Relatorio espectrofotometria, Provas de Bioquímica

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ANÁLISE PELO ESPECTROFOTÔMETRO E CURVA PADRÃO DA

SOLUÇÃO DE CrCl (^) 3.

MAYARA MENEZES CARDOSO

Aluna do quarto período do curso de Farmácia da UFMA.

2. INTRODUCÃO

A espectrofotometria é uma técnica analítica que avalia a capacidade dos solutos de absorver luz em comprimentos de onda específicos. É o método de análises óptico mais usado nas investigações biológicas e fisico-químicas. O espectrofotômetro é um instrumento que permite comparar a radiação absorvida ou transmitida por uma solução que contém uma quantidade desconhecida de soluto, e uma quantidade conhecida da mesma substância. A medida da luz absorvida permite inferir sobre a concentração do soluto em determinada solução.

Compostos desconhecidos podem ser identificados por seus espectros característicos ao ultravioleta, visível ou infravermelho.

Quando uma radiação eletromagnética, por exemplo, a luz visível, incide em uma solução, se os fótons da radiação têm energia adequada, a energia associada a essa radiação pode sofrer três diferentes tipos de variações:

• ser refletida nas interfaces entre o ar e a parede do frasco contendo a solução (cubeta);
• ser dispersa por partículas presentes na solução;
• ser absorvida pela solução.

Nas aplicações espectrofotométricas, quando se usa energia monocromática em um simples comprimento de onda (λ), a fração de radiação absorvida pela solução, ignorando perdas por reflexão, será função da concentração da solução e da espessura da solução. Portanto, a quantidade de energia transmitida diminui exponencialmente com o aumento da espessura atravessada – Lei de Lambert – e o aumento da concentração ou da intensidade de cor da solução – Lei de Beer. A relação entre energia emergente (I) e energia incidente (I0) indica a transmitância (T) da solução. Em espectrofotometria, utiliza-se a absorbância (A) como a intensidade de radiação absorvida pela solução, seguindo as leis de Lambert-Beer.

-Água destilada;

-Béquer.

2.3. Análise Espectrofotométrica

Tomou-se como um ponto intermediário da curva analítica a solução de concentração intermediária 0,025mol/ L(2,5mL 0,05M CrCl 3 + 2,5mL H (^) 2O) e levantou-se o espectro de absorção de CrCl 3 em uma faixa de comprimento de onda de 520 a 580 nm e, determinou-se o comprimento máximo. Fixou-se o espectrofotômetro no comprimento determinado e mediu-se as absorbâncias de cada solução de CrCl 3. Após, fez-se uma regressão linear da curva analítica e encontrou-se a equação de reta e o valor de R^2.

Mediu-se a absorbância de uma solução CrCl 3 desconhecida(solução

problema) e determinou-se sua concentração exata através da equação de reta da curva analítica.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

λ (nm)

Absorbância

520 0 530 0 531 0, 532 0, 534 0, 536 0, 538 0, 540 0,

Tabela 1: Absorbância versus comprimento de onda.

Gráfico 1: Espectro de absorção do CrCl3( λ x Absorbância )

Concentração Absorbância a 531 nm 0 0 0,001 0, 0,01 0, 0,025 0, 0,05 0, 0,1 0, 0,2 1, Tabela 2 : Concentração versus absorbância a 531 nm.

Gráfico 2: Curva padrão da solução de CrCl 3 em diferentes concentrações.

O valor da absorbância encontrado para a solução problema de CrCl 3 foi igual a 0,136 então para encontrar sua concentração:

y = 6,7085.x

0,136= 6,7085.x

x = 0,136/6,

x = 0,02 mol/L

De acordo com os dados acima e os resultados da tabela é possível observar