Exercício – Agentes de controle microbiano
1.Ler a página 27 sobre autoclaves e escrever uma resenha.
A autoclave pode ser utilizada para esterilizar reatores de pequeno porte,
meios de cultura e vidrarias por calor úmido. Elas podem ser verticais ou horizontais,
onde a porta se situa na parte superior das autoclaves verticais e, no caso das
horizontais, podem haver até duas portas de acesso. O vapor que aquece o
equipamento pode ser produzido externamente, através de uma caldeira, ou
internamente, a partir de sistemas de geração de vapor elétricos ou a gás. Autoclaves
de grande porte podem trabalhar continuamente por possuírem sistema interno de
circulação de vapor. No geral, as autoclaves trabalham de modo descontínuo, em
ciclos. A operação da autoclave é simples. Para vapores gerados internamente, o
primeiro passo é completar o nível de água até a marca indicada pelo fabricante, em
seguida, o material a ser esterilizado é inserido na autoclave e a porta é fechada. O
vapor gerado ocupa todo o espaço interno e deve fluir para o exterior através de uma
válvula de descarga. Após aproximadamente vinte minutos da expulsão do ar, a
válvula de descarga é fechada e a pressão e temperatura internas devem subir até
atingir cerca dee 121 ºC e 1 atm. Quando atingida esta condição, o sistema de
aquecimento ou a entrada de vapor devem ser controlados a fim de mantê-la. Com o
desligamento do aquecimento ou fechamento da entrada de vapor inicia-se o
resfriamento. A autoclave só deve ser aberta após atingir uma temperatura próxima a
temperatura ambiente.
2. Analisar reatores por calor úmido
A esterilização de reatores vazios é realizada injetando-se vapor diretamente
em seu interior e promovendo inicialmente toda a expulsão do ar presente dentro do
reator. Em seguida, o reator é fechado e o vapor é injetado até que a pressão e
temperatura de 1 atm e 121ºC sejam atingidos. Novas injeções acontecem durante a
esterilização para manter a condição necessária já atingida. Ao final da esterilização, a
entrada de vapor é fechada e o ar esterilizado deve ser injetado, a fim de evitar a
formação de vácuo. Em seguida, o meio de cultura esterilizado externamente é
inserido no reator e a utilização do tanque pode ser iniciada. Para reatores com meio
de cultura, a esterilização ocorre em três etapas e deve existir uma agitação mínima
do meio de cultura durante todo o processo de esterilização. Inicialmente o vapor é
circulado pela serpentina até que a temperatura do meio atinja cerca de 96 a 97ºC,
nesta etapa a cabeça do tanque deve receber vapor fluente no seu interior. Ao mesmo
tempo, as válvulas, filtros e tubulações de entrada e saída do reator também são
esterilizados por vapor fluentes. Na etapa seguinte, injeta-se vapor diretamente no
meio de cultura até que ele alcance uma temperatura de 100ºC. A partir deste ponto o
reator é completamente fechado e a injeção de vapor continua até que a temperatura
e pressão internas atinjam 121ºC e 1 atm. Então, a injeção direta de vapor pode ser
removida e novas injeções acontecem durante a esterilização para manter esta
condição durante o processo. O resfriamento é feito pela circulação de água fria pela
camisa ou serpentina. Quando a temperatura atingir cerca de 100ºC, o ar esterilizado
deve ser injetado no tanque para evitar a formação de vácuo. A injeção direta de vapor
pode provocar um aumento de cerca de 10 a 15%, em volume, do meio de cultura. Por
este motivo, o meio de cultura deve ser preparado na forma concentrada nesse caso.
Para reatores de pequeno porte, a esterilização ocorre em autoclaves, como citado na
questão anterior. Para reatores com esterilização programável, este processo é
