacilgliceróis são lipídios compostos por ácidos graxos. Eles são compostos de três ácidos graxos, cada um dos quais forma uma ligação éster com a molécula de glicerol. Eles podem ser simples, contendo três ácidos graxos iguais, ou mistos, contendo dois ou três ácidos diferentes. A maioria deles aparece naturalmente de forma mista.os triacilgliceróis são armazenados em altas quantidades nos adipócitos. E em vários tipos de plantas são armazenados como óleos das sementes Segue exemplo da formação de um triglicerídeo:
concentração do íon hidrogênio, ou seja, o alimento está em processo de deterioração , tornando o produto mais ácido por causa desses íons de hidrogênio. Na parte prática foram utilizados : Soluções Vidraria e Instrumental Solução de éter etílico e etanol 95%, na proporção de 2: Três erlenmeyers de 25 mL Solução indicadora de fenolftaleína 1% ** Bureta de 25 mL Solução de hidróxido de sódio (NaOH) 0,1 M padronizado Suporte para bureta Óleo (de soja ou qualquer outro tipo) * Preparo da solução indicadora de fenolftaleína: dissolver 0,1 g de fenolftaleína em 10 mL de etanol 95%. O procedimento foi realizado nas seguintes etapas: 1- Pesou-se 28g de óleo em triplicata dentro dos erlenmeyers 2- Cada amostra foi inserido 50 mL da solução de éter etílico e etanol 3- Adicionado duas gotas de fenolftaleína 4- Realizado a titulação com NaOH 1M até o aparecimento da coloração rósea. 5- Resultado Não foi possível calcular o índice de acidez devido a falta de informação fornecida. Saponificação A saponificação é a reação de hidrólise alcalina de ácidos graxos (componentes do óleo ou da gordura), resultando na formação do glicerol e de um sal desse ácido graxo, denominado "sabão".
óleo/gordura + base → glicerol + sabão Por ser formado por íons, a extremidade carboxila do sabão é altamente polar, portanto, tende a se dissolver na água. Podemos dizer que essa parte da molécula é hidrofílica. Por outro lado, a longa cadeia de carbono tem características não polares óbvias e é chamada de parte hidrofóbica da molécula. Essas moléculas que possuem propriedades hidrofílicas e hidrofóbicas, polares e apolares são chamadas de moléculas anfóteras. Na parte prática foram utilizados : Parte I - Reação de Saponificação Soluções Vidraria e Instrumental Solução alcoólica de NaOH 10% * Béquer de 50 mL Água destilada (^) Pipeta de 2 mL Óleo de Soja Pipeta de 10 mL Proveta de 25 mL Preparo da solução alcoólica de NaOH a 10%: dissolver 100g de NaOH em uma quantidade mínima de água destilada. Em seguida, adicionar etanol (CH3CH2OH) 95% até completar o volume de 100ml. O procedimento foi realizado nas seguintes etapas: 1 - Adicionado ao béquer de 70 mL, 2 mL de Soja 2 - Adicionado ao béquer 10 mL de NaOH 10% 3 - Aquecido em banho-maria a 80ºC até que a fase líquida desaparece 4 - Após sair do banho-maria já havia o precipitado de sabão
meio aquoso assume o lugar do sódio que, em seguida, é capturado pelo cloro. R-COONa + HCl → R-COOH + NaC ● Tubo 3: Pode -se observar precipitação, pois há formação de sal insolúvel. A adição de sal de cálcio em sabão favorece uma reação de substituição de íons sódio, existentes na molécula de sabão, pelos íons de Cálcio, existentes na solução aquosa. R-COONa + CaCl 2 → [R-COO-^ ]Ca++^ + 2 NaCl Os sabões constituídos por sais de sódio (Na+) e de potássio (K+) são solúveis. Em contrapartida, os sais de cálcio (Ca2+) e magnésio (Mg2+), formados a partir da reação do lipídio com Ca(OH) 2 e Mg(OH) 2 , respectivamente, são insolúveis e precipitam. Parte III - Estabilização de uma emulsão Soluções Vidraria e Instrumental Óleo de soja 02 Tubos de ensaio Solução de sabão preparada na parte I (^) Pipeta de 1 mL Água destilada Pipeta de 10 mL O procedimento foi realizado nas seguintes etapas: 1 - Adicionado 3 mL de óleo de soja nos tubos 2 - Adicionado às soluções nos tubos: ● Tubo 1: Adicionado 5 mL de água destilada
