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Relatório de Aula Prática 5: Espetrofotometria - Calibração e Exercícios, Trabalhos de Bioquímica

Documento que apresenta o relatório de uma aula prática sobre espetrofotometria, incluindo teorias básicas, materiais e reagentes utilizados, procedimentos experimentais e exercícios resolvidos. O documento também inclui tabelas e figuras para ilustrar os conceitos.

Tipologia: Trabalhos

2021

Compartilhado em 09/05/2021

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UNIVERSIDADE LUSÓFONA
Lisboa, 2021
RELATÓRIO
Aula Prática Nº 5
Espetrofotometria – reta de calibração e exercícios
DISCENTES:
Evellyn Almeida nº22000568
Karolyne Baioco nº 22001643
Mariana Mira Godinho nº 22004913
DOCENTE: Professora Maria da Palma
Escola de Ciências e Tecnologias da Saúde
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UNIVERSIDADE LUSÓFONA

Lisboa, 2021

RELATÓRIO

Aula Prática Nº 5

Espetrofotometria – reta de calibração e exercícios

DISCENTES:

Evellyn Almeida nº Karolyne Baioco nº 22001643 Mariana Mira Godinho nº 22004913 DOCENTE : Professora Maria da Palma Escola de Ciências e Tecnologias da Saúde

UNIVERSIDADE LUSÓFONA

Lisboa, 2021

RELATÓRIO

Aula Prática Nº 5

Espetrofotometria – reta de calibração e exercícios

DISCENTES:

Evellyn Almeida nº Karolyne Baioco nº 22001643 Mariana Mira Godinho nº 22004913 DOCENTE : Professora Maria da Palma Escola de Ciências e Tecnologias da Saúde

Abstract Keywords 6 ULHT

Índice Geral 6 ULHT

Índice de Figuras Figura 1 - Esquema de funcionamento interno de um espectrofotómetro Figura 2 - Espetrofotómetro Figura 3 - Cuvette 6 ULHT

**1. Introdução

  1. Fundamentação Teórica
  2. Material, Reagentes e Instrumentos de medidas**

3.1. Material

Balão de diluição de 100 mL Balões de diluição de 20 mL Pipeta de Pasteur Espetrofotómetro Proveta Pipeta volumétrica 6 ULHT

4. Procedimento Experimental Espetrofotometria é uma técnica que utiliza um equipamento (espectrofotômetro) para determinar os valores de transmitância (luz transmitida) e absorbância (luz absorvida) de uma solução em um ou mais comprimentos de onda. Este aparelho mede a quantidade de fotões (a intensidade da luz) absorvidos depois de passar pela amostra. Podemos ainda determinar concentrações de umas substâncias químicas. Pode denominar-se como um método analítico na qual as espécies absorventes de uma amostra a serem analisadas, são colocadas num recipiente chamado de cuvette, e ao passar um feixe de radiação monocromática através dela, uma parte da energia radiante é absorvida e a outra é absorvida pelo meio. Esta energia medida é expressa em % de transmitância ou em absorvância. [ CITATION Kas21 \l 2070 ] Figura 1 Esquema de funcionamento interno de um espectrofotômetro 6 ULHT

Figura 2 Espetrofotómetro Figura 3 Cuvette

Exercícios sobre espetrofotometria

1. Defina absortividade molar. É a característica de uma substância que nos indica a quantidade de luz absorvida num determinado comprimento de onda. Pela lei de Beer e tem unidade de L mol-1 cm-1.

3. O que é um espetro de absorção? É um gráfico que relaciona como a absorvância (ou C ;) varia com o comprimento de onda (C ;). 7. Porque é mais exato medir a absorvância na faixa de 0,2 a 0,9? Pois geralmente nesta faixa de absorvância a maioria das substâncias apresentam uma relação linear entre a absorvância e a concentração, sendo, portanto, possível a aplicação da Lei de Beer. 8. Se uma amostra para analise espectrofotométrica for colocada numa célula de 10 cm, a absorvância será́ 10 vezes maior do que absorvância numa célula de 1 cm. A absorvância da “solução branco” também aumentará 10 vezes? Sim será́, pois a lei de Beer prevê̂ uma relação linear entre a absorvância e a concentração. Portanto, aumento a concentração por um fator de 10 a absorvância também será́ alterada por este fator. 10. A lei de Lamber-Beer pode ser aplicada em toda a faixa de concentrações? Não, todas as absorbâncias superiores a 1 não podem ser analisadas. 6 ULHT

Gráfico 1 - Curva de calibração do KMnO

8. Discussão de Resultados Após a realização deste trabalho experimental e analise dos resultados obtidos, foi possível verificar a aplicação da Lei de Lambert Beer. Ao analisar os resultados obtidos concluiu se que, a solução 1 encontrava-se mais concentrada do que deveria, uma vez que, o valor de Absorvância obtido estava acima de 1. Este erro compromete os resultados, uma vez que, a Lei de Lambert Beer só se verifica até um limite máximo de concentrações, para uma determinada substância. Este erro poderia ter sido evitado se a solução preparada estivesse mais diluída. Neste protocolo, a solução com Absorvância maior foi a 1º, no entanto, esta perde efeito visto que se encontrava muito concentrada. Apesar deste erro, ao analisar os outros valores verificamos que quanto maior a concentração da solução, maior a Absorvância obtida no espetrofotometro. 6 ULHT

9. Conclusão Com a realização deste trabalho experimental, foi possível obter, através da técnica de espetrofotometria a curva de calibração do KMnO 4 e assim obter a concentração de uma solução desconhecida. No entanto, a linha de tendência obtida não é confiável, uma vez que, a 1º solução encontrava-se demasiado concentrada e a Lei de Lambert Beer não é aplicável a soluções muito concentradas. Podemos assim concluir que é possível prever a concentração de soluções pela aplicação de Lambert Beer e com o auxílio de um Espectrofotometro; 10. Referências Bibliográficas 6 ULHT