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Bioquímica-Práctica
Informe N° 1: “Espectrofotometría”
Autores
Grupo
23A
Docente
Dr. HECTOR FILAMIR YAIPEN GONZALES Chiclayo – Perú
IV Ciclo de Estudios Semestre Académico 2020-I
Alva Moquillaza Valeria Romina DNI: 76344872 Código de matrícula: 2018219746 Campos Rivera Joaquín DNI: 70454655 Código de matrícula: 2014440208 Carrero Barturen Crhis Yanina DNI: 73762090 Código de matrícula: 2018131328 Casiano Celis Ana Valeria DNI: 75533350 Código de matrícula: 2018113979 Chirinos Tuesta Nikole Emperatriz DNI: 71574063 Código de matrícula: 2018219841 Chiroque Arias, Jhoan A. DNI : 73315455 Código de matrícula: 2018219855. Cieza Dávila Kelvin E. DNI: 72224668 Código de matrícula: 2018160867 Dávila Llactahuaccha Yanina, L DNI: 71429582 Código de matrícula: 2019152861 Díaz Hernández Arminda Lizeett DNI: 71540068 Código de matrícula: 2018217958 Díaz Ledesma Luz Antonella DNI: 75003762 Código de matrícula: 2019152914
I. OBJETIVOS
Especificar los fundamentos de la técnica espectrofotométrica y sus aplicaciones. Realizar la curva de calibración en base a los valores obtenidos. Determinar cuantitativamente la concentración de la solución problema.
Donde: A = Absorbencia ε = Coeficiente molar de extinción d = Recorrido (en cm) c = Concentración molar En química analítica es importante la medida de la cantidad de luz absorbida por una sustancia a una determinada longitud de onda, es decir a través de la aplicación de la ley de Lambert podemos relacionar dicha absorción de radiación con su concentración. Su uso debido a ello permite: Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto utilizando las fórmulas. Identificar unidades estructurales específicas, ya que estas tienen distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomerías). Determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base. 3 - ¿Cuál es la diferencia entre los conceptos de transmitancia y absorbancia? Los dos, son aspectos del mismo fenómeno y los vemos cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo, pero la diferencia está en que la diferencia es que la transmitancia (T) refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una determinada longitud de onda. Y la hallamos así:
- I: Luz transmitida
- Io: Luz incidente. Mientras que la absorbancia (A) , sucede cuando una parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra fracción de ese haz de luz atravesará el cuerpo, según su transmitancia. Mantiene relación inversa con la concentración. Y lo calculamos así:
- I: Luz transmitida
- Io: Luz incidente. A mayor cantidad de luz absorbida, mayor será la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz será transmitida por dicho cuerpo. 4. Según su análisis, ¿cuáles serían las aplicaciones clínicas de la espectrofotometría? Brindar al menos 2 ejemplos: Las aplicaciones clínicas de la espectrofotometría son: La identificación de unidades estructurales específicas, ya que estas tienen distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomerías) Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación. Método auxiliar diagnóstico de aplicación en medicina. Ayudar en la determinación de estructuras moleculares. Determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos. Ejemplos:
- La espectroscopia de infrarrojo cercano o NIRS (near-infrared spectroscopy) es un método óptico de diagnóstico no invasivo que utiliza la absorción o reflexión de determinada longitud de onda producida por los diferentes grupos funcionales que se encuentran en los tejidos. Permite conocer diversas variables fisiológicas en tiempo real como la saturación de oxígeno y el índice de oxigenación en cualquier tejido; esto Permite una aplicación directa en medicina al ser útil en la identificación de procesos de isquemia y en la medición de flujos sanguíneos para diversas especialidades médicas, así como para la detección de tumores y la determinación de la vascularización de extremidades, entre otras.
- Espectrofotometría de derivada y su potencial de aplicación al análisis y valoración de mezclas binarias de benzodiazepinas en medios químicos, biológicos y formas farmacéuticas diversas. Esta técnica es obtenida por
y = 3E-05x - 7E- 22 0. R² = 1 0
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0. Absorbancia Concentración
Curva de calibración
a. Procesamiento de datos La presente tabla se obtuvo de los datos procesados tanto en la lectura como en la presentación del campus, es así que para la obtención del grafico se tuvo que determinar la concentración de azul de metileno por muestras de acuerdo al volumen, por ejemplo, en 1 ml de la muestra madre, la concentración de azul de metileno es de 0.01 mg. Por otro lado, la absorbancia se determinó de un ejemplo dado en la clase grabada del campus, con la diferencia de que fue convertida de mmol/L a mol/ml, obteniendo de esta manera una absorbancia de 0.00003, la cual fue multiplicada con la finalidad de saber cuál es la absorbancia de cada muestra obtenida de la muestra madre, es por eso que se da a conocer que un 1 ml la muestra madre, contiene 0.01 mg de azul de metileno, teniendo una absorbancia de 0.0000003, dicho caso sucede en todas las muestras subsiguientes. muestra madre 10 mg/1000 ml concentración mg de azul metileno mg/ml Abs/0. m/ml CC real 0. muestra 1 1 ml 0.01 0.0000003 0. muestra 2 2 ml 0.02 0.0000006 0. muestra 3 3 ml 0.03 0.0000009 0. muestra 4 4 ml 0.04 0.0000012 0. muestra 5 5 ml 0.05 0.0000015 0.
III. CONCLUSIONES:
Se puede concluir que los fundamentos de la técnica espectrofotométrica se deben a la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UVvisible. Pues las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen de la estructura atómica y de las condiciones del medio. Por otro lado, una de sus aplicaciones en la medicina esta que se usa para la detección y cuantificación de la oxihemoglobina y la desoxihemoglobina y así poder el grado de hipoxia que puede presentar un paciente. Por otro lado, podemos concluir que la determinación de la curva de calibración se hizo mediante valores obtenidos en base a un ejemplo y a la explicada por uno de nuestros docentes. Se determinó la concentración cuantitativamente de la solución problema de cada muestra, así como la capacidad de absorbancia que puede tener cada muestra, es así que los datos obtenidos se utilizaron para la determinación de la gráfica de puntos, la cual nos permite tener una predicción de cuanto de absorbancia puede tener determinado volumen de la muestra madre.
