¡Descarga N Antisuero contra el factor del complemento humano (C3c, C4): Guía de uso y análisis y más Monografías, Ensayos en PDF de Organización y Gestión del laboratorio solo en Docsity!
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N antisuero contra el factore del complemento
humano (C3c)
N AS C
N antisuero contra el factore del complemento
humano (C4)
N AS C
La barra de revisión indica una actualización de la versión anterior.
Sistema Atellica® NEPH 630 / Sistema BN II / Sistema BN ProSpec®
Uso Previsto
Reactivos de diagnóstico in vitro para la determinación cuantitativa de factores complementarios (C3/C3c y C4/C4c) en suero humano o plasmas con heparina o EDTA por medio de inmunonefelometría en los sistemas Atellica® NEPH 630, BN II y BN ProSpec® como ayuda en el diagnóstico de trastornos inmunológicos asociados a las proteínas del complemento C3 y C4.
Resumen y Explicación
El sistema del complemento es una parte de la respuesta inmunológica inespecífica al antígeno. Este sistema puede ser activado por 2 vías, la vía clásica que es activada principalmente por complejos inmunológicos adheridos a la célula y la vía alternativa la cual es activada especialmente por cuerpos extraños, como microorganismos. El componente C3 del complemento es una proteína clave para las dos vías, mientras que C4 solamente pertenece a la vía clásica. La activación del complemento ocasiona un gasto en los componentes C3 o C4, de tal manera que de una disminución en su concentración se pueden sacar conclusiones diagnósticas. Concentraciones bajas de C3 y C4 en el suero, se observan sobre todo en lupus eritematoso sistémico (LES), en algunas formas de glomerulonefritis membranoproliferativa y en enfermedades por inmunocomplejos (enfermedad del suero). En el LES, la concentración en el suero de los factores del complemento refleja la actividad de la enfermedad. Disminuciones de C3 se presentan en glomerulonefritis aguda y membranoproliferativa, mientras que aisladas disminuciones de C4 pueden aparecer en el angliodema hereditario (AH) y en crioglobulinemias. Los dos componentes del complemento reaccionan como proteínas de fase aguda, por lo cual, pueden presentar concentraciones elevadas en el suero en enfermedades infecciosas. Estados de deficiencia hereditaria de estos dos factores del complemento están descritos en la literatura^1 –^3.
Principio del Método
Las proteínas contenidas en los líquidos corpóreos humanos forman, en una reacción inmunoquímica con anticuerpos específicos, inmunocomplejos los cuales pueden dispersar un rayo de luz incidente. La intensidad de la luz dispersada es proporcional a la concentración del
correspondiente factor del complemento en la muestra. La valoración se efectúa por comparación con un estándar de concentración conocida.
Reactivos
Materiales suministrados
N AS C3 , REF OSAP
1 x 5 mL N AS C3^ , N Antisuero contra C3c-humano o 1 x 2 mL N AS C3^ , N Antisuero contra C3c-humano o N AS C4 (^) , REF (^) OSAO 1 x 5 mL N AS C4^ , N Antisuero contra C4-humano o 1 x 2 mL N AS C4^ , N Antisuero contra C4-humano
Composición
Los N Antisueros son sueros líquidos de origen animal, elaborados mediante la inmunización de conejos con factores del complemento humano (C3c o C4) de alta pureza. La concentración de anticuerpos activos es < 6,4 g/L en el caso del C3c humano y < 5,4 g/L para el C4 humano. Agente de conservación N Antisuero contra C3c o C4: azida sódica: < 1 g/L
Advertencias y Medidas de Seguridad
Sólo para ser utilizado en diagnósticos in-vitro. Contiene azida sódica (< 1 g/L) como conservante. La azida sódica puede reaccionar con las tuberías de cobre y plomo y formar azidas metálicas explosivas. Cuando se eliminen los reactivos, enjuagar con agua abundante para evitar la acumulación de azidas, si la eliminación es a través de los desagües sanitarios de acuerdo con la normativa vigente.
Preparación de reactivos
Los N antisueros están listos para ser utilizados y pueden aplicarse sin ningún otro tratamiento preliminar.
Estabilidad y Condiciones de Almacenaje
Tiempos de conservación entre 2 a 8 °C: La fecha de vencimiento viene dada en la etiqueta; Estabilidad después de abierto: Cuatro semana, siempre que los frascos, después de ser empleados, se mantengan entre 2 a 8 °C perfectamente cerrados, para evitar contaminaciones (por ej., por microorganismos). Los N Antisueros pueden presentar durante el almacenamiento floculación y turbidez, que no son ocasionadas por contaminación microbiológica y que no influyen de manera alguna en su actividad. En estos casos se deben filtrar los antisueros antes de usarse, empleando para ello filtros desechables con un diámetro de poro de 0,45 μm. Los reactivos no se deben congelar. Estabilidad en los sistemas BN: Un mínimo de cinco días, ocho horas por día, para los frascos de 5 mL y de tres días, ocho horas por día, para los frascos de 2 mL o en un periodo de tiempo comparable. Nota: La estabilidad dentro del equipo puede variar en función del sistema utilizado y de las condiciones de laboratorio. Para obtener más información, consulte el manual de instrucciones del sistema que corresponda.
Materiales necesarios pero no suministrados
Sistema Atellica® NEPH 630, sistema BN II o sistema BN ProSpec®
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Medición de Muestras
Las muestras de suero y plasma se diluyen automáticamente en una proporción de 1:20 con N Diluyente. Las muestras diluidas han de ser analizadas en un plazo máximo de cuatro horas. Si los resultados obtenidos se encuentran fuera del rango de medición, el análisis puede repetirse utilizando una dilución mayor o menor de la muestra. Consulte el manual de instrucciones del sistema que corresponda para averiguar cómo se repiten las mediciones utilizando otras diluciones.
