Diagnóstico Sorológico de Doenças Negligenciadas: Diagnóstico da Doença de Chagas, Trabalhos de Biomedicina

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7º período de Biomedicina Alunos participantes: Eduardo Marcell 7º período de Biomedicina Alunos participantes: Eduardo Marcell

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DE DOENÇAS

NEGLIGENCIADAS

INTRODUÇÃO

As doenças negligenciadas são um grupo de enfermidades tropicais, endêmicas entre as populações pobres da África, Ásia e América Latina. Não recebem grande apoio financeiro nem enfoque em pesquisas científicas. Juntas, essas doenças causam entre 500.000 e 1 milhão de óbitos anualmente. As doenças negligenciadas incluem, em ordem de maior incidência: ascaridíase, tricuríase, ancilostomíase, esquistossomose, elefantíase,tracoma, leishmaniose, doença de Chagas, hanseníase, doença do sono , dracunculose e úlcera de Buruli. Outras doenças negligenciadas têm grande incidência em locais específicos como a Dengue no Brasil.

DISTRIBUIÇÃO MUNDIAL:

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

Atinge 18 estados brasileiros Atinge 18 estados brasileiros 2200 municípios na área de risco 2200 municípios na área de risco Pela migração de populações surgiu o risco de transmissão por transfusões dos EUA Pela migração de populações surgiu o risco de transmissão por transfusões dos EUA A região amazônica está excluída da área de risco A região amazônica está excluída da área de risco Em 20 dos 35 países da América há transmissão da Doença de Chagas Em 20 dos 35 países da América há transmissão da Doença de Chagas

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

 (^) Pesquisa de Ac. contra Trypanossoma cruzi  (^) Auxilia no diagnóstico quando a sintomatologia e o exame parasitológico apresentarem limitações. Realizar sorologia para Chagas^ Realizar sorologia para Chagas Exame parasitológico confronta sintomatologia Exame parasitológico confronta sintomatologia Realizar exame parasitológico^ Realizar exame parasitológico Sintomatologia suspeita de Doença de Chagas Sintomatologia suspeita de Doença de Chagas

FASE AGUDA:

Principalmente quando associada à alterações clínicas e epidemiológicas sugestivas Principalmente quando associada à alterações clínicas e epidemiológicas sugestivas

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

Ac Anti-Trypanossoma cruzi da classe IgM Ac Anti-Trypanossoma cruzi da classe IgM Indicativo de FASE AGUDA Indicativo de FASE AGUDA

 (^) Nesta fase da doença o diagnóstico parasitológico direto torna-se comprometido em virtude da ausência de parasitemia.  (^) Os métodos parasitológicos indiretos (xenodiagnóstico – ou hemocultivo) que podem ser utilizados, apresentam baixa sensibilidade (20-50%).  (^) Assim o diagnóstico da fase crônica é essencialmente sorológico.  (^) Deve-se utilizar pelo menos 1 teste de alta sensibilidade (ELISA com Ag total ou IFI)  (^) E um teste de alta especificidade (ELISA, utilizando antígenos recombinantes específicos do T. cruzi )  (^) Sugere-se não utilizar testes rápidos  (^) Fixação do complemento deve ser descartada

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

FASE CRÔNICA:

FASE CRÔNICA:

Principalmente quando associada à alterações clínicas e epidemiológicas sugestivas Principalmente quando associada à alterações clínicas e epidemiológicas sugestivas

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

Ac Anti-Trypanossoma cruzi da classe IgG Ac Anti-Trypanossoma cruzi da classe IgG Indicativo de FASE CRÔNICA Indicativo de FASE CRÔNICA

TRANSMISSÃO VERTICAL:

 (^) Não se recomenda pesquisa de Ac das classes IgM de infecção congênita, pois há um grande número de falsos negativos.  (^) Mães portadoras de Doença de Chagas terão filhos com anticorpos anti-T. cruzi (IgG), mesmo não infectados.  (^) Assim é necessário, para confirmação, nova detecção de IgG realizada entre o 6º e o 9º mês após o nascimento, quando desaparecem os anticorpos maternos de transmissão passiva.  (^) A detecção de IgM e IgA anti- T.cruzi não é recomendada, pois além de não ser positiva em todos os casos, apresenta falsos positivos em recém-nascidos de mães infectadas que posteriormente soro-revertem.

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO

DA DOENÇA DE CHAGAS

 (^) São vários os métodos utilizados para o diagnóstico da doença de Chagas, os mais utilizados são:

TESTES SOROLÓGICOS CONVENCIONAIS

Deve ser usado apenas como um segundo teste de triagem Deve ser usado apenas como um segundo teste de triagem Metodologia de escolha em casos individuais (não doadores) Metodologia de escolha em casos individuais (não doadores) Metodologia de escolha para triagem sorológica de doadores de sangue Metodologia de escolha para triagem sorológica de doadores de sangue

HEMAGLUTINAÇÃO INDIRETA

PARA DOENÇA DE CHAGAS

 (^) Identifica e quantifica Ac específicos ao T. cruzi no soro humano.  (^) O antígeno do T. cruzi é adsorvido em hemácia. PROCEDIMENTOS:

IMUNOFLUORESCÊNCIA

PARA DOENÇA DE CHAGAS

 (^) Os anticorpos Anti-Trypanosoma cruzi presentes no soro ligam-se ao antígeno fixado na lâmina e são revelados por um conjugado marcado com Isotiocianato de Fluoresceína. PROCEDIMENTOS:

LEITURA:

Parasitas^ Parasitas^ Amostra positiva Amostra positiva ConjugadoConjugado Fluorescência^ Fluorescência Complexo^ Complexo Luz azul e ultravioleta^ Luz azul e ultravioleta RESULTADO POSITIVO

RESULTADO

POSITIVO

IMUNOFLUORESCÊNCIA

PARA DOENÇA DE CHAGAS

Tripanossoma cruzi Tripanossoma cruzi

ELISA PARA DOENÇA DE CHAGAS

 (^) Os anticorpos Anti-Trypanosoma cruzi presentes no soro ligam-se ao antígeno fixado na placa de ELISA e são revelados por um conjugado marcado com enzima perozidase PROCEDIMENTOS: HÁ LEITORAS DE ELISA QUE REALIZAM TODO ESSE PROCESSO HÁ LEITORAS DE ELISA QUE REALIZAM TODO ESSE PROCESSO

ELISA PARA DOENÇA DE CHAGAS

 (^) Alguns kits relatam 100% de especificidade e sensibilidade.  (^) Os testes de qualidade não avaliam a presença de outros parasitas

DESEMPRENHO DO TESTE: