FINALIDADE
Sistema para coloração de células em esfregaços de sangue
periférico, medula óssea ou para estudo citológico de
elementos celulares colhidos por punção, raspagem ou
concentrados de elementos celulares de derrames cavitários.
Somente para uso diagnóstico in vitro.
PRINCÍPIO
Os corantes para esfregaços sangüíneos, também chamados
de pancrômicos, são uma mistura de corantes de
características neutras, dependentes do pH da solução
corante, que em condições apropriadas coram os
componentes nucleares e citoplasmáticos dos leucócitos, com
predominância de tons vermelhos (quando ácidos) e
azulados diversos(quando básicos).
O corante de May-Grunwald (1902) é uma mistura de eosina
e azul de metileno (não oxidados), que quimicamente se
transforma em eosinato de azul de metileno.
Giemsa (Alemanha) desenvolveu, no mesmo período, um
corante que leva seu nome e que hoje se sabe ser uma
mistura de azur II (mistura equimolar de azur 1 e azul de
metileno) e eosinato de azur II (corante formado pela
combinação equimolar de azur 1, azul de metileno e eosina
amarelada).
Esses dois corantes são utilizados em um método de
coloração mais demorado, em que após fixação e coloração
pelo May Grunwald, se processa uma segunda coloração
com solução de Giemsa, obtendo-se um resultado final
melhor e mais detalhado.
A necessidade de um único corante, que pudesse corar
globalmente os elementos celulares com os detalhes do MG-
Giemsa, levou ao desenvolvimento de novos corantes:
Leishman (Inglaterra,1901) e Wright (Inglaterra,1902). São
corantes basicamente idênticos, compostos de eosina
amarelada e produtos de oxidação do azul de metileno. A
diferença entre ambos se restringe ao fato de que o processo
de maturação é mais longo na feitura do corante Leishman
(em pó).
PARTICULARIDADES DOS CORANTES PANCRÔMICOS
DOLES
Na manipulação dos corantes pancrômicos são utilizados
corantes específicos, previamente aprovados e de procedência
tradicional. O solvente é representado por metanol, grau
analítico, tamponado a pH 6,7 - 6,8.
REAGENTES E APRESENTAÇÃO
Corante seg. Giemsa apresenta a seguinte
formulação:
Corante Giemsa, em pó 8g
Glicerol 500mL
Metanol (tamponado pH 6,8) q.s.p. 1000mL
Apresentação
Frasco 1 x 500mL
Frasco 1 x 1000mL
MATERIAIS NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS
•Suporte para coloração.
•Cronômetro.
•Lâminas.
•Água destilada ou deionizada.
•Metanol.
•May Grunwald.
ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DO REAGENTE
O corante deve ser mantido no frasco original, bem vedado,
armazenado à temperatura ambiente (20-30oC) e ao abrigo
da luz solar. Estável até a data de vencimento indicada no
rótulo do frasco, se obedecidas as condições de
armazenamento.
Na prática diária o corante é utilizado sob forma de gotas.
Sugere-se o uso de pequeno frasco conta-gotas,
periodicamente alimentado com o corante do frasco estoque.
CUIDADOS E PRECAUÇÕES COM O USO DOS
REAGENTES
Por tratar-se de uma solução alcoólica, deve-se tomar os
cuidados inerentes ao uso do álcool em laboratório. Evite
pipetar o corante com o uso da boca. A ingestão acidental
do metanol, dependendo da quantidade absorvida, pode
ser fatal. As soluções corantes são para uso exclusivo
in vitro. Seu manuseio deve ser cuidadoso, evitando-se o
contato com pele e mucosas. Em caso de contaminação
acidental, lavar a área afetada em água corrente. O
descarte do material utilizado deverá ser feito obedecendo-
se aos critérios de biossegurança estabelecidos pelo
laboratório, de acordo com as normas locais, estaduais ou
federais.
AMOSTRA
Sangue periférico colhido por punção digital ou de coleta
venosa, com o uso de anticoagulantes adequados (heparina
ou soluções de EDTA). Esfregaços de medula óssea e
concentrados celulares de derrames cavitários. Os
esfregaços feitos a partir de sangue colhido com
anticoagulantes devem ser confeccionados em até 30
minutos, para se evitar deformações celulares sob efeito
do anticoagulante (ver desenhos: como fazer esfregaços
sangüíneos).
Todas as amostras biológicas devem ser
consideradas como potencialmente infectantes.
1. Dispensar uma gota de sangue sobre a lâmina.
2. Com o uso de uma lâmina extensora, realizar o esfregaço.
3. O esfregaço deve ser uniforme em toda a lâmina.
4. Desenho esquemático de esfregaço. Resultados homogêneos na contagem
diferencial são obtidos examinando-se a porção mediana do esfregaço.
CORANTES
1/2
GIEMSA
Observar ainda a simbologia
constante nos rótulos do produto:
Inflamável Irritante
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