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Biocel Tema 1, Ejercicios de Biología Celular

Universidad de Murcia (UM)Biología Celular

Asignatura: Biología celular, Profesor: , Carrera: Biología, Universidad: UMU

Tipo: Ejercicios

2017/2018

Subido el 28/06/2018

olivercolchero
olivercolchero 🇪🇸

3.7

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12 documentos

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TEMA 1. Métodos de estudio de células y tejidos
• Introducción a la Biología Celular
• Procesado de las muestras
• Técnicas rutinarias o especiales de estudio
• El microscopio como herramienta de estudio
• Citometría de flujo
• Cultivo de células y tejidos
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¡Descarga Biocel Tema 1 y más Ejercicios en PDF de Biología Celular solo en Docsity!

TEMA 1. Métodos de estudio de células y tejidos

- Introducción a la Biología Celular - Procesado de las muestras **- Técnicas rutinarias o especiales de estudio

  • El microscopio como herramienta de estudio
  • Citometría de flujo
  • Cultivo de células y tejidos**

- Estudio o conocimiento de la célula

- Evolución junto al microscopio

- Reseñas históricas

- Invención por Jansen (1590) o Galileo Galilei (1610)

- 1665. Robert Hooke. Término de célula

- 1674. Microscopio simple de Leeuwenhoek. Células libres, núcleos, bacterias…

- Siglos XVIII y XIX. Mejora lentes y microscopios

. 1838-1839. Schleiden y Schwann

. Todos los organismos están compuestos de células

. Célula como unidad estructural y funcional

. 1855. Virchow

. Toda célula proviene de otra

TEORÍA CELULAR

- 1934. Microscopio contraste de fases por Zernike

- 1942. MET por Max Knoll y Ernst Ruska

- 1957. Microscopio Barrido Confocal por Minsky

- 1965. MEB

- 1969. Citómetro de flujo por Gödhe

Introducción

  • Cuestiones iniciales . ¿Dónde quiero estudiar? . ¿Qué quiero estudiar? . ¿Qué técnicas necesito? . ¿De qué instrumental dispongo?

.¿Cual es mi capacidad económica y técnica?

  • Técnicas a utilizar . Microscópicas. Luz, fluorescencia, electrónica. Específicas.. . Citometría de flujo . Cultivos celulares . Transfecciones . ELISA, PCR, Western blot…..
  • Aplicaciones . Estudios de estructura y ultraestructura . Estudios de localización celular y tisular . Estudios de función celular, distribución, fisiología… . Localización e interacción molecular y celular

Introducción

¿Cómo puedo saber dónde se localiza exactamente un compuesto/función celular?

¿Puedo ver si dos moléculas interactúan? Ej. Receptor-ligando

Queremos saber dónde se expresa un gen/proteína exactamente.

Cómo podemos producir una vacuna.

Me han realizado una biopsia para ver si tengo cáncer.

Queremos establecer un modelo in vitro para estudiar un proceso celular.

Cómo puedo estudiar si un nuevo producto químico es contaminante para el medio

ambiente o tóxico para su uso en el hombre.

Introducción

Microscopía óptica de campo claro Microscopios Citómetro de flujo Otros

Microscopía óptica campo oscuro

Microscopía de contraste de fases (MCF) Microscopios Citómetro de flujo Otros

Microscopía de Nomarski (DIC= contraste por interferencia diferencial)

Microscopía de fluorescencia/epifluorescencia (MF)

  • Fluorescencia: Fluorocromos, fluoróforos
  • Factores a considerar . Apagado o “ quenching ” . Blanqueamiento o “ photobleacing ”

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Microscopía láser de barrido confocal (MBC)

  • Usa rayo láser en lugar de luz
  • El láser barre punto a punto la muestra y en profundidad (eje Z)

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Microscopía electrónica de barrido (MEB)

  • Permite estudiar la superficie. Resolución 10 nm
  • Basado en haces de electrones retrodispersados

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Citometría de flujo

  • Equipo que sirve para analizar células en suspensión
  • Determina tamaño, complejidad y fluorescencia
  • Analiza miles de células /min. Gran valor estadístico

Microscopios Citómetro de flujo Otros

DM. Paso corto

LP. Paso largo

. 2 láser . 4 fluorocromos

Sample

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Citometría de flujo

. 3 láser . 6 fluorocromos

SP. Paso corto

LP. Paso largo

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Citometría de flujo

  • Análisis de datos . Regiones, marcadores, cuadrantes, overlay , cinéticas, etc

FSC

SSC

FSC

SSC

Lymphocytes

Monocytes

Granulocytes

RBCs, Debris, Dead Cells

FITC-labelled

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Citometría de flujo

  • Factores importantes a tener en cuenta

. SÓLO células en suspensión

. Los valores son SIEMPRE relativos.

. Autofluorescencia

. No permite localizar una molécula en la célula

. Compensación de fluorescencia

Microscopios Citómetro de flujo Otros

Citometría de flujo