¡Descarga Practica Microscopia y más Ejercicios en PDF de Biología Celular y Molecular solo en Docsity!
ATENCIÓ! Llegiu el primer full i abans de realitzar la pràctica, responeu les preguntes
d’aquest full i la resta de fulls que estan en color verd..
Introducció
EL MICROSCOPI (mikros, = petit , skopein, = examinar ).
L'origen i evolució de la Biologia actual estan estretament relacionats amb el descobriment del microscopi i la seva evolució tecnològica. La propietat que tenen les lents d'augmentar les imatges es coneguda des del segle XII i és a partir del segle XIII que comencen a utilitzar-se les lents per a corregir defectes de visió. Es creu que Galileo (segle XVI) va ser el primer en utilitzar lents d'augment per a observar els éssers vius, aquesta iniciativa de Galileo va ésser continuada pels italians Cesi i Stelluti. El primer microscopi compost el van construir els germans Hans i Zacharias Janssen entre 1590 i
Robert Hooke (1635-1702) és considerat el primer gran microscopista. Les seves observacions, realitzades amb un microscopi simple de 50 augments, van quedar reflectides en la seva obra Micrographia (1665), en la qual Hooke descriu les seves observacions microscòpiques sobre l'estructura del suro i utilitza per primera vegada la paraula cèlꞏlula per a referir-se a les cavitats ocupades per les cèlꞏlules vegetals. Els primers microscopis eren molt rudimentaris i les seves lents tenien unes aberracions esfèriques i cromàtiques desmesurades, essent les seves imatges més imperfectes que les del microscopi simple. Malgrat les seves deficiències, a partir del segle XVII, el microscopi es va convertir en una eina familiar i habitual dels laboratoris d'investigació biològica. La qualitat de les imatges microscòpiques va experimentar una sorprenent millora durant el segle XIX amb la incorporació del diafragma i la utilització de filtres i d'objectius acromàtics. Totes aquestes innovacions tecnològiques van permetre corregir les aberracions esfèriques i cromàtiques. L'evolució tecnològica del microscopi i el desenvolupament d'una metodologia addicional van influir de forma decisiva en el naixement d'una nova branca de la Biologia, anomenada Citologia (Kytos, = cèlꞏlula, logos, = ciència).
1) Perquè hi ha una relació tan estreta entre el descobriment del microscopi i el naixement de la Biologia Celꞏlular com a ciència amb entitat pròpia? ........................................................................................................................................................
........................................................................................................................................................ ........................................................................................................................................................ Llegiu dins l’apartat de la cèlꞏlula a http://lacelula.udl.es les pagines:historia i el microscopi.
EL MICROSCOPI COMPOST.
En el microscopi que utilitzarem a les classes pràctiques podem distingir els següents elements: De suport: Peu, platina, pinces per a subjectar els porta-objectes. Mecànics: Tub, tambor d’objectius, cargols d’enfocament (micromètric i macromètric). Òptics : Tub òptic, ocular, objectius, diafragma, condensador, font lluminosa. D’ilꞏluminació: Font lluminosa, filtres, condensador, diafragma.
Els microscopis poden tenir una gran quantitat d'accessoris més o menys sofisticats que faciliten la seva manipulació. Generalment, però, aquests accessoris no influeixen en la qualitat de les imatges ja que la qualitat d'un microscopi depèn fonamentalment de les característiques del seus elements òptics i en especial de la qualitat dels seus elements òptics ( objectius i oculars).
2) Quina és la principal diferència entre un microscopi simple i un de compost? ...............
..........................................................................................................................................................
3) Citeu un microscopi simple i un altre de compost ................................................................
.........................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................
Pràctica de laboratori 1 Estructura i Funció Celꞏlular 2018- El Microscopi Nom: Grup:
4) Identifiqueu sobre la imatge els elements d’aquest microscopi.
Els objectius.
Són lents o sistemes de lents acoblades al tambor porta-objectius del tub òptic que es comporten com un microscopi simple. Aquestes lents són convergents. Originalment els objectius estaven formats per una sola lent, cosa que provocava grans aberracions cromàtiques. Actualment l'objectiu consta d'un grup de lents (habitualment tenen 3 lents i els objectius de gran potència en tenen 4, Figura1), les quals es comporten com una sola lent. La combinació de lents permet corregir les aberracions cromàtiques i augmentar la distància focal.
El Poder de Resolució (PR ) és la capacitat que té un objectiu per definir dos punts molt pròxims com a dos imatges separades. La Resolució ( R ) es l’inversa del PR i representa la distància entre aquests dos punts que apareixen com a elements individuals. Així doncs, quan més petit és el valor de R més gran és el PR de un microscopi. L’ R d’un microscopi s’obté amb la següent equació: R = 0,61 / n sen u (O.N. = n. sen u) = longitud d'ona.
Taula 2. Relació entre el nombre d'augments de l'objectiu ( AO ), obertura numèrica ( ON ) i la resolució ( R ).
6) Què és una lent convergent? (Buscar informació)
..............................................................................................................................................
Citeu un exemple
7) Quins objectius ofereixen imatges més nítides, els que tenen un elevada d’obertura
numèrica o els que la tenen més baixa? ...................................................................................
Justifica la teva resposta.................................................................................... ........................
.........................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................
8) Què significa que la resolució d’un microscopi és de 500 nm? ..........................................
.........................................................................................................................................................
Quin poder de resolució té aquest microscopi?........................................................................
