En esta práctica utilizaremos muestras biológicas, por lo que es importante llevar guantes y
desechar los materiales en el contenedor amarillo.
Práctica 4: Presión osmótica. Efecto sobre la viabilidad celular
Isabel María Serrano Molina
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Asignatura: Bioquímica, Profesor: , Carrera: Enfermería, Universidad: UGR
Tipo: Ejercicios
2017/2018
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En esta práctica utilizaremos muestras biológicas, por lo que es importante llevar guantes y Práctica 4: Presión osmótica. Efecto sobre la viabilidad celular Isabel María Serrano Molina
En esta práctica utilizaremos muestras biológicas, por lo que es importante llevar guantes y
1. Fundamento teórico
Existen tres tipos de disoluciones y se definen de manera comparativa: Isotónicas Hipotónicas Hipertónicas Una disolución es isotónica con respecto de otra cuando su contenido en electrolitos es igual que el de esta. Hipertónica respecto a otra cuando su contenido en electrolitos es mayor que el de esta. Hipotónica respecto a otra cuando su contenido en electrolitos es menor que el de esta. Lo solemos comparar con el citosol de la célula en condiciones fisiológicas. Una disolución isotónica tendrá en su contenido NaCl de 0’9%. Toda disolución mayor a esta a esta cantidad será una disolución hipertónica, por el contrario, si es menor será una disolución hipotónica. El medio ideal es un medio isotónico. En este medio la célula presenta su morfología real. Si a esta célula la llevo a un medio hipertónico pierde agua (se deshidrata, se arruga). Si la cantidad de agua que pierde es importante pone a la célula en una situación en la que compromete su viabilidad (puede morir) Por otro lado, si a esta misma célula la sometemos a un medio hipotónico, empieza a entrar agua dentro de la célula para diluir el citosol. A consecuencia de este paso de agua la célula comienza a hincharse. Si la cantidad de agua que entra en la célula es grande puede romper la membrana y se puede lisar. De todas las células que hay en el organismo, la más sensible al choque osmótico son los hematíes. En la práctica de hoy comprobaremos este choque osmótico con hematíes.
2. Metodología
Hay 3 tubos: Disolución isotónica: 0’9 % (I) Disolución Hipertónica (H) Disolución Hipotónica: Agua destilada (h) Por otro lado, hay otro tubo con un tapón verde: Son los hematíes. Lo que vamos hacer es coger una micropipeta y tomar 200 microlitros de hematíes y ponerlos en los tubos I, H y h. Antes de coger la cantidad de hematíes, agitamos un poco el tubo para mezclar los elementos formes. Cuando cojamos la sangre metemos la punta de la pipeta. Tenemos 3 pipetas pastel (1 para cada tubo). Presionamos la pipeta y la pongo dentro del tubo de la sangre. Para homogeneizar. Dejo la pipeta dentro de cada tubo (I, H y h)
En esta práctica utilizaremos muestras biológicas, por lo que es importante llevar guantes y Con la solución hipotónica intentaremos enfocar porque normalmente hay pocas células y muchos restos. Con la centrifugadora En la disolución I observamos un sedimento rojo intenso y un sobrenadante tirando a transparente (amarillento) En la disolución H vemos un sedimento rojo más pequeño que el anterior porque ha perdido volumen por la deshidratación y un sobrenadante menos transparente En la disolución h observamos una nubecilla blanquecina (sedimento de membrana) y un sobrenadante rojo (debido a la ruptura de membranas, se produce la liberación del grupo HEMO y de ahí el color rojo)