4
EVALUACIÓN EN GRUPO. SEGUNDA SESIÓN: PROBLEMAS DE
ENZIMOLOGÍA. BIOQUÍMICA (código 16310).
2º curso GRADO EN BIOLÓGICAS. Grupos 126 y 127.
Fecha: 8 de noviembre de 2012.
Equipo:____________ del 12_
El examen consta de 2 preguntas: una para resolver en equipo y otra para entrega individual
1. RESOLUCIÓN EN EQUIPO: Dos inhibidores de la hidrólisis de serotonina, muy
eficaces como antidepresivos se analizaron para determinar su actividad sobre el enzima
purificado y se obtuvieron los siguientes resultados:
Velocidad (M/min)
[S] (M) sin inhibidor +inhibidor A +inhibidor B
10 x 10-5 70 x 10-6 45 x 10-6 35 x 10-6
20 x 10-5 95 x 10-6 52 x 10-6 47 x 10-6
40 x 10-5 112 x 10-6 60 x 10-6 56 x 10-6
a) Determinar la Km y Vmax de esta enzima para el sustrato utilizado. Km= 10 x 10-5
M (10-4 M); Vmax= 142,86 µM/min
b) ¿Qué tipo de inhibición se detecta en cada caso? ¿Pueden ser ambos inhibidores la
misma sustancia? Razonad vuestra respuesta en el recuadro. A: acompetitiva y B: No
competitiva “pura”. No pueden ser la misma sustancia porque si lo fueran el tipo de
inhibición( es decir, el mecanismo molecular por el cual inhiben al enzima debería ser
idéntico.
EVALUACIÓN INDIVIDUAL. SEGUNDA SESIÓN: PROBLEMAS DE
ENZIMOLOGÍA. BIOQUÍMICA (código 16310).
2º curso GRADO EN BIOLÓGICAS. Grupos 126 y 127.
Fecha: 8 de noviembre de 2012.
Grupo: 12_
Alumno: _____________________________________________________
2.- RESOLUCION INDIVIDUAL: En el laboratorio donde trabajas se ha purificado
un inhibidor competitivo de la succinato deshidrogenasa. La enzima de E.coli tiene una
Km para el sustrato succinato de 40µM. Para caracterizar su mecanismo de acción se ha
determinado la Kmapp en presencia de una concentración de 50nM del inhibidor y se ha
obtenido un valor de 200µM.
a) Calcular la Ki con sus unidades correspondientes. Ki= 12,5nM
b) ¿Cómo cambiará la Vmax en presencia o ausencia de inhibidor? Razona todo lo
posible tu respuesta. No cambiará dado que es un inhibidor COMPETITIVO: su
presencia compite la unión del sustrato al enzima y el efecto observado (“aparente” ) es
de un cambio en la [S] necesaria para elevar la V de reacción a [S] bajas y medias, es
decir, un aumento en la Km. A [S] elevadas, este tipo de inhibidores NO TIENE
EFECTO, dado que al haber mucho más S que I, el sustrato es capaz de unirse al
enzima aún en presencia de inhibidor (se “compite” la inhibición por [S] elevadas) y por
eso no cambia la Vmax.