9) Calculeu, per longitud d’ona de 450 nm (blava) i de 580 (vermella), la resolució i el
poder de resolució de cadascuna de les lents del vostre microscopi.
Llum blava (450 nm) Llum vermella (580 nm) Resolució PR Resolució PR Objectiu x
Objectiu x
Objectiu x
Objectiu x
Interpreteu les dades de la taula
AO ON R
10X 0,25 (^1) m 40X 0,60 0,4 m 100X 1,25 (^) 0,2 m
10) Com és pot augmentar el poder de resolució d’un microscopi?......................................
......................................................................................................................................................... .........................................................................................................................................................
11) Quina resolució obtindríeu amb l’objectiu de 40 augments i ilꞏluminant la mostra amb
raigs ultraviolada (300nm) ?..............................Perquè no es fa anar aquesta llum al
microscopis òptic? ........................................................................................................................
......................................................................................................................................................... .........................................................................................................................................................
Per a quina longitud d’ona s’han calculat les resolucions (R) dels objectius, a la taula 2?
Hi ha alguna errada?.
X 10 X40 X
Longitud ona
La distància frontal és la separació que resta entre el frontal de la lent i l’objecte, quan l'enfocament és òptim. La profunditat de camp defineix el gruix de la preparació que podem observar clarament i sense canviar l’enfocament.
Treball a realitzar amb el microscopi Amb la mostra que us a lliurat el professor feu el següent exercici. Observeu la mostra amb l’objectiu de 10 i controleu amb el cargol micromètric el temps que tarda en enfocar-se i desenfocar-se. Després repetiu la mateixa operació amb l’objectiu de 40x.
**12) Quin objectiu té més profunditat de camp el de 10x o el de 40x? .....................................
- Com heu valorat la profunditat de camp?............................................................................ ......................................................................................................................................................... .........................................................................................................................................................**
Els oculars. Són el segon tipus de lents que tenen els microscopis compostos. Aquestes lents també són convergents. L’objectiu forma una imatge real i invertida, la qual es recollida per un altre joc de lents que formen l'ocular. Els oculars generalment estan constituïts per dues lents: una superior anomenada lent ocular i una inferior anomenada colꞏlectora. (Figura 5) La lent colꞏlectora rep la imatge formada per l'objectiu, després la refracta i en forma una de més petita, tot corregint la seva aberració d'esfericitat i els seus defectes cromàtics. La lent de l'ocular actua de lupa i forma una imatge virtual. El nombre d'augments que realitza un ocular està especificat en la lent.
El diafragma :
Habitualment el microscopis porten acoblada a la peça del condensador un diafragma tipus iris que l’obertura , quantitat i qualitat de la llum que ha de passar a traves del condensador.
EXERCICI 2 SEGUIU ELS SEGÜENTS PASSOS AMB EL MICROSCOPI
a) Agafeu un foli blanc i retalleu-lo com si fos un portaobjectes. b) Colꞏloqueu-lo al microscopi i separeu-lo al màxim l’objectiu de la platina. c) Situeu el condensador en la posició més allunada de la mostra i, amb la màxima ilꞏluminació, obriu i tanqueu el diafragma. 16) Quins canvis observeu en la llum projectada sobre el paper?.......................................... ................................................................................................................................................... Així doncs, quina funció fa el diafragma? ............................................................................ ...................................................................................................................................................
ATENCIÓ!. Abans de mirar la preparació cal que aquesta estigui correctament
ilꞏluminada i per això s’ha de colꞏlocar tant el diafragma com el condensador en una
posició en que l’ilꞏluminació de la mostra sigui la més adequada.
Instruccions a tenir en compte en la utilització del microscopi.
1) Colꞏlocar l'objectiu més petit (vermell) i seleccionar la llum adequada.
INICIAR SEMPRE AMB L’OBJECTIU DE MENYS AUGMENTS.
2) Separar al màxim l’objectiu de la platina.
3) Colꞏlocar la preparació.
4) Apropar al màxim possible l’objectiu petit de la platina i anar allunat l’objectiu
de la platina amb el macròmetric i mirant per l’ocular. Quan es comença a
detectar d’imatge s’ha de rodar lentament. Un cop enfocada la preparació afinar
l'enfocament amb el micromètric.
5) Per a canviar d’augments, només cal girar amb molta cura el tambor (porta
objectius) fins colꞏlocar el següent objectiu (vigileu de fer la rotació correcta del
tambor ja que si no es poden fer malbé els objectius ). Després afinar
l'enfocament amb el micromètric. Així successivament fins l’objectiu de 40x.
NO UTILITZEU L’OBJECTIU DE 100x FINS QUE HO DIGA EL PROFESSOR.
Observeu amb al microscopi les mostres que us lliurarà el professor i feu un
dibuix de les vostres observacions.
Informació de Nikon
(http://www.microscopyu.com/articles/formulas/formulasresolution.html)
Bibliografia.
Historia General de la Ciència. Ed Destino.
Historia Universal de la Medicina Ed. Salvat.
Manual de Microscopi. M. Locquin, M. Langeron. Ed Labor
Tècniques Microscòpiques. C. Nezelof i altres. Ed. Jilms.
La teoria celꞏlular. Albarracín A. Ed. Alianza Universidad.
Microscopía Electrónica. Nunn RE. Ed Manual Moderno- Mexico
Conceptos de Biologia. Giordan A, Host V, Tesi D, Gagliardi R. Ed. Labor
Biología Celular i Molecular. De Robertis. Ed Ateneo.
Olympus Microscopy http://www.olympusmicro.com/primer/anatomy/anatomy.html
