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Análisis de operones: regulación genética en C. elegans y levaduras - Prof. 658, Exámenes de Genética

El análisis de diferentes operones, incluyendo el de c. Elegans y levaduras. Se muestran datos de mutantes y merodiploides en presencia y ausencia de determinadas moléculas, como mh, y se deducen conclusiones sobre el papel de diferentes genes y proteínas en el desarrollo y regulación de estos operones. Además, se analizan resultados de experimentos in vitro para determinar el papel regulador de proteínas específicas en la expresión de genes como genz.

Tipo: Exámenes

2013/2014

Subido el 01/09/2014

ironwolf87
ironwolf87 🇪🇸

4.5

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GMeIG 27 Mayo
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En un hipotético operón, los elementos A, B, C y D representan el gen
regulador, la secuencia promotora, la secuencia operadora y el gen
estructural, aunque no necesariamente en ese orden. Se muestran los
datos de diferentes mutantes y merodiploides en presencia y ausencia
de la molécula mh:
(EA: enzima activa; EI: enzima inactiva; SE: sin enzima)
En base a estos datos, podemos decir que:
a) A es el promotor.
b) B es el gen estructural.
c) D es el gen regulador, que codifica para un represor.
d) C es el operador.
En C. elegans, un macho diploide silvestre tiene un cromosoma X, y un hermafrodita diploide silvestre tiene dos
cromosomas X. Las mutaciones de pérdida de función en el gen her-1 hacen que un gusano X0 se desarrolle en
hermafrodita, pero no tiene efecto en un gusano XX. En cambio, mutaciones en el gen tra-1 hacen que un animal
XX se desarrolle como macho. Varios experimentos indican que el producto del gen her-1 determina el nivel de
actividad del producto del gen tra-1. En base a estos datos, podemos deducir que:
a) El producto del gen tra-1+ suprime el desarrollo hermafrodita.
b) El doble mutante tra-1-/her-1- debería ser hermafrodita.
c) El producto del gen her-1+ es esencial para el desarrollo hermafrodita.
d) El doble mutante tra-1-/her-1- debería ser macho.
Se conocen mutaciones puntuales o pequeñas deleciones que afectan de una u otra forma a la expresión del
operón de síntesis de un aminoácido aaX, regulado por un mecanismo exclusivo de procariotas similar al de otros
operones biosintéticos de este tipo. La mutación aaX-1 confiere nivel alto de expresión constitutiva. Las
mutaciones aaX-2 y aaX-4 confieren niveles bajos de expresión no regulados por aaX, y la mutación aaX-3
confiere también niveles bajos de expresión, pero regulados por aaX. Todas las mutaciones cartografían dentro
del operón, pero sólo la mutación aaX-4 lo hace en una región codificante que se traduce.
En función de estos datos, podemos deducir que las mutaciones afectan a:
a) aaX-4 afecta al atenuador, impidiendo la formación de la horquilla terminadora.
b) aaX-1 afecta al atenuador, favoreciendo la formación de la horquilla terminadora.
c) aaX-3 afecta al promotor, disminuyendo la frecuencia de inicio de la transcripción.
d) aaX-2 implica la delección de codones específicos del péptido líder.
Genotipo
+ mh
-mh
A+B+C+D+
EA
SE
A-B+C+D+
EA
EA
A+B-C+D+
SE
SE
A+B+C-D+
EI
SE
A+B+C+D-
EA
EA
A-B+C+D+/F’ A+B+C+D+
EA
EA
A+B-C+D+/F’ A+B+C+D+
EA
SE
A+B+C-D+/F’ A+B+C+D+
EA+EI
SE
A+B+C+D-/F’ A+B+C+D+
EA
SE
pf2

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GMeIG 27 Mayo

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En un hipotético operón, los elementos A, B, C y D representan el gen regulador, la secuencia promotora, la secuencia operadora y el gen estructural, aunque no necesariamente en ese orden. Se muestran los datos de diferentes mutantes y merodiploides en presencia y ausencia de la molécula mh: (EA: enzima activa; EI: enzima inactiva; SE: sin enzima) En base a estos datos, podemos decir que: a) A es el promotor. b) B es el gen estructural. c) D es el gen regulador, que codifica para un represor. d) C es el operador.

En C. elegans , un macho diploide silvestre tiene un cromosoma X, y un hermafrodita diploide silvestre tiene dos cromosomas X. Las mutaciones de pérdida de función en el gen her-1 hacen que un gusano X0 se desarrolle en hermafrodita, pero no tiene efecto en un gusano XX. En cambio, mutaciones en el gen tra-1 hacen que un animal XX se desarrolle como macho. Varios experimentos indican que el producto del gen her-1 determina el nivel de actividad del producto del gen tra-1. En base a estos datos, podemos deducir que: a) El producto del gen tra-1+^ suprime el desarrollo hermafrodita. b) El doble mutante tra-1-/her-1-^ debería ser hermafrodita. c) El producto del gen her-1+^ es esencial para el desarrollo hermafrodita. d) El doble mutante tra- 1 - /her- 1 -^ debería ser macho.

Se conocen mutaciones puntuales o pequeñas deleciones que afectan de una u otra forma a la expresión del operón de síntesis de un aminoácido aaX, regulado por un mecanismo exclusivo de procariotas similar al de otros operones biosintéticos de este tipo. La mutación aaX-1 confiere nivel alto de expresión constitutiva. Las mutaciones aaX-2 y aaX-4 confieren niveles bajos de expresión no regulados por aaX, y la mutación aaX- confiere también niveles bajos de expresión, pero regulados por aaX. Todas las mutaciones cartografían dentro del operón, pero sólo la mutación aaX-4 lo hace en una región codificante que se traduce. En función de estos datos, podemos deducir que las mutaciones afectan a: a) aaX-4 afecta al atenuador, impidiendo la formación de la horquilla terminadora. b) aaX-1 afecta al atenuador, favoreciendo la formación de la horquilla terminadora. c) aaX- 3 afecta al promotor, disminuyendo la frecuencia de inicio de la transcripción. d) aaX-2 implica la delección de codones específicos del péptido líder.

Genotipo + mh -mh A+B+C+D+^ EA SE A-B+C+D+^ EA EA A+B-C+D+^ SE SE A+B+C-D+^ EI SE A+B+C+D-^ EA EA A-B+C+D+/F’ A+B+C+D+^ EA EA A+B-C+D+/F’ A+B+C+D+^ EA SE A+B+C-D+/F’ A+B+C+D+^ EA+EI SE A+B+C+D-/F’ A+B+C+D+^ EA SE

GMeIG 27 Mayo

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La región reguladora del genZ de levaduras posee 3 regiones esenciales (A, B y C) para la correcta expresión del gen en diferentes condiciones. Para demostrar el papel regulador de dos proteínas (ProtE y ProtF) en dicha regulación, se construyeron fusiones a lacZ entre la región reguladora completa de genZ y varias versiones con deleciones. La transcripción de estas fusiones se analizó in vitro en ausencia y presencia de una, otra o ambas proteínas.

Analizando los resultados podemos deducir que: a) La región A y ProtE son suficientes para la correcta activación de genZ. b) ProtF compite con ProtE por unirse a las regiones A y C. c) La región C y ProtF son suficientes para reprimir genZ. d) ProtF compite con ProtE por unirse a las regiones A y B.

Proteína añadida Ninguna Sólo E Sólo F E+F 50 1000 5 5 50 1000 50 1000 50 500 5 5 50 500 5 5

WT A^ B^ C^ lacZ A B lacZ A C lacZ B C lacZ