Problemas de microbiología
1. Calcula el número de microorganismos viables por gramo de tierra teniendo en
cuenta que has resuspendido 25 g en 75 ml de agua de peptona, a partir de esta dilución
madre has hecho 4 diluciones decimales (1 ml en 9 ml de agua peptona) y al sembrar en
placa 100 μl de cada dilución, has obtenido 50 colonias en la última de las diluciones.
Respuesta: 2x107 microorganismos por gramo de tierra
2. El número de U.F.C.( unidades formadoras de colonias) por mililitro de un cultivo
bacteriano dado es de 19x108, sabiendo que el recuento en la placa en la que se
habían sembrado 10 microlitros es de 19, ¿cuál es la dilución que se ha considerado
para el cálculo total?
Respuesta: dilución 10-6.
3. Durante el experimento de infección de E. coli JM83 con fago LambdaRS45 se
emplearon 0,2 ml de cultivo bacteriano ( 109 bacterias/ml) y se añadió a cada uno
0,1 ml de tres diluciones consecutivas de virus. Los tubos se incubaron a 37ºC
durante 15 minutos. Se añadió agar blando al tubo y todo el contenido del mismo, se
extendió sobre placas de agar común. En la tabla se muestran los recuentos de
placas de lisis para cada una de las diluciones indicadas:
Diluciones -3 -4 -5
Agar común 780 80 9
Una mezcla de 0,1 ml de bacteria más 0,1 ml de solución de fago se incubó a
37ºC durante 15 minutos. 100 microlitros de esta mezcla se extendió en placas
de agar de MacConkey con Km tal como se realizó en el ensayo práctico. Se
obtuvieron 12 colonias rojas en esta placa de selección.
Calcule:
a. El título del fago, es decir, el número aproximado de unidades infectivas por
ml.
b. La eficiencia de la lisogenia
Respuestas:
a. Aproximadamente 8 x 106 fagos/ml.
b. 3 fagos de cada cien mil que hay en la mezcla son capaces de integrarse en
el cromosoma de la bacteria.
4. En un análisis de aguas, y tras extender en las placas de los medios especificados
100 ml de cada una de las diluciones indicadas, se obtuvieron los recuentos de
colonias que aparecen en la tabla. Asumiendo que solo puedan estar presentes las
cuatro especies que se emplearon en el ensayo práctico, calcule:
DILUCIONES: -3 -4
