Toxoplasmose, Manuais, Projetos, Pesquisas de Biomedicina

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Lúcia Camilla Brito

Sandra da Silva Silveira

Introdução

Aspectos parasitológicos  (^) Agente etiológico  Toxoplasma gondii ;  (^) Infecta principalmente aves e mamíferos – ser humano (níveis elevados de prevalência);  (^) Contágio:

• Ingestão de oocistos;
• Consumo de alimentos de origem animal;
• Transplante de órgãos;
• Transmissão placentária;

Diagnóstico Laboratorial I – Pesquisa de parasitas ou de seus componentes

• Isolamento do toxoplasma
• Pesquisa de antígenos
• Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) II – Testes sorológicos
• ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)
• Teste de avidez de anticorpos IgG
• Anticorpos IgM
• Teste de hemaglutinação
• Anticorpos IgA e IgE
• Outros testes (aglutinação direta, aglutinação do látex...) III – Pesquisa de imunidade mediada por células

Pesquisa de Parasitas ou de Seus Componentes Isolamento do Toxoplasma  (^) Inoculação em camundongo Sangue do paciente ou Inoculação intraperitoneal em Sedimento do centrifugado camundongos Do liq. cefalorraquidiano, Liq. Amniótico, LBA Soroconversão do animal e presença de taquizoítas; microcistos no cérebro

Pesquisa de Antígenos  (^) Material antigênico do toxoplasma, bem como complexos imunes de antígenos parasitários, podem ser detectados no soro na fase aguda da toxoplasmose;  (^) Pouco valor diagnóstico pela transitoriedade e inconstância da antigenemia;  (^) Pesquisa de antígenos na urina tem sido referida por boa sensibilidade na neurotoxoplasmose.

Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)  (^) Dispendioso e exige controle rigoroso;  (^) Identificação do toxoplasma  amplificação de vários segmentos do DNA, correspondentes a diferentes genes, como P30, PRG1, B1 ou DNA ribossomal  preferidos pela maior sensibilidade;  (^) A pesquisa pode ser realizada:

• (^) Líquido amniótico;
• (^) Sangue de cordocentese de recém-nascidos;
• (^) Sangue venoso;
• (^) Material de biópsia cerebral;
• (^) Líquido cefalorraquidiano;
• (^) Material de lavagem bronco-alveolar;  (^) Um resultado positivo não permite distinguir entre taquizoítos e formas císticas.

Teste de Avidez de Anticorpos IgG  (^) A afinidade ou avidez com que os anticorpos IgG ligam-se a seus respectivos antígenos pode ser avaliada pela maior ou menor facilidade de quebra dessa ligação; ELISA-Uréia Incubação do soro na placa Lavagem com uréia Incubação com conjugado Enzimático Baixa avidez: do título com relação ao antígeno original obtido sem o tratamento pela uréia.

Anticorpos IgM  (^) A pesquisa de anticorpos IgM pelas técnicas indiretas, com conjugados fluorescentes ou enzimáticos, está sujeita a resultados falso- positivos, pela interferência de FR presentes no soro;  (^) Assim, quando no teste anticorpos IgG antitoxoplasma fixam-se ao antígenos do parasita, o FR por sua vez fixa-se aos IgG e irá reagir com o conjugado anti-IgM;  (^) A melhor solução é remover previamente as IgGs dos soros, por precipitação com um soro anti-IgG.

Teste de Hemaglutinação  (^) Atualmente são usadas hemácias de aves recobertas por antígenos completos do parasita, aglutináveis por anticorpo tanto IgG como IgM – teste altamente sensível;  (^) Antes  Hemácias de carneiro; A diluições do soro, em cavidades de placas plásticas, adicionam-se as hemácias; Após 1 hora mostram-se aglutinadas para os soros reagentes; Os títulos são expressos pela maior diluição reagente. http://pathmicro.med.sc.edu

Anticorpos IgA e IgE  Para a pesquisa de anticorpos IgA e IgE são mais utilizadas as técnicas imunoenzimáticas, tanto a indireta quanto a de captura;

• IgA e IgE  Marcadores de infecções recentes, inclusive congênitas. http://

 (^) Perfil sorológico de infecção recente  (^) Presença de vários Acs;  (^) IgG de baixa afinidade.  Perfil sorológico de transição  (^) IgG: Níveis elevados e avidez crescente;  (^) IgA e IgE: Ausentes;  (^) IgM: ocasionalmente presentes.

 (^) Perfil sorológico de infecção latente ou crônica  (^) Em geral se mantém por toda a vida;  (^) IgG: Títulos baixos e alta avidez;  (^) IgA e IgE: ausentes;  (^) IgM: Ocasionalmente podem haver resíduos.  A transição do perfil de transição para o latente vai depender do sistema imunitário do paciente.

 Diagnóstico sorológico;  Primoinfecção: constatação da soroconversão e perfil sorológico compatível com infecção recente (presença de IgM, IgA, IgE e IgG de baixa avidez);  Detecção sorológica importante no indivíduo enfermo e principalmente na gestante.

 (^) Somente há transmissão fetal quando a primoinfecção ocorre na vigência da gestação;  A maioria dos casos é assintomática, o que não diminui os riscos de transmissão;  Baixos índices de toxoplasmose congênita quando a infecção se dá pouco antes da concepção.