● Tubo 2: Adicionado 5 mL da solução de sabão 3 - Agitação dos tubos por inversão 4 - Deixar em repouso os tubos 5 - Resultado no tubo de ensaio 1 que foi colocado água + óleo observou-se que as fases não se misturam devido a homofobilidade do óleo de soja. Com a adição do sabão no tubo de ensaio 2 que trabalha como um emulsificante envolvendo a molécula de gordura tornando sua estrutura externa homofílica ele se torna assim compatível com a água assim tento apenas uma fase. Pesquisa de insaturações: adição de iodo O índice de iodo está relacionado às reações de halogenação que parte de um princípio de que cada dupla ligação presente em ácidos graxos insaturados pode facilmente reagir com dois átomos de halogênio, produzindo derivados trans-saturados. Quando é utilizado o iodo como reagente halogenado, o número de gramas de iodo absorvido por 100 gramas de lipídios é chamado de número, índice ou valor de iodo. Este valor é usado como uma estimativa do grau de insaturação dos óleos e gorduras. iodo liga-se às duplas ligações, essa reação pode ser visualizada adicionando amido como indicador d e presença d e iodo livre em solução, o iodo ligado ao ácido graxo é incapaz de reagir com o amido. Este teste deve ser realizado com muito cuidado, pois uma adição de uma quantidade de iodo que ultrapasse a capacidade de fixação do ácido graxo levará a produção de iodo livre em solução, causando assim um falso resultado. O índice de iodo está relacionado à reação de halogenação, que assume que cada ligação dupla em um ácido graxo insaturado pode facilmente reagir com dois átomos de halogênio para produzir um derivado saturado trans. Quando o iodo é usado como agente halogenante, o número de gramas de iodo absorvido por 100 gramas de lipídio é chamado de valor, índice ou valor de iodo. Este valor é usado
O procedimento foi realizado nas seguintes etapas: 1- Numerados os tubos de ensaio 2- Nos tubos foram inseridos ● Tubo 1: 5 mL de Óleo de Soja ● Tubo 2: 5 mL de Margarina Fundida 3- Adicionado 10 gotas de lugol em ambos os tubos 4- Levar a banho-maria até o desaparecimento da coloração do lugol 5- Após ferver pode se observar que o tubo 2 as fases ficaram dividas, tubo 1 não ocorreu separação das fases. 6- Após o resfriamento dos tubos foi adicionado 3 gotas da solução de amido 1% em ambos os tubos. 7- Resultados: tubo 1 contendo o óleo de soja apresentou uma quantidade maior de saturações que as gorduras, justificando as diferenças em suas propriedades físicas e químicas e a coloração escura com a adição de amido 1%. Visto que a margarina no tubo 2 não apresentou modificação na reação, entende-se que é um produto que apresenta gorduras insaturadas. ,
VILELLA, Gabriel. Reação de Saponificação. Disponível em: http://quimicasemsegredos.com/reacao-de-saponificacao/. Acesso em: 10/06/
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_lipidios/indice_acidez.htm. Acesso em 10/06/ SOUZA, K. A. F. D.; NEVES, V. A. Experimentos de Bioquímica. Disponível em: http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/introducao_lipidios/introducao_lipidio s.htm. Acesso em: 10/06/ LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princípios de Bioquímica. 2. ed. São Paulo: Sarvier, 2000.
