Química Analítica e Bioanalítica Avançada Q1.2026
Prática 1 12/02/2026
Análise de Proteínas do leite
Nesta prática serão aplicados conceitos de calibração e validação na análise de
proteínas. Utilizaremos a espectrofotometria UV-Vis para a determinação do teor de
proteínas totais, solúveis (proteínas do soro – whey protein) e insolúveis (caseína – a
proteína do queijo) em uma amostra de leite desnatado.
A tarefa do grupo a ser realizada antes da prática é a de preparar o roteiro
experimental para a realização da tarefa. As questões seguintes servem como material de
estudo para a preparação do roteiro experimental e para o melhor aproveitamento do
experimento. Não será necessária a entrega desse material. Cada aluno, individualmente,
deverá possuir um caderno/fichário de laboratório escrito à mão que poderá ser usado
como material de consulta para a avaliação prática. Para a realização do experimento o
caderno pode ser do grupo e eventualmente será vistoriado para composição da nota de
participação.
Questões pré-prática:
1) Qual é a composição do leite? E do leite desnatado (UHT padronizado de
caixinha)? Quais as proteínas encontradas e sua proporção esperada?
2) Como separar as proteínas do soro da caseína?
3) A matriz gera interferência? Como eliminar essa interferência na dosagem?
(tipo de calibração e brancos/controles)
4) Qual a proporção de complexante (biureto) : amostra deve ser utilizado? Como
determinar isso experimentalmente?
5) Quais os testes de validação normalmente exigidos para uma metodologia
analítica? Em relação especificamente à exatidão, quais as 3 abordagens mais
importantes?
6) Realizar ao menos os seguintes testes de validação: limite de detecção e de
quantificação, exatidão, precisão e faixa analítica.
7) Na determinação UV (280 nm) e por biureto (aprox. 550 nm), qual a
explicação química/molecular para a obtenção de absortividade? Qual dessas
determinações pode ser considerada mais seletiva? Em relação à calibração,
ambas permitem o uso de uma proteína diferente da dosada para a obtenção
das curvas analíticas? Comente em qual delas é esperada uma distorção maior
(caso aplicável) e como se resolve (caso possível) esse problema.
Questões pós-prática:
1) Qual o teor de proteínas totais e das frações? Este valor é compatível com
o esperado?
2) Qual o método de calibração utilizado? Como foi realizado o branco?
3) O resultado do teste de recuperação foi satisfatório? Qual o percentual
recuperado para o teor total e para as frações?
