Prácticas Microbiología:
Preparación de medios de cultivo: caldo común, agar nutritivo y medio base para la fermentación
de azúcares.
Esterilización: consiste en eliminar los posibles microorganismos presentes en el medio antes de
utilizarlo para nuestros propósitos.
Condiciones estériles: procurar una zona de trabajo estéril alta temperatura y alta presión.
Caldo común, cantidades por litro:
Extracto de carne 3 g
Peptona bacteriológica 10 g
Cloruro sódico 5 g
Cloruro magnésico (1M) 10 ml
Agar nutritivo: La composición es la misma que la del caldo común, pero se añade antes de esterilizar 15 g
de agar por litro, disolviéndolo durante la esterilización. Cuando aún está caliente, se extiende en placas
(aproximadamente 45ºC) y en tubos, que seguidamente son inclinados para obtener una superficie más
extensa.
Medio base para la fermentación de azúcares: Inicialmente se prepara un medio base pobre en
aminoácidos de la siguiente composición por litro:
Extracto de carne 1 g
Peptona bacteriológica 10 g
Cloruro sódico 5 g
2 ml/litro de púrpura de bromocresol
10 g/litro de (glucosa o lactosa o sacarosa)
Hay que poner una campana Durham en cada tubo.
Medio base para la fermentación de azúcares (400 ml) 7 ml/tubo con campana Durham
Rotular (G o L o S) según el tipo de azúcar
Esterilización (1 atm o 0.5 atm los medios con azúcares). Todo el material de vidrio se esteriliza mediante
calor seco en Horno Pasteur.
Siembra de microorganismos, siempre con ASA DE SIEMBRA
1. Placas de Petri
2. Tubos con caldo (líquido)
3. Tubos con agar inclinado
Se lleva una porción de una población de microorganismos (inóculo) de un cultivo crecido a un medio
nutritivo para su crecimiento.
