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Le caratteristiche morfologiche e biologiche dei batteri appartenenti ai generi streptococchi e enterococchi, inclusa la loro classificazione sierologica e la loro identificazione utilizzando diversi metodi di laboratorio. Vengono trattati i principali rappresentanti di ognuno dei due generi, come streptococcus agalactiae, streptococcus pneumoniae, streptococcus pyogenes e enterococcus faecalis. Il test immunologico grouping kit viene utilizzato per identificare i vari gruppi sierologici.
Tipologia: Appunti
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Streptococchi caratteristiche : gram + Vivono bene a 37 Sono aerotolleranti Sono asporigeni Degradano i carboidrati Sono ossidasi negativi Sono chemiorganotrofi Sono catalasi negativi (li differenzia dagli stafilococchi) Sono in coppia o catenella Sono omofermentanti Non sono pigmentati Streptococcus agalactiae : beta emolitico di gruppo B Si differenzia dagli altri perché resiste alla bacitracina Nell’adulto causa infezioni urogenitali e infezioni alla mammella Aumenta in gravidanza Causa meningiti al neonato Si trova nel tratto intestinale Streptococcus pneumoniae : sono a coppie o corte catenelle Hanno forma lanceolata Hanno una capsula polisaccaridica quindi resistono a opsonizzazione e fagocitosi Non hanno antigene C Sono alfa emolitici Sono depressi al centro La capsula si riconosce per colorazione negativa con inchiostro di china Si identificano perché resistono all’optochina o con test pcr che ricercano il genoma Streptococcus pyogenes : beta emolitico di gruppo A disposte a catenelle Alone di beta emolisi Responsabile di malattie come la scarlattina Enterococchi : struttura simile agli streptococchi Vivono fra i 10 e i 45 Resistono alle condizioni ambientali Faecalis e faecis sono indicatori di inquinamento fecale
Gli streptococchi si coltivano in terreni arricchiti con sangue e siero, e con azide di sodio che è una sostanza selettiva che agisce sui citocromi, questa sostanza non agisce sugli streptococchi perché non hanno citocromi. Gli streptococchi più patogeni sono anaerobi aerotolleranti: fanno la fermentazione lattica ma crescono anche in presenza di o2; altri sono strettamente anaerobi, altri richiedono molta co2. Gli streptococchi si riconoscono per due caratteristiche: Classificazione sierologica di lancefield : in base alla presenza di antigeni superficiali diversi, questi antigeni specifici sono chiamati antigeni C e gli streptococchi sono divisi in gruppi in base al tipo di antigene C che possiedono > pneumoniae non li ha. Classificazione di Shermann : in base all’attività emolitica. Gli streptococchi si dividono in beta emolitici, alfa emolitici o viridanti , e gamma emolitici. I beta emolitici fanno la beta emolisi e producono emolisine o streptolisine, si presentano con un alone trasparente intorno perché le colonie lisano i g.r completamente (completa emolisi), si identificano perché sono sensibili alla bacitracina. Gli alfa emolitici fanno l’alfa emolisi (emolisi parziale) e si presentano con aloni verdi perché l’alfa emolisina scinde i g.r e riduce l’emoglobina da rossa a verde (metà emoglobina). I gamma emolitici non provocano emolisi perché non producono emolisine. Per distinguere gli streptococchi si una l’identificazione di lancefield o il test della bacitracina. Gli streptococchi producono esotossine tossiche per tutte le cellule dell’organismo che possono essere di due tipi:
BEA : serve a confermare gli enterococchi, è un terreno di isolamento. Contiene: bile di bue : cambia la tensione superficiale rendendola inadatta ad alcuni microrganismi > rende il terreno selettivo Sodio azide o azide di sodio : rende il terreno selettivo perché agisce a livello dei citocromi e li blocca (seleziona specialmente streptococchi ed enterococchi che resistono a questa sostanza perché non hanno citocromi mentre negli altri batteri blocca la catalisi e la citocromo ossidasi) Esculina : rende il terreno differenziale ed è costituita da glucosio legato ad una parte non zuccherina. I m.o idrolizzano l’esculina e si libera esculetina che reagisce con gli ioni ferro del terreno facendolo diventare nero Ferro ammonio citrato : rende il terreno differenziale Identificazione : per discriminare stafilococchi da enterococchi e streptococchi Dopo la colorazione di gran osserviamo al microscopio batteri gram + > facciamo test catalasi: se sono catalasi positivi sono stafilococchi mentre se sono catalasi negativi sono enterococchi o streptococchi TEST IMMUNOLOGICO/GROUPING KIT: Serve ad identificare i vari gruppi sierologici e si basa sulla liberazione di specifici antigeni dalla parete batterica attraverso estrazione con acido nitroso modificato (e l’uso di reagenti appositi). Nel kit ci sono tre reagenti: i primi due servono ad estrarre l’antigene C a temperatura ambiente mentre il terzo serve a neutralizzare la reazione. L’estratto neutralizzato si può identificare usando particelle di lattice blu (con legate ig specifiche) che in presenza di antigeni agglutinano. La goccia in cui c’è l’estratto della nostra coltura batterica con l’antigene si mette in degli ovalini con anticorpi specifici diversi, si mescolano e si muove il cartoncino con gli ovalini: si osserva l’agglutinazione. Risultati: positivo = agglutinazione con un solo reagente Negativo = nessuna agglutinazione Dubbio = agglutinazione troppo debole Non interpretabile = agglutinazione con più di un gruppo