FINALIDADE
Sistema para coloração de células em esfregaços de sangue
periférico, medula óssea ou para estudo citológico de
elementos celulares colhidos por punção, raspagem ou
concentrados de elementos celulares de derrames
cavitários.
Somente para uso diagnóstico in vitro.
PRINCÍPIO
Os corantes para esfregaços sangüíneos, também chamados
de pancrômicos, são uma mistura de corantes de
características neutras, dependentes do pH da solução
corante, que em condições apropriadas coram os
componentes nucleares e citoplasmáticos dos leucócitos,
com predominância de tons vermelhos (quando ácidos) e
azulados diversos (quando básicos).
O corante de May-Grunwald (1902) é uma mistura de eosina
e azul de metileno (não oxidados), que quimicamente se
transforma em eosinato de azul de metileno.
Giemsa (Alemanha) desenvolveu, no mesmo período, um
corante que leva seu nome e que hoje se sabe ser uma mistura
de azur II (mistura equimolar de azur 1 e azul de metileno) e
eosinato de azur II (corante formado pela combinação
equimolar de azur 1, azul de metileno e eosina amarelada).
Esses dois corantes são utilizados através de um método
de coloração mais demorado, em que após fixação e
coloração pelo May Grunwald, se processa uma segunda
coloração com solução de Giemsa, obtendo-se um resultado
final melhor e mais detalhado.
A necessidade de um único corante, que pudesse corar
globalmente os elementos celulares com os detalhes do MG-
Giemsa, levou ao desenvolvimento de novos corantes:
Leishman (Inglaterra,1901) e Wright (Inglaterra,1902). São
corantes basicamente idênticos, compostos de eosina
amarelada e produtos de oxidação do azul de metileno. A
diferença entre ambos se restringe ao fato de que o processo
de maturação é mais longo na feitura do corante Leishman
(em pó).
PARTICULARIDADES DOS CORANTES PANCRÔMICOS
DOLES
Na manipulação dos corantes pancrômicos são utilizados
corantes específicos, previamente aprovados e de
procedência tradicional. O solvente é representado por
metanol, grau analítico, tamponado a pH 6,7 - 6,8.
REAGENTES E APRESENTAÇÃO
Corante seg. Leishman apresenta a seguinte
formulação:
Corante Leishman, em pó 1,5g
Metanol (tamponado pH 6,8) 1000mL
Apresentação
Frasco de 500mL
Frasco de 1000mL
MATERIAIS NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS
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•Suporte para coloração.
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•Cronômetro.
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•Lâminas.
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•Água destilada ou deionizada.
ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DO REAGENTE
O corante deve ser mantido no frasco original, bem vedado,
à temperatura ambiente (20-30oC) e ao abrigo da luz solar.
Sob essas condições, permanece estável até a data de
vencimento indicada no rótulo do frasco.
Na prática diária o corante é utilizado sob forma de gotas.
Sugere-se o uso de pequeno frasco conta-gotas,
periodicamente alimentado com o corante do frasco estoque.
CUIDADOS E PRECAUÇÕES COM O USO DOS
REAGENTES
Por tratar-se de uma solução alcoólica, deve-se tomar os
cuidados inerentes ao uso do álcool em laboratório. Evite
pipetar o corante com o uso da boca. A ingestão acidental
do metanol, dependendo da quantidade absorvida, pode
ser fatal. As soluções corantes são para uso exclusivo
in vitro. Seu manuseio deve ser cuidadoso, evitando-se o
contato com pele e mucosas. Em caso de contaminação
acidental, lavar a área afetada em água corrente. O descarte
do material utilizado deverá ser feito obedecendo-se aos
critérios de biossegurança estabelecidos pelo laboratório,
de acordo com as normas locais, estaduais ou federais.
AMOSTRA
Sangue periférico colhido por punção digital ou de coleta
venosa, com o uso de anticoagulantes adequados (heparina
ou soluções de EDTA). Esfregaços de medula óssea e
concentrados celulares de derrames cavitários. Os
esfregaços feitos a partir de sangue colhido com
anticoagulantes devem ser confeccionados em até 30
minutos, para se evitar deformações celulares sob efeito
do anticoagulante (ver nos desenhos como fazer esfregaços
sangüíneos).
Todas as amostras biológicas devem ser
consideradas como potencialmente infectantes.
1. Dispensar uma gota de sangue sobre a lâmina.
2. Com o uso de uma lâmina extensora, realizar o esfregaço.
3. O esfregaço deve ser uniforme em toda a lâmina.
4.Desenho esquemático de esfregaço. Resultados
homogêneos na contagem diferencial são obtidos
examinando-se a porção mediana do esfregaço.
CORANTES
1/2
LEISHMAN (MODIFICADO)
Observar ainda a simbologia
constante nos rótulos do produto:
IrritanteInflamável
SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goiânia) / 0800 644 6433 (Demais localidades) / FAX: (62) 3269 0001
