NOM: Adrià Aguilar , Idoia GRUP: 1
PURIFICACIÓ DE LA LACTAT DESHIDROGENASA DE MÚSCUL DE VEDELLA
1. Elaboreu una taula per a la cromatografia d’afinitat de la LDH (2 o 3 decimals
únicament). Incloeu un exemple de càlcul de la mostra D1 per tots els
paràmetres, juntament amb la patró utilitzada sota la taula. Especifiqueu tots
els passos que heu hagut de fer. Recordeu que heu de restar el blanc, detalleu
com ho heu fet. Especificar el motiu pel qual heu descartat algun valor, en cas
que ho hàgiu fet.
Diàlisi Través A1 A2 B C1 C2 D1 D2
Volum (ml) 8,0 5,8 5,2 5,8 5,2 7,0 2,6 6,6 4,2
Concentració de
proteïna (mg/
ml)
Quantitat de
proteïna (mg)
Activitat (UE) 415,67 0,14 0,46 0,23 21,2 7,5 0,007 671,08 183,98
Activitat
específica (UE/
mg prot.)
% de
recuperació de
proteïna1
% de
recuperació
d'activitat2
100 0,034 0,11 0,055 5,1 1,8 0,002 161,44 43,94
Factor de
purificació3
1 És la quantitat total de proteïna present a una fracció dividida per la quantitat a la
diàlisi, expressat en percentatge.
2 És l’activitat LDH present a una fracció, dividida per l’activitat a la diàlisi,
expressat en percentatge.
3 És l’activitat específica de la fracció dividit per l’activitat específica de la diàlisi.
Exemple de càlcul per la mostra D1:
Nota important: Encara que teníem una recta patró acceptable ( r2=0,956), més
de la meitat de les dilucions donaven un resultat erroni ( o bé estaven fora de la
recta patró o bé donaven una concentració de proteïna negativa quan es substituïa
en l’equació de la recta). En aquesta situació vam mirar el nostre gel
Qüestionari Pràctiques de Mètodes Instrumentals
Quantitatius