Control de Calidad Interno
Los N/T Proteína-controles SL/L, M y H se deben utilizar después de cada elaboración de una curva de referencia, después de abrir un frasco de antisuero por primera vez, así como también, con cada serie de muestras. Los controles deben manejarse en el test y en la evaluación como las muestras de pacientes. Los valores teóricos y los rangos de confianza se deben tomar de la Tabla de valores teóricos correspondiente a cada control. Siga las reglamentaciones gubernamentales o los requisitos de acreditación para conocer la frecuencia de control de calidad. Si los resultados de las medidas de control se encuentran por fuera del rango de confianza, se debe repetir la determinación del control. Si después de repetir, se confirma la desviación, se debe elaborar una nueva curva de referencia. Los resultados de los pacientes no se deben dar hasta que la causa de esta desviación no haya sido identificada y corregida.
Resultados
La evaluación se lleva a cabo automáticamente en g/L o en una unidad derivada seleccionada por el usuario.
Limitaciones del Procedimiento
No se ha establecido una alteración por medio de triglicéridos hasta 5,7 g/L (C3) o 2,4 g/L (C4), bilirrubina hasta 600 mg/L y hemoglobina libre hasta 10 g/L. No se conocen alteraciones por medio de medicamentos de uso común. La presencia en la muestra, de turbidez y de partículas puede alterar la determinación. Por esta razón, las muestras que contienen partículas deben ser centrifugadas antes de empezar la determinación. Las muestras turbias o lipémicas que no pueden aclararse mediante centrifugación (10 minutos a 15 000 x g aproximadamente) no deben usarse. Siemens Healthcare Diagnostics ha validado el uso de los reactivos en varios analizadores para optimizar el rendimiento del producto y cumplir con las especificaciones del mismo. Las modificaciones definidas por el usuario no están garantizadas por Siemens dado que pueden afectar al rendimiento del sistema y a los resultados del ensayo. Es responsabilidad del usuario validar las modificaciones realizadas a estas instrucciones o el uso de los reactivos en analizadores distintos a los incluidos en las hojas de aplicaciones de Siemens o en estas instrucciones de uso. Los resultados de esta prueba deberán interpretarse siempre de acuerdo con la historia clínica del paciente, la sintomatologia clínica y otras observaciones. Debido a los efectos matrices, las muestras para analizar inter-laboratorios y las muestras control pueden producir resultados diferentes, dependiendo del método utilizado para la determinación. Por esta razón, es necesario evaluar estos resultados en relación con valores objetivo específicos del método.
Intervalos de Referencia
Para sueros y plasmas de donantes adultos sanos se obtuvieron los siguientes rangos de referencia^5 : C3/C3c 0,9 - 1,8 g/L C4/C4c 0,1 - 0,4 g/L
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En muestras frescas se esperan concentraciones de C3 más bajas. Los rangos de referencia para C3 y C4 dependen de la edad de la muestra y de su almacenamiento (ver “Material a investigar”). Por lo tanto, cada laboratorio debe además realizar sus propios rangos de referencia ya que estos están bajo la influencia de muchos factores como la edad y el almacenamiento de las muestras, que pueden ser variables para cada colectividad investigada.
Características Específicas del Test
Rango de medida y sensibilidad
El rango de medida para los N Antisueros contra C3c y C4 humanos es para C3c 0,12 - 4,1 g/L C4 0,06 - 1,9 g/L para una dilución de los sueros y plasmas de 1: La sensibilidad de la determinación se fija de acuerdo al límite inferior de la curva de referencia y depende de la concentración de proteínas del N-Proteína-estándar SL. Una medida típica de sensibilidad para C3/C3c es de 0,02 g/L y para C4/C4c de 0,001 g/L.
Especificidad
No se conocen reacciones cruzadas de los antisueros utilizados.
Precisión
Los siguientes coeficientes de variación (CV) fueron obtenidos con los N Antisueros contra los factores del complemento en el sistema BN (n = 40):
C3/C3c Valor promedio (g/L)
Inter assay CV (%)
Intra assay CV (%)
Total CV (%)
N/T Proteína-control, nivel L 0,84 2,0 2,4 2, N/T Proteína-control, nivel M 1,17 2,6 4,2 4, N/T Proteína-control, nivel H 1,65 2,8 2,8 3, Pool de sueros (bajo) 1,21 2,1 3,2 3, Pool de sueros (alto) 1,71 2,0 2,0 2,
C4/C4c Valor promedio (g/L)
Inter assay CV (%)
Intra assay CV (%)
Total CV (%) N/T Proteína-control, nivel L 0,132 1,3 1,9 2, N/T Proteína-control, nivel M 0,197 1,9 1,9 2, N/T Proteína-control, nivel H 0,317 1,6 1,8 2, Pool de sueros (bajo) 0,338 2,8 1,7 3, Pool de sueros (alto) 0,462 1,6 2,3 2,
Los resultados fueron calculados por análisis de varianza. Se ha confirmado la equivalencia para el Sistema Atellica® NEPH 630.
Comparación de métodos
Se midieron muestras de sueros con los N Antisueros contra los factores del complemento humano en el sistema BN (y) y se compararon con un método de determinación inmunoturbidimétrico (x). La correlación de los resultados dio los siguientes datos:
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Atellica y BN ProSpec son marcas comerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.
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